Transcript Enterobacterii – LP1, Lumi

Familia Enterobacteriaceae
LP 1
Familia Enterobacteriaceae


Manualul de Bacteriologie sistematica Bergey
(editia III / 2004)
Reuneste in prezent 44 genuri, dintre care 25 au
fost implicate semnificativ in patologia umana
Familia Enterobacteriaceae
Genul
Numar de specii
Specii cu importanta
medicala
I. ESCHERICHIA
7
E. coli, E. fergusonii,
E. hermanii, E. vulneris
X. CITROBACTER
12
C. freundii, C.
amalonaticus, C.
diversus
XII.
ENTEROBACTER
16
E. cloacae, E. aerogenes,
E. agglomerans, E.
sakazakii
XV. HAFNIA
1
XVI. KLEBSIELLA 10
H. alvei
K. pneumoniae, K.
rhinoscleromatis, K.
oxytoca, K. ozaenae
Familia Enterobacteriaceae
Genul
Numar de specii
Specii cu importanta
medicala
XXI.
MORGANELLA
1
M. morganii
XXIX. PROTEUS
8
P. vulgaris, P. mirabilis,
P. penneri
XXX.
PROVIDENCIA
6
P. alcalifaciens, P.
rettgeri, P.stuartii
Familia Enterobacteriaceae
Genul
Numar de specii
Specii cu importanta
medicala
XXXIV.
SALMONELLA
8
S. enterica, S.
choleraesuis, S. arizonae,
S. enteritidis, S.
paratyphi, S. typhi, S.
typhimurium
XXXVI. SERRATIA 12
S. marcescens, S.
liquefaciens
XXXVII.
SHIGELLA
4
S. dysenteriae, S. boydii,
S. flexneri, S. sonnei
XLIII. YERSINIA
12
Y. pestis, Y.
enterocolitica, Y.
pseudotuberculosis
Caractere morfo-tinctoriale:
•
Bacili Gram-negativ
•
Mobili prin flageli peritrichi / imobili
•
Unii au capsulă: genul Klebsiella (K. pneumoniae)
•
Nu formează endospori (nesporulati)
Caractere de cultură:
•
•
•
•
•
•
Aerob - facultativ anaerobe
Nepretentiosi nutritiv – cresc pe medii cu
peptona in prezenta bilei
Fermenteaza glucoza
Oxidazo – (-)
Produc catalaza
Reduc nitratii la nitriti
Caractere de cultură:
•
•
•
•
Tulbură uniform mediul de cultură lichid
Colonii tip S, dar si R
Uneori, colonii mucoase (tip M): Klebsiella
pneumoniae
Medii selective, majoritatea au lactoză:
•
•
•
Drigalski, Levin, MacConkey,
Leifson (ADCL), Istrate-Meitert, Hektoen, SS,
Wilson - Blair
Mediul Levin (EMB)



Categoria: Mediu slab
selectiv si diferenţial
Contine: Eozina Y si
albastru de metilen, care
inhiba bacteriile Gram
(+)
Utilizare: cultivarea
enterobacteriilor (E. coli)
Mediul ADCL (Leifson)




Categoria: Mediu moderat
- selectiv si diferenţial
Contine: agar –
dezoxicholat – citrat –
lactoza
Inhiba bacteriile Gram (+)
si o parte din bacteriile
Gram (-)
Utilizare: cultivarea
shigellelor si salmonellelor,
Yersiniei
Familia Enterobacteriaceae
Categoria
Gruparea taxonomica
I. Patogene
Salmonella, Shigella –
certa
Escherichia (fenotipuri
diareigene si uropatogene
de E. coli), Yersinia
II. Conditionat patogene
Citrobacter, Enterobacter,
Escherichia, Klebsiella,
Morganella, Proteus,
Providencia, Serratia
III. Ocazional - patogene Cedecea, Hafnia, Kluyvera,
Pantoea, Tatumella,
Yokenella
Semnificatia etiologica
Izolate semnificativ in
prelevate necontaminate
(LCR, prelevate din
cavitati inchise,
hemoculturi, colectii
neabcedate
Genul Shigella
patogen intestinal
Caracteristicile speciilor de Shigella:
 imobile
 nu fermentează lactoza pe mediile cu lactoza –
lactozo (-)
 determină dizenterie bacilară – boala
specific umana:

•
•
•
febră,
colici abdominale,
scaune diareice muco - sangvinolente
Clasificarea Shigella
In functie de antigenul somatic O:
•
Shigella dysenteriae: 13 tipuri: 1 – S. shigae, 2 – S.
schmitzii, 3 – 7 S. Large Sachs, 8 – 13
•
Shigella flexneri: 6 tipuri (1 – 6), 10 subtipuri (1a, 1b,
2a, 2b, …, 5a, 5b), 2 variante (x, y)
•
Shigella boydii: 18 tipuri (1 – 18)
•
Shigella sonnei (2 tipuri: S, R)
Recoltarea produselor patologice




Produs patologic: Materii fecale (emisie
spontana, sondaj recto – sigmoidian cu sonda
Nélaton
cât mai aproape de debutul bolii
inaintea instituirii tratamentului antimicrobian
Coprorecoltor steril cu mediu de transport:
Cary - Blair
Examenul microscopic din produs
patologic
-
oferă informatii importante pentru
diagnosticul diferential al enterocolitei
preparatul nativ între lamă si lamelă →
polimorfonucleare, eritrocite
poate evidentia chiste sau trofozoiti de
Entamoeba histolytica (exclude dizenteria
bacilara)
Coprocultura
Izolarea:
- Medii de cultură selective si diferentiale pentru
enterobacterii:
* Drigalski
* Levin
* MacConkey
* Leifson (ADCL)
* Istrate-Meitert
* Hektoen
Caractere morfo-tinctoriale
Bacili Gram-negativ
Proprietăţi de cultură
Colonii S sau R
 Lactozo - negative

Identificarea preliminara

caracteristicile biochimice: TSI, MIU, MILF,
Citrat: lactozo (-), nu produce gaz din
fermentarea glucozei, nu produce H2S, imobil,
ureaza (-), indol (+/-), lizindecarboxilaza (-),
fenilalanindezaminaza (-), citrat (-).
 caracteristicile antigenice (tiparea serologica):
permit clasificarea de grup, de tip (ex.: S.
disenteriae, S.flexneri etc.).
Patogenie



Shigella este agentul dizenteriei bacilare (shigelloză)
Ag. de suprafata permit atasarea non – receptor
specifica, modificarea citoscheletului, endocitarea
bacteriei, apoi diseminarea in submucoasa unde produc
necroze – patogenitate de tip invaziv.
Exotoxinele – sunt, de asemenea implicate (ex.: toxina
Shiga, produsa de S. dysenteriae blocheaza sinteza
proteica, prin efect citotoxic asupra endoteliului capilar
determina complicatiile vasculare si producerea Sdr.
hemolitic – uremic din shigeloze).
Manifestări clinice
se manifestă prin: colici abdominale severe,
varsături, tenesme si scaune caracteristice
muco - sanguinolente.
 rareori, caracter invaziv
 complicatii extraintestinale: tulburari
neurologice, sdr. hemolitic – uremic, artrita
reactiva. Aparitia lor depinde de virulenta
tulpinilor.

Epidemiologie:





Shigella este un patogen specific uman
se transmite pe cale fecal - orală, asociata
intotdeauna cu un nivel igienico – sanitar scazut
insectele (mustele) sporesc potentialul
epidemigen estival
transmisia hidrica este importanta
dezastrele naturale si razboaiele au fost frecvent
asociate cu izbucniri epidemice de dizenterie.
Teste de patogenitate
Testul Sérèny (testul
keratoconjunctivitei):
- poate confirma caracterul de
invazivitate al Shigellelor izolate;
- acest test nu se foloseste în mod uzual.
- o picătură cu Shigelle invazive izolate
depusă în corneea unui cobai (porc de
Guineea), va produce keratoconjunctivite severe în câteva zile, prin
invazie la cornee, care se vindecă
complet în 2 - 3 săptămâni.
Tratament

se face în functie de sensibilitatea la antibiotice,
conform antibiogramei difuzimetrice Kirby –
Bauer, efectuata dupa standardul CLSI.
Genul Salmonella
peste 2200 serotipuri
Infecţii (salmoneloze):
•
Febra tifoidă – S. typhi
Febra paratifoidă – S. paratyphi A, B
Toxiinfecţii alimentare şi enterite (copii)
•
Stări septico - piemice
•
•
S. typhymurium
S. enteritidis
S. paratyphi B
S. panama
S. paratyphi C
S. choleraesuis
Caractere generale:
•
bacili Gram – negativ
•
mobili (flageli peritrichi)
•
lactozo – negativi
•
identificarea antigenelor O, H, Vi →
reacţii de aglutinare
Salmoneloze majore





febra tifoidă si paratifoidă determinate de bacilul tific si
paratific - afectează exclusiv omul,
omul si animalele sunt responsabile de poluarea solului, a
apelor reziduale, apelor de suprafata, in care pot supravietui
luni si chiar ani (in sol)
se transmit pe cale fecal - orală, apă contaminată,
intensificarea comertului si a calatoriilor la mari distante,
migratiile populationale, industrializarea alimentatiei si a
cresterii animalelor de consum (porci, pasari) in mari
colectivitati consumatoare de hrana cu adaosuri proteice
deseori contaminate (fainuri furajere de carne, oase, sange) au
contribuit esential la raspandirea larga a serovarurilor si
totodata la cresterea morbiditatii prin salmoneloze.
factori sezonieri si clima calda favorizeza, in conditii precare de
igiena, nivelul morbiditatii
Manifestari clinice
Febra tifoida
S1: letargie, febră, dureri, constipatie;
 S2: febră mare, abdomen dureros, rozeole
tifice, diaree, hepatosplenomegalie.

Salmoneloze minore



au o incidentă crescută în ultimul timp,
manifestându-se prin toxiinfectii alimentare
I loc in etiologia toxiinfectiilor alimentare
Cauze: ingerarea de carne, lapte, ouă infestate
cu specii de Salmonelle: S. typhimurium, S. anatum,
S. enteritidis.
TABLOU CLINIC
Simptomele (Dg. diferential cu infectiile alimentare
stafilococice) sunt:
• incubatie mai lungă de 12 – 48 de ore,
• febră,
• sindrom diareic
• stari septico - piemice
Recoltarea produselor patologice
Febre tifo – paratifoide:


S1: hemocultură
S2: urocultură, coprocultură
Gastroenterite:



coprocultură
lichid de vărsătură
alimente
Examenul microscopic din produs
patologic
Nu oferă informatii relevante!
Coprocultura
Izolarea:
- Medii de imbogătire:
-
-
Bulion cu selenit acid de sodiu
Medii moderat – selective, inalt - selective si
diferentiale:
-
-
Leifson (ADCL)
Istrate-Meitert
SS
Hektoen
Wilson - Blair
Caractere morfo-tinctoriale
Bacili Gram - negativ
Proprietati de cultura
Colonii S
Proprietati de cultura
Mediul Drigalski
Colonii lactozo - negative
Proprietati de cultura
Lactozo - negativ
Mediul Levin
Proprietati de cultura
Agar Mac Conkey
Identificarea
se bazează pe:
 caracteristicile morfologice: bacili gram - negativi, mobili
 caracteristicile de cultură: colonii S, lactozo – negative,
transparente sau in culoarea mediului, cu centrul negru
(“ochi de pisica”)
 caracteristicile biochimice: Lactoza (-), H2S (+), produc gaz
in cantitate mica sau deloc din fermentarea glucozei,
mobile, ureaza – (-), Indol (-), lizindecarboxilaza (+),
fenilalanindezaminaza(-), Citrat (+), rosu-metil (+).
Diagnostic serologic indirect
reacţia Widal



Sunt colectate 2 probe de sânge în prima si a – 3
– a săptămână de boala.
se identifică anticorpii specifici anti - S. typhi, S.
paratyphi A si B in serul pacientilor, separat
pentru antigenul O (somatic) si H (flagelar) –
prin reactii de aglutinare directa in tuburi.
se stabileste dinamica titrului de ac. anti – O si
anti – H.
Tratament

în functie de testul de sensibilitate la antibiotice
(antibiograma difuzimetrica Kirby – Bauer, conform
standardelor CLSI).
este recomandat: Cloramfenicolul.

Ampicilina si Trimethoprim -sulfamethoxazolul

sunt alternative cu efecte secundare mai puţin severe.
in ultima vreme, se descriu tot mai mult tulpini de
Salmonella spp. cu fenotipuri de rezistenta de tip ESBL!

Tema pentru studenti




Cautati pe net imagini cu culturi de
Enterobacterii (Salmonella, Shigella).
Incercati sa descrieti caracterele de cultura
particulare, metodele de identificare biochimica
si antigenica pentru fiecare gen descris in aceasta
lucrare.
Desenati in caietul de lucrari practice coloniile si
algoritmul de identificare!
Tema va fi evaluata si punctata!