Transcript 临床意义
临床 血液实验诊断 黄伏生 概述: 血细胞的来源与生成 第一节 血液一般检验 (blood routine test) 血液: 有形成分:红细胞、白细胞、血小板 (某些病理物质如MP)。 无形成分:水、无机物、有机物。 一、红细胞检查 RBC、HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC、 RDW、Ret、ESR等 红细胞计数(手工) 〔原理〕 用稀释液将血液稀释一定的倍数, 混匀后冲入计数池,在显微镜下 计数一定体积的红细胞数,再换 算成每升血液中红细胞数量。 〔器材〕显微镜、计数板、微量吸管、 试管等。 〔试剂〕红细胞稀释液(Hayem液) NaCl1.0g 、Na2SO42.5g 、 HgCl20.5g、蒸馏水加至1000ML 〔操作〕 1.稀释液2ML+全血10μL混合 均匀 2.充池 3.计数 4.换算 公式 RBC/L=N*5*200*10*106 N--RBC个数/5个中方格中 1/5×25--换成1个大方格 200――稀释倍数 10――换算成mm3 106――由1mm3换算成1L体积 RBC/L=1/100N*1012/L (*1012 /L ----T/L) 临床意义 1.生理变化 2.病理变化 (应与HGB等指标同时进行分析) 血红蛋白测定(HGB) (一)氰化高铁血红蛋白测定(HiCN)法 HiCN的mmol消光系数――44mmol/L/cm 〔原理〕 血红蛋白被高铁氰化钾氧化为 高铁血红蛋白,再与CN -结合生成稳定的 综红色复合物-氰化高铁血红蛋白 (HiCN),HiCN在波长540nm处有一吸收 峰,通过分光光度计测定该处的吸光度, 再换算成每升血中血红蛋白浓度,也可制 备标准曲线供查阅其含量。 blood: [操作] 1.试剂5ml+全血20μl混匀放置放置5min 2. 比 色 : 分 光 波 长 为 540nm , 杯 径 1.0cm 测 定 光密度A 3.计算Hb=A*64458/(44*1000)*251=367.7A 4.标准曲线法:简易标准曲线K=∑Hb/ ∑A 还可采用回归方程法 (二)其他方法 1.Sahli法 2.HiN3法 3. SDS法 (三) 临床意义:与RBC相结合 红细胞比容测定 温氏法 原 理 ( Wint robe ) (手工) 〔操作〕 1.将抗凝血注入温氏管刻度处,用橡 皮塞塞紧管口 2.离心:3000r/min离心30min 3.结果观察:读取最下面红细胞层 〔参考值〕男性:(0.40~0.54)L/L 女 性 : ( 0.37 ~ 0.47 ) L/L 〔 临 床意 义 〕主 要 用于 计 算红细胞的 3 个 平均指数 1.增高:多见于各种原因引起的血液浓缩 2.降低:主见于各种贫血 微量法: 与常量法基本相同 不同的是离心管改用微量管 离心速度为12000r/min*5 仪器法:HCT=MCV*RBC 红细胞平均指数 红细胞平均容积 (MCV,men corpuscular volume) 红细胞平均血红蛋白含量 (MCH, men corpuscular hemoglobin) 红细胞平均血红蛋白浓度 ( MCHC, mem corpuscular hemoglobin concentration) 〔计算公式〕 1. 2. 3. MCV=HCT/RBC(fL) MCH=HGB/RBC(pg) MCHC=HGB/HCT(g/L) 参 考 值 ] 仪器法 MCV (80-100)fl MCH (27-34)pg MCHC 360)g/l 手 工 法 (80-92)fl (27-31)pg (320-360)g/l (320- [临床意义] 可作为贫血的红细胞形态学 分类 红细胞体积分布宽度 红细胞体积分布宽度 ( RDW,red blood cell distribution width)是血液分析仪特有的检测项目 〔原理〕 利 用coulter 原理测定红细 胞体积,根据红细胞不同体积的大小 在坐标上排列成一条曲线(直方图) 将曲线的底部的宽与曲线的高度的比 所得值。 coulter原理测定血细胞示意图 µL 不同时间段所测红细胞频数(t) 1 2 组 段 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 31~50 3 1 0 2 1 1 0 2 4 2 0 3 0 0 0 0 51~70 5 6 19 7 6 5 6 3 0 7 7 7 7 8 7 8 71~90 10 49 51 53 11 50 45 34 27 34 38 21 26 28 15 20 91~110 18 19 18 63 15 10 18 15 11 11 15 18 29 10 67 14 111~130 29 128 119 169 261 338 209 112 205 113 96 114 164 333 324 290 131~160 360 43 2 2 95 398 451 454 331 267 262 228 325 451 115 236 392 302 161~190 456 475 444 442 4 29 463 401 335 354 362 366 333 364 353 322 415 191~240 436 623 378 324 550 346 356 387 122 358 407 457 457 414 311 326 241~270 335 339 381 119 129 198 254 213 119 12 109 15 210 237 115 158 271~300 121 128 118 217 118 112 17 15 141 17 18 15 116 28 14 20 301~330 120 170 310 119 27 25 22 22 25 18 23 28 35 15 25 19 331~360 34 35 121 122 23 111 25 22 20 34 18 26 20 20 28 20 361~390 19 26 24 25 32 13 26 15 21 14 21 22 18 13 15 22 391~440 21 24 20 23 13 20 21 20 11 25 13 27 19 15 12 13 441~470 12 11 12 10 17 10 11 16 11 10 7 16 12 10 8 10 470~ 6 0 10 14 4 5 8 5 5 1 9 2 0 6 7 3 Sum=7151 〔计算方法〕 RDW=图底宽/图峰高 〔参考值〕 成人 11.6%-14.6% 〔临床意义〕 贫血分类 红细胞形态检查 1 . 红细胞大小 2 . Hb含量改变 3 . 红细胞形状改变 4 . 红细胞内出现异常结构 二、白细胞检测 白细胞计数(WBC) 与红细胞计数基本相同 略 四、白细胞形态 (一)正常白细胞形态 (二)异常白细胞形态 正常白细胞形态 各类异常白细胞 五、白细胞分类计数 (DC ,differential count)(手工) 〔原理〕 各类不同的白细胞对染料中不同 成份着色程度不同,通过染色后可以显示 不同颜色,在镜下可计数各类白细胞占整 个白细胞的比例。 〔器材〕显微镜等 〔试剂〕瑞氏染液 〔标本〕血涂片 〔操作〕 1.染色:在血涂片上加染液数滴再加缓冲 液适量。 2计数:在油镜下计数100个白细胞,记录 其中各类白细胞数所占总数的百分比。 〔报告方式〕 N % L % M % E % B % 〔参考值和临床意义〕见下表: 白细胞计数及各类白细胞临床意义 参考值 增高 减低 成人:4~10 初生儿:15~20 1/2~2岁:11~12 急性细菌感染、组织损伤、失 血、中毒、类白血病、白血病、 生理性增高 病毒感染、某些传染病、某 些血液病(再障)、放化疗、 脾亢、自身免疫性疾病 N 50~70% 同上 同上 E 0.5~5% 过敏性疾病、寄生虫感染、嗜 酸性粒细胞白血病、慢性粒细 胞白血病猩红热、恶性肿瘤、 如肺癌、霍奇金氏病等。 某些传染病,如伤寒、术后 严重组织损伤、使用肾上腺 皮质激素 B <1% 慢粒、真性红细胞增多症、变 态反应、甲退等。 Ⅰ型变态反应、促肾上腺皮 质激素和糖皮质激素过量、 甲亢、科兴氏综合症等 L 20~40% 病毒感染、传单、结核、肾移 植、再障、淋巴细胞白血病等 M 3~8% 传染病、EB病毒感染、寄生虫、 结核、慢性炎症、处理抗原、 免疫应答、MDS、恶组、淋巴 瘤 放射线、使用肾上腺皮质激 素,促肾上腺皮质激素、某 些感染引起的白细胞增高而 相对减低 免疫功能低下 WBC G/L 重要名词解释 1.核左移 2.核右移 3.异型淋巴细胞 三、血小板检测 血小板计数(PLT): 同红细胞计数(RBC) PLT临床意义 参考范围(100~300)G/L PLT减少 PLT增高 血小板平均体积(MPV) Men platlet volume 检测同RBC 参考范围:7~11fL 临床意义:与PLT的数量不一定成比例 血小板比容(PCT) 检测同RBC 参考范围 0.1~0.3)% 临床意义:与PLT数量相关 血小板体积分布宽度(PDW) 检测同RBC 参考范围(15~17)% 临床意义:PLT体积大小 不等 PLT直方图的分布 激光式血液分析仪的工作原理 激光鞘流术血细胞分类计数原理 激光鞘流技术的血细胞 计数原理 激光鞘流术血细胞分类计数原理 多角偏振光散射白细胞分类技术(MAPSS)。 0度与10度光散射白细胞散点图分布。 根据光散射理论,当激光照射到流动室内流过的每一个细胞时, 由于细胞的物理特性,部分光线从细胞上经不同的角度散射。其中 ,前向小角度散射光的光强可以反应细胞体积;大角度散射光的光 强可以反应细胞核,浆复杂度和细胞颗粒的信息;而侧向散射光的 光强可以反应细胞膜、核膜、细胞质的变化。因此,可以依据细胞 表明光散射的特点对细胞进行分类。用激光光源产生的单色光束直 接进入计数池的敏感区,在不同角度(10度~70度)对每个细胞进行 扫描分析,测定其散射光强度,从而提供细胞结构、形态的光散射 信息。由于粗颗粒细胞的散射强度比细颗粒细胞更强,故光散射对 细胞颗粒的构型和颗粒质量具有很好的区别能力 MAPSS技术临床报告散点图 解读血液常规报告 临床病例讨论 1997年11月,中南医院收到从武汉市江夏区转来 的一批患者,共12人,均为某小工厂工人,由于 诊断不明确而入我院内科。 主诉 12人同时发热1周。 症状和体征:发热不退,有时寒颤,热型不典型, 无明显消化道和呼吸道症状,但食纳差。胸透和 心电图基本正常,血常规WBC均不高,部分患者白 细胞反而偏低,白细胞分类计数中,部分患者嗜 中性粒细胞偏低,淋巴细胞、单核细胞以及嗜碱 性粒细胞基本正常,嗜酸性粒细胞低。 由于当时情况较急,在仅有上述临床资料 情况下,院领导召集全院各科相关人员会 诊,通过到会专家反复讨论,大部分专家意 见偏向于这批患者很可能是病毒感染。但 也有不同意见。 大家思考:??? 作者散会后回到实验室调出该12位患者的血液 常规结果,对每一项指标进行了横向分析,发 现这12位患者的结果中,有11位患者的嗜酸性 粒细胞分类计数明显低于参考值,只有一位在 正常参考范围内。因此,对这12份全血标本, 用手工方法进行嗜酸性白细胞直接计数,结果 其中11份标本嗜酸性粒细胞直接计数为0,只有 1份标本为正常参考范围内0.044G/L。 大家思考:此时,你认为??? 将此结果向内科和医院有关领导作了汇报,并 提出了诊断参考意见(伤寒)。 院领导重新召集各科专家会诊,结果仍然有分 歧,但还是采纳了上述意见,作为伤寒观察治 疗,每天坚持做肥达实验:结果第一天、第二 天肥达实验仍然是阴性,直到第三天其中有4位 患者呈阳性,到第四天、第五天全部为阳性结 果。其后这批病人转入感染科经伤寒治疗痊愈 出院。