Transcript آنتی بیوگرام

‫بسم هللا الرحمن الرحیم‬
‫موضوع‪:‬‬
‫استاندارد عملکردی آزمایش تعیین حساسیت‬
‫ضد میکروبی‬
‫تهیه کننده گان‪:‬‬
‫سمانه عبیری‪-‬فرزین شیخ‬
‫دی ماه‪1393‬‬
‫مقدمه‬
‫یکی ازمهمترین وظایف آزمایشگاه میکروبشناسی تعیین‬
‫حساسیت آنتی بیوتیکی درباکتریهای جداشده ازعفونتهای‬
‫بیماران میباشد‪.‬‬
‫ارگانیسمهای پاتوژن روی محیط مولرهینتون‬
‫آگاردرحضوردیسکهای فیلتری کاغذی‬
‫رشدمیکنند‪.‬وجودیاعدم رشددراطراف دیسکها به طور‬
‫غیرمستقیم توانایی عوامل ضد میکروبی درمهاررشد‬
‫میکروارگانیسمها رانشان میدهد‪.‬‬
‫مولرهینتون آگار‬
‫استانداردترین محیط کشت برای تعیین حساسیت آنتی‬
‫بیوتیکی میباشد‪.‬برای اغلب باکتریها کاربردداشته‬
‫وبااضافه کردن مکملهای موردنیازجهت ارگانیسمهای‬
‫سخت رشد نیزکاربرد دارد‪.‬عمق‬
‫آگارباید‪4‬میلیمترباشد‪.‬عمق کمترمنجربه زیادشدن‬
‫قطرهاله میشودوعمق بیشترمنجربه کم شدن قطرهاله‬
‫میشود‪.‬‬
‫تهیه یه غلظت مناسب ازسوسپانسیون‬
‫میکروبی‬
‫تهیه غلظت مناسب ازسوسپانسیون میکروبی درتعیین‬
‫حساسیت انتی بیوتیکی بسیارمهم میباشد‪.‬سوسپانسیون‬
‫میکروبی تهیه شده باید کدورتی معادل نیم مک فارلند‬
‫داشته باشد‪.‬درموردباکتریهای موکوئیدی کدورت ‪1‬مک‬
‫فارلند تهیه میشود‬
‫تلقیح‬
‫ابتدا سواب کتانی استریل را درون سوسپانسیون‬
‫میکروبی فروبرده وسپس بافشردن سواب به‬
‫دیوارداخلی لوله مایع اضافی را میگیرند‪.‬‬
‫کشت‬
‫سواپ آغشته به سوسپانسیون میکروبی را به صورت‬
‫خطوط چمنی ونزدیک به هم درسطح محیط‬
‫مولرهینتون میکشیم‪.‬پلیت را‪ 60‬درجه چرخانده‬
‫واینکار را مجددا تکرار میکنیم‪.‬‬
‫سواپ را دورتادور پلیت کشیده ودقایقی منتظرمیمانیم‬
‫تاسطح پلیت خشک شود‪.‬‬
‫قراردادن دیسکهابرروی پلیت‬
‫دیسکها را با پنس استریل طوری برروی پلیت‬
‫قرارمیدهیم که تمام سطح دیسک با آگارتماس‬
‫یابد‪.‬برروی پلیت‪10‬سانتی نهایتا تا‪6‬عددوبرروی‬
‫پلیت‪15‬سانتی نهایتا تا‪12‬عدد دیسک میتوان‬
‫قرارداد‪.‬فاصله مرکزیک دیسک تادیسک‬
‫دیگر‪24‬میلیمترمیشود‪.‬‬
‫انتخاب دیسک ها‬
‫دیسکهای مورد استفاده جهت عفونتهای سرپایی‬
‫استافیلوکوک‪:‬‬
‫سفالکسین‬
‫ونکومایسین‬
‫کوتریموکسارول پنیسیلین‬
‫نیتروفورانتوئین کلیندامایسین‬
‫اوکساسیلین سیپروفلوکساسین‬
‫درمورداطفال معموال سیپرو فلوکساسین گزارش‬
‫نمیشود‪.‬‬
‫دیسکهای مورداستفاده جهت عفونتهای‬
‫ادراری شدید استافیلوکوکی‬
‫جنتامایسین ونکومایسین‬
‫اوکساسیلین اوفلوکساسین‬
‫سیپروفلوکساسین کلیندامایسین‬
‫کوتریموکسازول نیتروفورانتوئین‬
‫پنیسیلین سفالکسین‬
‫لینوزوید‬
‫تذکر‪:‬لینوزوید‪-‬جنتامایسین‪-‬تتراسیکلین برای عفونتهای‬
‫ادراری خیلی شدید وعارضه داراستفاده میشود‪.‬‬
‫دیسکهای مورداستفاده جهت عفونتهای‬
‫ادراری با انتروباکتریاسه دراطفال‬
‫آموکسیسیلین آموکسی کالو‬
‫آمینوگلیکوزیدها(جنتامایسین)‬
‫سفالوسپورینها(سیفکسیم وسفالوتین)‬
‫نالیدیکسیک اسید ونیتروفورانتوئین‬
‫دیسکهای مورد استفاده جهت عفونتهای ادراری‬
‫باانتروباکتریاسه درخانمهای باردار‬
‫آمپیسیلین آموکسی کالو‬
‫کوتریموکسازول نیتروفورانتوئین‬
‫سفالوسپورینها(سفالوتین‪-‬سفتازیدیم یاسفتریاکسون)‬
‫تذکر‪:‬کوتریموکسازول درسه ماهه سوم بارداری منع‬
‫شده است‪.‬‬
‫تذکر‪:‬سیپروفلوکساسین وتتراسیکلین درموردخانمهای‬
‫بارداراستفاده نمیشود‪.‬‬
‫دیسکهای مورداستفاده جهت عفونتهای ادراری‬
‫باانتروباکتریاسه دربیماران سرپایی وبستری‬
‫سرپایی‪:‬‬
‫سیپروفلوکساسین جنتامایسین‬
‫کوآموکسی کالو‬
‫آمپیسیلین‬
‫کوتریموکسازول نیتروفورانتوئین‬
‫وسفالوسپورینها(سفالوتین‪-‬سفازولین وسیفکسیم)‬
‫تذکر‪:‬سیپروفلوکساسین برای اطفال گزارش نمیشود‪.‬‬
‫بستری‪:‬‬
‫درمورد این بیماران غالبا به دلیل شدت عفونت‬
‫ازدیسکهای‪:‬ایمی پنم‪-‬کوآموکسی کالو‪-‬سفتریاکسون‪-‬‬
‫سفوتاکسیم‪-‬سفتیزوکسیم وسیپروفلوکساسین استفاده‬
‫میشود‪.‬‬
‫انکوباسیون‬
‫پس ازاینکه دیسکها به مدت‪24-18‬ساعت‬
‫دردمای‪37-35‬درجه سانتیگراد انکوبه شدند‬
‫درزیرنورمنعکس کننده هاله عدم رشداندازه گیری‬
‫میشود‪.‬‬
‫برای اندازه گیری هاله عدم رشد ازخط کش استفاده‬
‫میکنیم وقطرهاله رااز لبه تا لبه برحسب میلی‬
‫مترمشخص میکنیم‪.‬سپس باجدول مربوطه مقایسه کرده‬
‫وحساسیت یا مقاومت را گزارش میکنیم‪.‬‬
‫تذکر‪:‬درصورتیکه هاله عدم رشد دوویسک همپوشانی‬
‫داشته باشد شعاع هردیسک را اندازه گرفته‬
‫ودردوضرب میکنیم تاقطر هاله به دست آید‪.‬‬
‫بررسی مقاومت‬
‫چنانچه بررسی مقاومت استافیلوکوک اورئوس به آنتی‬
‫بیوتیکهای اکساسیلین یا ونکومایسین موردنظرباشد‬
‫ازنورمنتقل شده استفاده میشود‪.‬‬
‫نکته‪:‬زمان انکوباسیون نبایداز‪24‬ساعت کمترباشد‪.‬‬
‫نکته‪:‬اگرکلنی های رشدکرده درمیان هاله عدم رشد‬
‫مشابه باکتری اصلی باشد اندازه گیری قطرهاله عدم‬
‫رشد ازکلنی موردنظرمحاسبه میشود‪.‬‬
‫تشخیص استافیلوکوک اورئوس مقاوم به‬
‫متی سیلین(‪:)MRSA‬‬
‫جهت تشخیص سویه های مقاوم به متی سیلین عالوه‬
‫بردیسک اکساسیلین یک میکروگرمی میتوان ازدیسک‬
‫سفوکسیتین‪30‬میکروگرمی نیزاستفاده نمود‪.‬براساس‬
‫آخرین دستورالعمل دیسک سفوکسیتین بهترین گزینه‬
‫برای تشخیص سویه های مقاوم به متی سیلین(به ویژه‬
‫کواگوالز منفی ها)میباشد‪.‬‬
‫استافیلوکوک اورئوس مقاوم به متی‬
‫سیلین(‪)MRSA‬‬
‫تصویر استافیلوکوک اورئوس مقاوم به متی سیلین‬
‫رانشان میدهد‪.‬این کلنی به اکساسیلین مقاوم است‬
‫ونسبت نسبت به داکسی سیکلین حساس است‬