Pseudomonas. Sppl
Download
Report
Transcript Pseudomonas. Sppl
يمثل جنس البكتريا ( ،)Pseudomonas. Spplمجموعة كبيرة
ومهمة من البكتريا السالبة لصبغة كرام والتي توجد بأعداد كبيرة حرة
المعيشة في التربة والمياه العذبة والبيئات المالحة والعديد من البيئات
الطبيعية االخرى فضال عن كونها موجودة مع النباتات والحيوانات
كمسببات مرضية .وهذه البكتريا عصيات مستقيمة أو منحنية قليال
ومتحركة بسوط قطبي غير مكونه لألبواغ وهوائية مجبرة وتنمو
بمدى حراري يتراوح بين ( 42 – 4م )oورقم هيدروجيني مثالي بين
( ،)9 – 7وبتلك القدرة على استغالل العديد من المصادر الكاربونية
مصدرا للطاقة العضوية كما انها موجبة لفحص االوكسيديز
والكاتلزيز وغير مخمرة للكاربوهيدرات إال إنها مستهلكة لها بواسطة
عمليات األكسدة( .عبد الملك وعبد الرحمن)
يضم جنس Pseudomonas.Sppأنواع كثيرة منها المتألق ومنها غيرر
رررربغة البررررايوفردين
المتررررألق وتمترررراق المتألقررررة بقابليتهررررا علررررى أنتررررا
( )Pyoverdineوهرررري رررربغة خضررررراق مصررررفرة متألقررررة فرررري مقدمررررة
المركبات العديدة ذات الفاعلية المضادة للمايكروبرات التري تنتجهرا بكتريرا
الــ (( .)Pseudomonasعبد الملك وعبد الرحمن) .على خالف بكتريرا
( )Pseudomonas aeruginosaالتررري وجررردت بكثررررة فررري العينرررات
السريرية( ،عبد الملك وعبرد الررحمن) .ويعرد اسرتخدام االحيراق المجهريرة
في االحياق التطبيقية من المسارات المهمة التي توسع االهتمام بها عالميرا
لما لها من مردود اقتصادي هرام فضرال عرن تلقيهرا لمصرادر تلرو البيئرة.
من بين االحيراق المجهريرة التري نالرا اهتمامرا واسرعا فري مجرال المقاومرة
الحيوية بكتريا الزوائف والتي تعد ايضا من البكتريا المحفزة لنمو النبرات
(Klopper, ( .)Plans growth promoting rhizobacteria
)1980كمررا أرهرررت قرردرة مهمرره فرري كرربا نشرراط العديررد مررن المسررببات
المرضية.)Lottmann, 2000(.
من بين االحياق المجهرية التي نالا اهتماما واسعا في مجال المقاومة
الحيوية بكتريا الزوائف والتي تعد ايضا من البكتريا المحفزة لنمو
النبات (.)Plans growth promoting rhizobacteria
( )Klopper, 1980كما أرهرت قدرة مهمه في كبا نشاط العديد من
المسببات المرضية.)Lottmann, 2000(.
Literature Review
Kingdom:- Bacteria.
Phylum:- Proteobateria.
Class:- Gamma Proteobacteria.
Order:- Pseudomonadales.
Family:- Pseudomonadaceae.
Genus:- Pseudomonas.
Species:- P. aeruginosa.
استعراض المراجع-2
-: التصنيف1-2
2-2عائلة الــ Pseudomonadaceae
تقع عائلة Pesudomonadaceaeضمن مجموعة الجراثيم العصوية السالبة
لصبغة كرام غير المخمرة لسكر الالكتوزNon – Fermentative Gram – .
negative bacilliوأفراد هذه العائلة جراثيم عصوية مستقيمة قليلة االنحناء،
هوائية اجبارية العديد من السالالت التابعة لها متحركة بواسطة سوط أو أكثر من
االسواط القطبية ،Polar Flagellaتستهلك الكلوكوز وبقية الكاربوهيدرات هوائيا
وغالبا ما يكون افرادها يمتلكون النتيجة الموجبة اتجاه فحص السايتوكروم
أوكسديز .Cytochorme Oxid
-3الزائفة الزنجارية Pseudomonas areuginosa
3-1تسمية الميكروب من أين جاءت-:
المقطع االول لالسم العلمي كلمة Pesudomonasتعني وحدة خاصة
( )false unitحيث تعني بالالتينية Pseudoزائف و monasبوحدة
واحدة ،الكلمة استعملت مبكرا في تاريخ علم االحياء الدقيقة لإلشارة الى
الجراثيم .المقطع الثاني لالسم العلمي كلمة aeruginosaتعني بالالتينية
بالزناجر (صدأ نحاسي) هذا يصف الصبغة الجرثومية الخضراء المزرقة
عند رؤيتها في الزراعة المختبرية للــ .P. aerugiosa
2-3الخصائص العامة Characteristics
يمكن التعرف بشكل أولي على P. aerugiosaعن طريق
خروج رائحة تشبه العنب خارج الجسم ،أما التعريف
السريري والطبي له عن طريق انتاج البايوسينين والفلورسين
اإلضافة الى انها تستطيع ان تنمو على درجة حرارة .42Co
يقع أغلب أنواع جنس الـــــ Pseudomonasضمن
المجموعة
االولى
من
الحمض
النووي
الرايبوسومي rRNA group Iوالتي تضم:
الرايبوزي
P. aeruginosa.
Pseudomonas Putida.
P. mendocina.
P. stutzeri.
P. species group 1.
P. fluorescens.
P. Pseudoalcaligenes.
P. alcaligenes.
.)Koneman etal., 1997(
أفراد هذا الجنس جراثيم عصرية أبعادها m 5-1.5 X 1-0.5والعديد
منها يخزن الطاقة من خالل تراكم مادة Poly B-hydroxybutyrate
والتي تظهر بشكل حبيبات غامقة اللون ،هذه الخاليا الجرثومية غير
محاطة بمحفظة ،ال تمتلك سبورات ،غير مخمرة لسكر الالكتوز،
ومتحركة بواسطة اسواط قطبية واحدة أو أكثر ،هوائية اجبارية
وتستخدم االوكسجين مستقبال نهائيا لإللكترونات في السلسلة التنفسية،
والعديد من أنواع هذا الجنس يفشل في النمو في الظروف الحامضية
PH 4.5والعديد منها ال يحتاج الى عوامل نمو Growth factors
موجبة لفحص الكتاليز .Catalase
ان عزالت النوع P. aeruginosaامتازت بقدرتها على النمو في
درجة الحرارة 42م oوعدم قدرتها على النمو في درجة الحرارة 4
م ،oونمت بمستعمرات متألقة في وسط ( King Aأي موجبة الختبار
وانتاج البايوسين) واعطت نتيجة موجبة لفحص انزيم الجيالتينيز
والحركة واستهالك السترات ونتيجة سالبة لفحص انزيم الليسيتين
واختبار احمر المثيل وانتاج االندول( .السالم وعبد الرحمن)
يسبب النوع P. aeruginosaالعديد من االمراض في االنسان فهي تسبب التهاب
الجروح والحروق والتهاب المجاري البولية UTIوالتهاب ذات الرئة وغالبا ما
تكون مسؤولة عن تسمم الدم Septicemiaفي مرضى الحروق وتجرثم الدم
Bacteremiaفي المصابين باإليدز AIDSوهي السبب الرئيسي لقرحة الفراش
Bedsoreكما تصيب الرئة وتؤدي الى التليف الكيسي Cystic fibrosis
وبالتالي الموت بسبب فشل الرئة باالستمرار في عملية التنفس نتيجة االفرازات
المخاطية المتمثلة بمتعدد السكريات الــــ Mathee et al. 1991: ( .Al ginate
.)Hauser et al, 1998; Prescott et al, 1996وبسبب قدرة هذه الجرثومة
على التواجد في بيئات مختلفة مثل البيئات الرطبة الدافئة والبيئات الفقيرة الحاوية
كميات ضئيلة من المواد العضوية ومياه الصرف والجلد والمحاليل غير المعقمة
وأقنعة التنفس االصطناعي هذا جعلها المسؤولة عن %15 – 5من اصابات
المستشفيات Hospital infectionsوجعلها الجرثومة المعروفة لدى وحدات
العناية المركزة (Loureiro et al, 2002; ( .Intensive Care Unit )ICU
.)Finegold and Matin, 1982
3-3عوامل الضراوة-:
يعود السبب في ضراوة النوع P. aeruginosaالى بعض العوامل
الخلوية والخارج خلوية .Cellular and extra cellular factors
1-3-3العوامل الخلوية-:
تشمل العوامل الخلوية :الشعيرات Piliواالسواط Flagellaومتعدد
السكر الدهني
Lipo Poly Saccharideاذ يمتلك هذا النوع
الشعيرات القطبية نوع Polar type IVوالتي تساعد هذا النوع على
سحب نفسه على االجسام الصلبة.
2-3-3أما العوامل الخارج خلوية-:
فتتمثل بتلك البروتينات واالنزيمات التي يفرزها النوع
( )P. aeruginosaفي الوسط الخارجي مثل Exoenzyme S,
T, Vو Exotoxin Aو الــ Phospho Lipase C
(عبارة عن انزيم محلل لدم )Haemolysinواالنزيمات المحللة
لبروتين مثل ( )al Kalineprotو
العنقودية المحللة لبروتين
Elastaseواالنزيمات
Staphylolytic proteasesمثل
Folders et al, 2000; Pritchard and ( .Las D, Las A
.)Vasil, 1986
4-3االوساط الزرعية التي تنمو عليها الزائفة الزنجارية-:
على االگار المغذي :تنمو هذه الجراثيم بسهولة (وتبدو المستعمرات رمادية ،ذات حواف غير
منتظمة "مشرشرة" ،مخاطية) فتفرز العصيات الزرقاء في هذا الوسط ومعظم االوساط الزرعية
نوعين من الصبغة (صبغتين) في االوساط هما:
البيوسيانين :وهي صبغة زرقاء.
الفلوروسيئين :وهي عبارة عن ومضات (خضراء – صفراء) لذلك تتصف مستعمراتها بلمعة
معدنية مميزة.
وتنطلق من المزروع رائحة تشبه (رائحة زهر الشمس) أو اللوز المر.
في المرق العادي :تنمو بسرعة وبكثرة مع تلون الوسط باللون االخضر المزرق.
على وسط سيمون سترات :تنمو بسرعة وتلون الوسط باللون االزرق.
في وسط الجيالتين :تميع الجيالتين بسرعة مع تلوين الوسط باللون االزرق.
في الحليب :تخثر الحليب.
وسط كليغر الحديدي :ال تخمر الكلوكوز والالكتوز = بقاء لون الوسط أحمر ال تطلق غاز =H2S
(عدم ظهور لون أسود).
ال تطلق غاز (.)Co2
اختبار االندول :سلبية االندول.
اختبار اليورياز :سلبية اليوريا.
تسبب الخارجية من العينات السريرية انحالل دموي من النمط Bعلى اكار الدم.
( \:mhtml:file://Iالزائفة الزنجارية).
-4التركيب الجيني-:
ان جينيوم الخلية البكتيرية يتكون من كروموسوم منفرد مع جزيئات
من الــ DNAوالتي تمثل البالزميدات اذ باستطاعة هذه الجزيئات اذ
تتضاعف بمعزل عن الكروموسوم وان قسما من هذه البالزميدات
تدعى R-Plasmidتحمل صفة المقاومة للمضادات الحيوية والمعادن
الثقيلة.)1975, Rownd, Hashimoto( .
4-1البالزميدات The Plasmids
فالبالزميد هو جزيئة DNAثنائية الشريط molecules double
strands DNAغالبا ما تكون حلقية الشكل ،تتراوح أحجامها من 1
– ،kbp 1000وهي تمثل كوحدة وراثية خارج كروموسومية،
تتواجد طبيعيا في البكتريا وفي بعض أنواع الخمائر مثل
Saccharomyces cervisiaeيتميز البالزميد بأنه ذاتي التضاعف
Autonomous replicationاي لنه يتضاعف بشكل مستقل عن
تضاعف الكروموسوم البكتيري( .فيصل.)2003 ،
2-4الخصائص العامة للبالزميدات
General Characteristics Of The Plasmids
.1توجد البالزميدات بأشكال مختلفة ،النوع السائد هو جزيئة DNAحلقية الشكل
واحيانا توجد بشكل خطي .Linear DNA molecule
.2البالزميدات هي جزيئات صغيرة الحجم تتراوح أحجامها من .kbp1000–1
.3على الرغم من أنه يتضاعف بشكل مستقل عن تضاعف الكروموسوم البكتيري
automous replicationاال انه يعتمد على انزيمات الخلية إلنجاح عملية
التضاعف واالستنساخ.
.4كل بالزميد يحتوي واحدة على االقل من منطقة اصل التضاعف origin of
.replication
.5اكثر البالزميدات تحتوي على جينات مسؤولة عن ابراز الطراز المظهري
الخاص بالكائن الحي ،مثل صفة المقاومة للمضادات الحياتية.
3-4أنواع البالزميدات Type Of Plasmid
تختلف اسس تصنيف البالزميدات الى انواع مختلفة باالعتماد على:
.1التوافق .Compatiblity
.2االنددددماج مدددع الكروموسدددوم البكتيدددري Integration with bacterial
.chromosome
.3اكمانيددة انتقالدده الددى الخليددة البكتيريددة االخددرى Ability to transfer to
.another bacteria
.4الوظيفة .Function
تدعى البالزميدات التي ترافق الخليدة البكتيريدة حتدى بعدد تضداعفها وانتقالهدا وانتقالهدا
الى الخاليدا البنويدة بالبالزميددات المتوافقدة Plasmid Compatibleفدي حدين تددعى
البالزميدات التي باالمكان فقدانها من الخليدة البنويدة اثنداء االنقسدام بالبالزميددات غيدر
المتوافقدددة Plasmid incompatialeكدددذلك توجدددد البالزميددددات بشدددكل حرفدددي
السدددايتوبالزم غيدددر منددددم مدددع الكروموسدددوم تددددعى بالبالزميددددات غيدددر المندمجدددة
Plasmid nonintergratedأو أنه يكون متحدد مدع الكروموسدوم البكتيدري ويددعى
فدددي هدددذه الحالدددة .Episomeوتددددعى البالزميددددات المنتقلدددة الدددى الخليدددة المسدددتلمة
بالبالزميدددات االقترانيددة Conjugation Plasmidوتكددون هددذه البالزميدددات حاويددة
على Tra genesالمسؤولة عن عملية انتقال المادة الوراثية البالزميدية.
ويمكن ايضا تصنيف البالزميدات باالعتماد على الوظيفة الى:
.1عامل الخصوبة :fertility factor or F Plasmid
وهددو بالزميددد ينضددم عمليددة النقددل الجنسددي (االقتددران البكتيددري) للمددادة
الوراثيددة بددين الخاليددا البكتيريددة .يحتددوي F plasmidعلددى مجموعددة مددن
الجينات مسؤولة عن عملية التضاعف الدذاتي ،وعدن عمليدة تكدوين االهدداب
الجنسية .Sex pili
.2بالزميد مقاومة المضادات الحياتية ):Resitant plasmid (R plasmid
يحتوي هذا النوع من البالزميدات على مجموعة من الجيندات المسدؤولة
عن مقاومة البكتريا للمضادات الحياتية أو السموم البكتيرية.
:Col – plasmid .3
هذه البالزميدات تحتوي على جينات تشفر للسموم البكتيرية والتي
تدعى بالبكتريوسين bacteriocinالتي تعمل على قتل السالالت المختلفة
لنفس الجنس البكتيري .تدعى السموم المفرزة من البكتريــــا E. Coliبالــ
Colicinومن هنا جــــاءت التسميــــة.
.4انزيمات التحلل او التفسخ :Degradative Plasmid
تحتوي هذه البالزميدات على جينات تجهز البكتريا مثل بكتريا
pseudomonasباالنزيمات المتخصصة التي يمكن للبكتريا من هضم بعض
المشتقات النفطية والمركبات الهيدروكاربون االروماتيةXyL – plasmid .الذي
يساهم في تحلل الزايلين Xyleneو .Toleune
.5بالزميدات الضراوه :Virulence plasmid
بعض اجناس البكتريا مثل Shigellaتمتلك عوامل ضراوة Invasinو
Interotoxinمحمولة على البالزميد haemolysin ،لبكتريا .E. coli
.6بالزميدددددات المقاومددددة للعناصددددر ال قيلددددة
:resistant Plasmide
Heavy metal
هي البالزميدات تكسب البكتريا صفة المقاومة لبعض العناصر الثقيلة مثل الزئبق
والنيكل والرصاص مثال على بكتريا .E. coliو P. aeruainosaو P.
.florescens
.7النواقل :Vectors
تدعى البالزميدات المستخدمة في الهندسة الوراثية بالنواقل وتستخدم في عملية
نقل الجينات من احد الكائنات الى الكائن االخر وتكون على االغلب حاوية على
معلومات وراثية genetic markerمثل المقاومة للمضادات الحياتية التي يمكن
انتقائها مختبريا.
-5المقاومة للمضادات الحيوية
وفي السنوات الالحقة ازداد اهتمام البحوث بالمواد الكيميائية المنتجة من قبل
االحياء المجهرية والتي يمكن ان يكون لها تأثير على غيرها من االحياء
المجهرية ،أطلق على هذه المواد تسمية مضادات حيوية Antibioticsكان
حصيلة
هذه
البحوث
اكتشاف
الستريتومايسين
والتتراسايكلين
والكلورامفينكول وغيرها من المواد العوامل المضادة ( Jawetz etal,
)1972ان أحد المشاكل الرئيسية المترافقة مع االستعمال الغزير للمضادات
الحيوية هو نشوء سالالت بكتيرية مقاومة لهذه المضادات وهذا هو أحد
االمثلة على الفاعليات غير المنتهية في الطبيعة والتي فيها تطور االحياء
قدرتها على تحمل ظروف بيئية جديدة (.)perlczar and chan, 1981
وتقاوم االحياء المجهريدة المضدادات الحيويدة بميكانيكيدات مختلفدة مثدل
افراز االنزيمات التي تعمل على تحطيم المضاد الحيدوي مثدل انزيمدات
الــددـ penicillinasesأو تقليددل نفاذيددة الغشدداء البالزمددي علددى مددرور
المضاد الحيوي كما قد تعمل االحياء المجهرية على الزيادة في االنتداج
بعددض المددواد االيضددية والتددي تشددبه المضدداد وبالتددالي تدددخل محلدده فددي
انتاج بعض المركبات المهمة حيويا مثدل المقاومدة لمركبدات السدلفا ،قدد
تعمل االحياء المجهرية على زيادة انتاج اندزيم معدين الدذي يعمدل عليده
المضاد أو قد تستخدم مسار حيوي بدديل عدن المسدار االول الدذي يثدبط
من قبل المضاد وفي بعض االحيان قد تغير االحيداء المجهريدة تركيدب
االنددزيم وبهددذا يصددبا مقدداوم تجدداه المضدداد الددذي كددان يددؤثر عليدده أو قددد
يحدث تغيير بسيط في الرايبوسوم بحيث يصعب على المضاد االرتباط
كما في المقاومة للستربتومايسين ()Lee, 1999
أن جميع ميكانيكيدات مقاومدة المضدادات الحيويدة نتجدت عدن الطفدرات
Recombinationواكتسددددددداب
،Mutationاعدددددددادة التكدددددددوين
البالزميدات .)Stanier etal, 1980( Acquisition of plasmids
االهداف والتوصيات:
.1
.2
.3
.4
.5
التعدددددرف علدددددى االندددددواع البكتيريدددددة الممرضدددددة الموجدددددودة مدددددع بكتريدددددا
Pseadomonasومعرفة التركيب الوراثي لها.
يجبددب تددوخي الحددذر والحيطددة مددن حالددة االصددابة لمددرض التهدداب المجدداري
البولية والتعرض لحوادث الحدروق والجدروح منعدا لحصدول تلدوث بكتيدري
أو االصددابة بتسددمم الدددم البكتيددري لددذا يجددب المواظبددة علددى التعقدديم المسددتمر
واخذ العالج المطلوب بصورة صحيحة.
عدددم اسددتخدام المضددادات الحيويددة المتكددرر والعشددوائي اي حالددة التهدداب
وبدون استشارة الطبيب.
دراسة موسعة أكثر للمحتوى الوراثي لبكتريا الـــ P. areugensaباسدتخدام
التقنيددات للتعددرف علددى مواقددع الجينددات المسددؤولة عددن المقاومددة لمضددادات
حيوية متوفرة أخرى.
اسددتخدام التعقدديم والتطهيددر المسددتمر فددي المستشددفيات لمكافحددة البكتريددا التددي
تسددبب عدددوى المستشددفيات حفاظددا علددى صددحة المرضددى الراقدددين .وك دذلك
اللجوء فورا لمعالجة االخماج الجاهزية بالزائفة الزنجاريدة باسدتخدام مضداد
تكددون هددذه الجددراثيم متحسسددة تجاهدده ،علددى الددرغم مددن أن االسددتجابة تكددون
محدددددودة ان الزوائددددف تتميددددز بمقاومتهددددا الطبيعيددددة والشددددديدة للعديددددد مددددن
المضادات.