Transcript 芳氧丙醇胺类药物的分析
芳氧丙醇胺类药物的分析 04药剂 朱俊 3041909088 芳氧丙醇胺类药物是指分子结构中具 有芳氧丙醇胺基本骨架的一类药物， 主要是β受体阻断剂，如： 普萘洛 尔、美托洛尔、阿替洛尔、氧烯洛尔、 卡替洛尔等。 药物的结构通式 R OCH2CHCH2NH R' OH 芳氧丙醇胺类β受体阻断剂 名称 R’ R 普萘洛尔 CH£¨CH3£©2 噻吗洛尔 O N N CH£¨CH3£©2 N S HO C£¨CH3£©2 纳多洛尔 HO 美托洛尔 CH£¨CH3£©2 CH3OCH2CH2 阿替洛尔 CH£¨CH3£©2 CH3 比索洛尔 HC OCH2CH2OCH2 CH£¨CH3£©2 CH3 COCH3 醋丁洛尔 艾司洛尔 倍他洛尔 C4H9CONH CH3OCOCH2CH2 CH2OCH2CH2 CH£¨CH3£©2 CH£¨CH3£©2 CH£¨CH3£©2 鉴别试验 （一）化学鉴别反应 盐酸卡替洛尔的鉴别反应：去本品约0.1mg，加 水5ml使溶解，加硫氰酸铬铵试液5滴，即生成 淡红色沉淀。 氧烯洛尔的鉴别反应：取本品约0.1mg，加乙醇 2ml溶解后，滴加0.1mol/l高锰酸钾溶液1ml， 振摇数分钟，高锰酸钾颜色消退，并产生棕色 沉淀。 (二）紫外吸收峰特征 盐酸普萘洛尔甲醇溶液（20μg/ml），在290nm 与319nm的波长处有最大吸收。 阿替洛尔乙醇溶液（10 μg/ml ），在227nm， 276nm和283nm的波长处有最大吸收。 盐酸卡替洛尔水溶液（8 μg/ml ），在215nm和 252nm的波长处有最大吸收。 氧烯洛尔乙醇溶液（40 μg/ml ），在275nm的波 长处有最大吸收。 杂质检查 （一）有关物质检查 盐酸卡替洛尔 本品中相关物质检查采用薄层色谱法的高 低浓度对比法进行。 （二）盐酸普萘洛尔 游离萘酚的检查 取本品20mg，加乙醇和10%氢氧化钠 溶液各2ml，振摇使溶解，加重氮苯 磺酸试液1ml，摇匀放置3分钟；如显 色，与α-萘酚的乙醇溶液（20 μg/ml ）0.3ml同法制得的对照液相 比，不得更深（0.03%）。 含量测定 （一）非水溶液滴定法 ——盐酸卡替洛尔原料药含量测定方法 取本品约0.5g，精密称定，加冰醋酸30ml，在水浴 上加热溶解，放冷，加醋酐70ml，照电位滴定法， 用高氯酸滴定液（0.1mol/l)滴定，并将滴定的结果用 空白试验校正。每1ml高氯酸滴定液（0.1mol/l）相 当于32.88mg的盐酸卡替洛尔。 （二）剩余酸中和法 ——剩余酸中和法测定阿替洛尔的含量 取阿替洛尔约0.2g，精密称定，精密加入 0.05mol/l硫酸20ml使溶解，加甲基红-溴 甲酚绿混合指示液3滴。用0.1mol/l氢氧化 钠溶液滴定至溶液为灰紫色。并将滴定结 果用空白试验校正。每1ml的硫酸 （0.05mol/l）相当于26.63mg的阿替洛尔。 （三）紫外分光光度法 ——紫外分光光度法测定盐酸普萘洛尔的含量 取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量 （ 约相当于盐酸普萘洛20mg),置50ml 量瓶中， 加30% 乙醇溶液超声溶解，并稀释至刻度， 摇匀，滤过，精密量取续滤液3ml，置50ml 量 瓶中，用30% 乙醇溶液稀释至刻度。照紫外 分光光度法，在290nm 波长处测定吸收度。 （四）化学发光法 ——流动注射化学发光法测定盐酸普萘洛尔 在酸性介质中KMnO4氧化盐酸普萘洛尔可 产生化学发光，Fe2+的存在可增大其化学发光 强度，且化学发光强度与盐酸普萘洛尔的质量 浓度在一定范围内呈线性关系。据此采用流动 注射技术建立了一种测定盐酸普萘洛尔的化学 发光分析法。该法已用于盐酸普萘洛尔片剂中 盐酸普萘洛尔的测定。 实验步骤 准确移取一定量的盐酸普萘洛尔标准溶液或 样品溶液于50mL的容量瓶中，加入 1.0×104g/mL Fe2+溶液0.5mL，用水稀释至标线， 摇匀，作为试液；以1.0×10-4 rnol/L的KMnO4 溶液(含1.5 mol/L的多聚磷酸)为氧化剂。按图1 所示流路进行化学发光强度测定，以峰高定量。 a-1.0×10-4mol/L KMO4+1.5 mol/L H6 P4O13； b-样品+ 1.0×10-6 g/ml Fe2+；c-水；P-蠕动泵； V-进样阀；F-流通池；PMT-光电倍增管； HV-负高压；COM-计算机；W-废液 样品分析 取盐酸普萘洛尔片剂5片(标示量为10 mg/ 片)，研细，混匀，称取一定量粉末(含盐酸普 萘洛尔约10mg)于50mL烧杯中，加适量水溶 解，过滤，滤液转移至100mL容量瓶中，加水 稀释至标线，摇匀。准确移取一定量的上述 溶液于50mL容量瓶中，加入1.0×10-4 g/ml Fe2+溶液0.5 mL，用水定容。按照图1所示流 路，进行化学发光强度测定。 （五）离子选择电极法 ——美托洛尔片的离子选择电极法测定 以美托洛尔与单质碘形成的分子缔合物为 电活性物的PVC 膜美托洛尔选择电极, 用该电极对美托洛尔片剂的含量进行测 定。 1.酒石酸美托洛尔标准溶液的配制 精密称取酒石酸美托洛尔0 . 342 4 g ,置25 mL 小烧杯中,以磷酸二氢钠-磷酸氢二钠缓冲液(总 浓度为0 . 2 mol ·L - 1 ,pH6.7) 溶解,转移至50mL 量瓶中,并以上述缓冲液定容,摇匀,即得 0.01mol/L酒石酸美托洛尔标准溶液。其他浓度 的酒石酸美托洛尔标准溶液均由此溶液以上述 缓冲液逐级稀释而成。 2.电活性物的制备 将0.2 mol/L碘的碘化钾溶液50 mL 边搅拌边 滴加到50 mL 酒石酸美托洛尔标准溶液中, 即有沉淀生成,将沉淀用3号砂芯漏斗抽滤, 以纯化水洗涤6～8 次,用干燥剂干燥至恒重, 即得。 3.电极的制备 称取上述电活性物4mg ,加入0.6mL 邻苯二甲酸二 丁酯,200 mg PVC 粉和5mL 四氢呋喃,搅拌均匀后 倾于水平直径为5cm不锈钢圆环内,使其自然挥发 成透明弹性敏感膜,用5% PVC四氢呋喃溶液粘接 于塑料电极杆上,以Ag/AgCl作内参比电极, 0.1mmol/L酒石酸美托洛尔溶液和0. 2mol/L磷酸二 氢钠-磷酸氢二钠缓冲液作内参比溶液。电极使用 前在0.1mmol/L酒石酸美托洛尔溶液中活化20min, 然后用纯化水洗至电势达到稳定之后即可使用。 4.电极性能的测试 将美托洛尔电极与甘汞电极组成如下电池以 测试电极的各项性能: PVC 膜美托洛尔选择电 极| 待测溶液‖SCE。以Ag/AgCl作内参比电极, 0.1mmol/L酒石酸美托洛尔溶液和0.2mol/L磷酸 二氢钠-磷酸氢二钠缓冲液作内参比溶液的美托 洛尔电极,在0.1mmol/L酒石酸美托洛尔溶液中 活化20min ,然后用纯化水洗至电势达到稳定之 后即可使用,测定方法包括标准曲线法和标准加 入法。 5.对酒石酸美托洛尔片的分析 取酒石酸美托洛尔片20 片,精密称定,研细,精 密称取适量(约相当于酒石酸美托洛尔30 mg) ,以上述缓冲液溶解并定容至50 mL 备用。 采用校准曲线法和药典法分别对标示量为每 片25 mg 的酒石酸美托洛尔片的含量进行测 定。 （六）气相色谱法 ——气相色谱法测定人血浆中阿替洛尔的含量 色谱条件 色谱柱HP-1,12m×0.2mm(I.D.) ×0.33μm； 进样口温度200℃； 检测器温度300 ℃； 柱温从140 ℃以10 ℃/min上升到190 ℃ 实验步骤 取血浆1ml，加入内标美多心安400ng，0.5mol/l NaOH 0.1ml和正丁醇-环己烷（7：3）5ml混合溶剂， 振摇3min，离心取出有机相。再提取一次，合并有 机相。加入0.2mol/lHCL 4ml，振摇3min，提取两次， 离心取出水相。加入5mol/lNaOH 0.2ml和无水乙醚 6ml提取两次。取出有机相，在60 ℃下用温和的N2 吹干，残渣用无水乙醚0.1ml溶解，加入三氟乙酸酐 0.1ml，室温放置15min，用N2吹干，加入乙酸乙酯 25μl溶解，取2 μl进样，进行气相色谱分析。 标准曲线的建立 取空白血浆1ml各7份，分别置于10ml试管 中，加入阿替洛尔标准溶液使成0，5，10， 20，50，100，200ng/ml，并分别加入400ng 内标美多心安，按“血样处理”项下操作， 以浓度C对样品于内标峰面积比Ai/As进行线 性回归。 样品测定 5例健康受试者，顿服阿替洛尔片25mg×2， 口服后分别在0，0.5，1，1.5，2，3，4，5， 6，8，12，24，30h取静脉血5ml，离心，取 血浆1ml，按“血浆处理”项下操作，测定阿 替洛尔的血药浓度。 其它方法 1.比色法 2.二阶导数分光光度法 3.荧光分析法 4.量热滴定法 5.高效液相色谱法 参考文献 [1]刘文侠等 流动注射化学发光法测定盐酸普萘洛尔 分析试验室 2004年3月第23卷第3期:41-43 [2]国家药典委员会编．中国药典(二部)．北京：化学工 业出版社，2005． [3]彭建和等 气相色谱法测定人血浆中阿替洛尔含量 中国药科大学学报 1992，26（6）：344-346 [4]张君仁等 盐酸普萘洛尔片的二阶导数分光光度测定 中国医药工业杂志 1996，27（11）：516-518 [5]申兰萍，邢上海 盐酸普萘洛尔片含量测定的改进 药物检测 2003年第12卷第5 期 ：3-4 [6]李东辉 美托洛尔片的离子选择电极法测定 中国医院药学杂志 2005 年第25 卷第9 期：822-824