Transcript Specifické testy - Ústav imunologie

Imunodeficience
A.Šedivá
Ústav imunologie UK2.LF a FN v Motole, Praha, Česká republika
Duben 22.-29.2014 PID awereness week
Den imunologie 29.4.2014
www.inside-immunity.org
https://www.youtube.com/watch?v=MI-BLaj5nFk
Imunitní systém
TCD4
B
TCD8
plasm.b.
obecné obranné
mechanismy
vrozená imunita
získaná imunita
Imunodeficience
imunodeficience
-
+
alergie
nádory
-
+
autoimunita
primární
vrozené poruchy, způsobené mutacemi
genů pro jednotlivé složky imunitního
systému
incidence 1:500-700 (deficit IgA)
1:100 000 (SCID)
sekundární
poruchy imunity nasedající na
základní onemocnění
Primární imunodeficience
TCD4
B
TCD8
plasm.b.
Klasické imunodeficience - monogenní, s mendelovskou dědičností, zasahující
hematopoetické buňky, s náchylností k mnohočetným, opakovaným rekurentním,
někdy až fatálním infekcím
Nově zařazené imunodeficence – běžná i sporadická onemocnění, s dominantní
i polygenní dědičností, neomezeny jen na hematopoetické buňky, vnímavost
omezenému spektru infekcí, které nemusí být opakované ani závažné
Primární imunodeficience
obecná obrana
vrozená imunita
získaná imunita
TCD4
B
TCD8
plasm.b.
nepohyblivost řasinek
deficity fagocytózy
deficity protilátkové
deficity baktericidních
složek
deficity komplementu
deficity buněčné
a kombinované
ESID
registry
2013
96 center
18 720 pacientů
Documented prevalence of PID in Europe
Living patients (n) per 100,000 inhibitants
Vývoj imunity dítěte
vývoj imunokompetentních buněk je spojen s hematopoezou, jež začíná
v 1.měsíci embryogenese
protilátky plodu v okamžiku narození jsou přeneseny od matky
Klinické příznaky primárních imunodeficencí
protilátkové
častost
výskytu
začátek
příznaků
příznaky
cca 70%
po 6.měsíci
až do dospěl.
IHCD
IDCD
otitidy
artritidy
původci
opouzdřené
nemocí
mikroby
echoviry
reakce na enterovirové
očkování vakcíny
buněčné a
kombinované
fagocytární
komplementové
20%
10%
po narození
po narození
až do cca 2 let
v dětství i dosp.
neprospívání
omfalitis
IDCD
adenitidy
průjmy
pyodermie
dermatitidy
otitidy
viry,pneumocysty stafylokoky
plísně
plísně
mykobakterie
enterobakterie
všechny živé
BCG
vakcíny
vakcína
1%
různý
SLE
DLE
pyogenní inf.
otoky
Neisserie
nekonstantní
Protilátkové deficience
Chybění B lymfocytů, snížení všech protilátek:
X-linked agammaglobulinemia, μ-Heavy chain deficiency, Igα
deficiency, BLNK deficiency, thymoma with immunodeficiency
B lymfocyty snížené, ale přítomné, snížení u 2 a více izotypů protilátek:
common variable immunodeficiency (CVID), ICOS deficiency, CD19
deficiency, TACI (TNFRSF13B) deficiency, BAFF receptor deficiency
Normální počty B lymfocytů, snížení IgA, IgA, normální či zvýšené IgM:
CD40L def.,AID deficiency, UNG deficiency, CD40 def.,NEMO
Normální počty B lymfocytů s deficiencí izotypů nebo lehkých řetězců:
heavy chain deletions, kappa chain deficiency, isolated IgG subclass
deficiency, IgA with IgG subsclass deficiency,
selective immunoglobulin A deficiency
Deficit specifických protilátek s normálními počty B lymfocytů:
transient hypogammaglobulinemia of infancy
Protilátkové deficience
na X chromozom vázaná agamaglobulinémie
1952 Dr.Bruton
1993 gen, btk, Xq21.3-22
pre B lymfocyt
B lymfocyt
Protilátkové deficience
hyperIgM syndrom
forma vázaná na X chromozom
gen, Xq26
CD40L
T lymfocyty
autozomálně recesivní
susp. gen 12p13
AID (activation induced cytidinedeaminase)
defekt v somatických hypermutacích
UNG deficiency, CD40 def.,NEMO
T lymfocyt
CD40L
CD40
B lymfocyt
Protilátkové deficience
CVID
Nejčastější forma humorální
deficience
Genová podstata známa
přibližně u 10%
Kooperace B a T lymfocytů
Časté autoimunitní komplikace
Primární protilátkové deficience – vývoj B lymfocytů
Molekuly, jejichž genová mutace je podkladem
imunodeficitu v B lymfocytu
BCR
HLA I.
TAP1,2
BLNK
CD40
BTK
CIITA
HLA II.
SLAM
Buněčné a kombinované deficience
T-/B+ SCID
γc deficiency, JAK3 deficiency, interleukin 7 receptor chain α
deficiency, CD45 deficiency, CD3δ/CD3ε deficiency.
T-/B- SCID
RAG 1/2 deficiency, Omenn syndrome
adenosine deaminase (ADA) and purine nucleoside phosphorylase
(PNP) deficiency
DNA ligase type IV deficiency, Artemis deficiency
CD40 ligand deficiency, CD40 deficiency
MHC class II deficiency
CD3γ deficiency, CD8 deficiency, ZAP-70 deficiency
TAP-1/2 deficiency
Reticular dysgenesis
SCID fenotyp a genotyp
TCR
CD3
g
CD4
e
z ZAP-70
p56lck
CD154
CD40L
def. γ řetězce
JAK -3 def.
g
JAK-3
NFAT RAG1,2
SLAM
T-B+NK-SCID
cytokine receptor
T-B+NK+
CD45 def.
IL-7Rα def.
CD3δ def.
WASP
IL7Ra
T-B- SCID
RAG 1,2 def.
Artemis def.
ADA def.
Omennův syndrom
SCID
Molekuly, jejichž genová mutace je podkladem
buněčného imunodeficitu
Molekuly, jejichž genová mutace je podkladem
imunodeficitu v T lymfocytu
TCR
CD3
CD4
e
z
cytokine receptor
ZAP-70
g
JAK-3
CD154
CD40L
SLAM
WASP
NFAT
Syndrom diGeorge
1967 Dr.Angelo diGeorge publikoval první
popisy dětí, které sdílely vrozené srdeční
malformace, hypoparathyreózu, aplasii
thymu a další fenotypické znaky.
Syndrom diGeorge je vzácné onemocnění
s výskytem 1 na 4,000 narození.
Fagocytární deficience
Neutropenie
Severe congenital neutropenia: ELA2 deficiency (with myelodysplasia),
G-CSFR deficiency Kostmann syndrome, Cyclic neutropenia, X-linked
neutropenia/myelodysplasia, Shwachman-Diamond syndrome
LAD
Leukocyte adhesion deficiency types 1, 2 and 3
Poruchy funkce fagocytů
Chronic granulomatous disease: X-linked, AR
Neutrophil glucose-6-phosphate dehydrogenase deficiency
Specific granule deficiency
Vrozená vnímavost mykobakteriálním infekcím
IL-12 and IL-23 β1 chain deficiency,IL-12p40 deficiency
Interferon γ receptor deficiency, STAT1 deficiency
Fagocytární imunodeficience
Chronická granulomatóza
neschopnost fagocytů generovat reaktivní
kyslíkové radikály - genový defekt jedné či více
podjednotek NADPH oxidázy
na X chromozom vázaná forma
defekt v genu pro gp91-phox membránově vázaná část molekuly
cytochromu b558
autozomálně recesivní forma
defekt v genech membránových či
cytoplasmatických podjednotek
p47-phox, p67-phox, p22-phox
Fagocytární imunodeficience
LAD syndrom
deficit adhezivních molekul
LAD syndrom I. - deficit leukocytárních integrinů
CD 18
LAD syndrom II. - deficit selektinů
LAD syndrom III.- deficit KINDLIN 3, nutný k
aktivaci integrinů na hematopoetických buňkách
Deficity komplementu
Deficit časných složek koplementové kaskády
Deficit pozdních složek komplemetové kaskády
Deficity v alternativní dráze komplementu
Deficity inhibičních složek – angioneurotický edém
Nové imunodeficience
genetická vnímavost infekcím
Na rozdíl od klasických primárních
imunodeficiencí tyto „nové
imunodeficience“ jsou
představovány specifickými
poruchami v rozvoji imunitní
odpovědi a vedou k vnímavosti
pouze k určitým patogenům.
J.L.Casanova
Nové jednotky v oblasti interakce imunitního systému s infekcí
vrozená imunita
Rozpoznání mikroorganismů v buňce
probíhá na několika úrovních:
TLR systém na membránách
TLR na intracelulárních membránách
Intracelulární sensory
-NLRs, Nod1, Nod2, Ipaf, NALPs
-Sensory virových infekcí RIG-I
a Mda-5
-AIM cytoplasmatický sensor
DNA
Nové imunodeficience
genetická vnímavost infekcím
IRAK 4 deficience
vnímavost Pneumokokovým
infekcím
NEMO a IkB deficience
(dowmstream), signalizace i přes
TNF
vnímavost širšímu spektru
infekcí, i viry a plísně
Anhydrotic epidermal dysplasia
TLR3, UNC93b
Herpetická encefalitida
Porucha produkce interferonů
Primární imunodeficience - vrozená imunita
Imunodeficience asociované s mykobateriálními infekcemi a infekcí Salmonelou
Mendelovská dědičnost vnímavosti
k mykobakteriálním infekcím:
„IL-12–IL-23–IFN axis“
Geny
proteiny
IFNGR1
IFNGR2
IL12RB1
IL12B
STAT1
IKBKG
IFN R1
IFN R2
IL-12 receptor b1-chain (IL-12Rb1)
p40 podjednotka IL-12 a IL-23
IKK (inhibitor of nuclear factor-kB
kinase = NEMO)
Primární imunodeficience - vrozená imunita
„Autoinflammatory syndromes“
Kryopyrinopatie – cryopyrin, NALP3
m.Crohn, Blau syndrom – NOD2
NLRs join TLRs as innate sensors of pathogens
Fabio Martinon and Jürg Tschopp
Department of Biochemistry, University of Lausanne
online 20 June 2005.
Pathogen-recognition receptors (PRRs) are key components
of immune systems and are involved in innate effector
mechanisms and activation of adaptive immunity. Since their
discovery in vertebrates, Toll-like receptors (TLRs) have
become the focus of extensive research that has revealed
their significance in the regulation of many facets of our
immune system. What makes TLRs so central and
fascinating is their ability to recognize microbes and directly
initiate specific signal transduction cascades that alert the
host defences. In this review, we discuss the function and
biology of a new family of PRRs, the NACHT-LRRs (NLRs),
which include both nucleotide-binding oligomerization
domains (NODs) and NALPs [NACHT-, LRR- and pyrin
domain (PYD)-containing proteins], and underline some
intriguing similarities between NLRs and TLRs that
emphasize the role of NLRs as a complementary system for
host–microbe interactions.
Inflamasom,IL-1
Monogenní autoinflamatorní onemocnění
onemocnění
zkratka
dědičnost
chromozom gen
familiární
středozemní
horečka
FMF
AR
16p13
MEFV
porucha TNFRSF1
TRAPS
AD
12p13
TNFRSF1
hyperIgD syndrom
HIDS
AR
12q24
MVK
Muckle-Wells synd. MWS
AD
1q44
CIAS1
cryopyrin
NALP3
AD
15q24
PSTPIP1
AD
16q12
NOD2
CARD15
familiární
chlad.urtika
FCU
NOMID/CINCA
NOMID/
CINCA
pyog.artritis,pyod.
gangr.,akné
PAPA
Blau syndrom
Vyšetření u primárních imunodefitů
• anamnéza
• klinické vyšetření
• laboratorní vyšetření
–
–
–
–
–
–
–
–
KO
imunoglobuliny
specifické protilátky
počet, rozložení a funkce lymfocytů
komplement
počet a funkce fagocytárních buněk
genetické vyšetření
další
Vyšetření u primárních imunodefitů
Protilátkové deficity
• Základní testy
– Imunoglobuliny, vakcinační protilátky
• Specifické testy
– Vyšetření fenotypu B lymfocytů, podtřídy IgG,
vakcinační protilátky proti novým očkováním
• Výzkumné testy
– Fenotypizace B panelu, biopsie uzlin či jiné tkáně,
odpověď vůči neoantigenům, in vitro aktivace a
buněk a sekrece protilátek, genetická analýza mutací
Vyšetření u primárních imunodefitů
Buněčné deficity – T lymfocyty
• Základní testy
– Počet lymfocytů, rtg plic (thymus)
• Specifické testy
– Vyšetření fenotypu T lymfocytů, proliferační testy
• Výzkumné testy
– Fenotypizace T panelu, cytotoxické testy, cytokiny a
cytokinové receptory, enzymové testy (ADA,PNP),
zobrazení thymu a funkce, TREC, testy
apoptózy,biopsie uzlin či jiné tkáně, genetická
analýza mutací
Vyšetření u primárních imunodefitů
Fagocytární deficience
• Základní testy
– KO, NBT test, IgE
• Specifické testy
– Chemoluminiscence, funkce fagocytů,
baktericidní testy, chemotaxe
• Výzkumné testy
– Vyšetření adhezivních molekul, vyšetření
enzymů (MPO, G6PD, NADPH oxidáza),
genetická analýza mutací
Vyšetření u primárních imunodefitů
Deficity komplementu
• Základní testy
– CH50, C3, C4
• Specifické testy
– Aktivační testy
• Výzkumné testy
– Aktivace alternativní dráhy, funkční testy,
genetická analýza mutací
Terapie primárních imunodeficiencí
Substituce
Enzymy (PEG-ADA), cytokiny (IFNg),
imunoglobuliny (IVIG, SCIG,IMIG)
Antiotická a antimykotická terapie
Transplantace
(světová priorita, 1968)
kmenové buňky krvetvorby, kostní dřeň,
pupečníková krev
Thymus a thymová tkáň
Genová terapie
(světová priorita,2000)
„Bubble boy“,
1969
USA
„Bezmikrobní dítě“,
1977
Československo
Terapie primárních imunodeficiencí
Prevence
Genetické poradenství
Novorozenec s PID
Pupečníková krev
Okamžité imunol.vyšetření
Rtg plic
Izolace
CMV neg., ozářené krevní produkty
prevence Pneumocytové infekce
Strava
Očkování
Terapie primárních imunodeficiencí
Antibiotika
Profylaxe Pneumomocystis carinii
Trimetoprim-Cotrimoxazol (2x denně, 3x týdně či jiné
režimy)
Kontinuální antibiotická terapie
TMP/SMX denně v poloviční terapeutické dávce
Azitromycin plná dávka 3 dny + 11 denní pauza
Intraconazol u CGD
Profyaktická antibiotika
Stomatologické a chirurgické výkony
Amoxycilin-gentamycin iv.před a 8 a 18 hodin po výkonu
nebo po.
různé režimy
Terapie primárních imunodeficiencí
IVIG
substituční léčba imunoglobuliny
intravenosní imunoglobuliny
imunogloubliny
indikace
Brutonova agamaglobulinémie
CVID
hyperIgM syndrom
Wiskott-Aldrichův syndrom
fagocytární deficience
další onemocnění
intramuskulární imunoglobuliny
hypo a agamaglobulinémie
subkutánní
Terapie primárních imunodeficiencí
Transplantace
Orgánové transplantace
Transplantace thymu a thymové tkáně
Transplantace kostní dřeně
HLA identický dárce
Haploidentický dárce, T deplece
Haploidentická Tx in utero
MUD
Pupečníková krev
Terapie primárních imunodeficiencí
Genová terapie
deficit ADA
X vázaný SCID
(LAD, chronická granulomatosa..)
Rozdělení sekundárních imunodeficiencí
poruchy centrálních lymfatických orgánů
kostní dřeň, thymus, slezina
poruchy počtu a funkce periferních leukocytů
sekundární protilátkové deficity
metabolické choroby, malnutrice, hypovitaminózy
ID v souvislosti s léčbou včetně chir. postupů a intenzivní péče
ID navozené infekčními činiteli
ID a nádorová onemocnění