尿液及体液一般检查 - 上海交通大学医学院医学检验系

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尿液及体液一般检查
上海交通大学医学院
胡晓波 副教授
(一)尿液标本的种类kinds of urine specimens




1.首次晨尿morning urine
2.随机尿random urine
3.餐后尿postprandial urine
4.定时尿timed urine
尿液标本的保存与防腐
storage and antisepsis of urine specimens


1.冷藏refrigeration
2. 防腐antisepsis
尿液的理学检查
urine physical examination:


尿量volume
颜色colourh混浊度
turbidity

气味odour
尿量urine volume



多尿polyuria
少尿oliguria
无尿anuria
尿色urine color





正常尿液的颜色
红色
浓茶色、振荡后有黄色泡末
棕黑色
乳白色
气味odor






正常尿液
新鲜排出的尿液有氨臭味
烂苹果味
大蒜臭味
腐臭味
老鼠尿样臭味
尿液化学检查
urine chemical examination
干化学尿液分析仪的发展史




1956年,美国Ames和Lilly两家公司几乎同时
创建了测定尿糖的Clinistix和TesTape试剂带。
1957年,美国Ames推出测定尿液蛋白
Albustix试剂带。
1958年,推出尿糖和尿蛋白的二联Uristix试剂
带,次年有推出尿糖、尿蛋白、和尿pH的三联
Combistix试剂带。Multistix试剂带。
20世纪70年代,半自动尿液分析仪
按测试项目分类
尿蛋白、尿糖、尿pH、
尿酮体、尿胆红素、尿胆原、尿潜血和
尿亚硝酸盐
8项尿液分析仪
9项尿液分析仪
尿白细胞
10项尿液分析仪
尿比重
11项尿液分析仪
颜色或维生素C
12项尿液分析仪
颜色和浊度
尿液分析仪原理
尿液pH
试带法:酸碱指示剂法,测试模块中含有
甲基红(pH4.6~6.2)和溴麝香草酚蓝
(pH6.0~7.6),两种酸碱指示剂适量
配合可反映尿pH5.0~9.0的变异范围。
肾功能
食物
生理活动
药物
疾病
常见影响尿液pH的因素
影响因素
尿液酸性
尿液碱性
肾功能
肾小球滤过增加,肾小球滤过功能正常,肾小
肾小管保碱能力 管保碱能力丧失
正常
食物
肉类及混合性食 蔬菜、水果
物
生理活动
剧烈运动、大汗、饭后、消化高潮
应激、饥饿
药物
氯化钙、氯化铵、小苏打、碳酸钾、碳酸镁、
稀盐酸等
枸橼酸钠、酵母制剂等
疾病
酸中毒、肾炎、 碱中毒、膀胱炎、肾盂肾炎、
糖尿病、饥饿状 胃扩张、草酸盐磷酸盐或碳
态、尿路尿酸盐 酸盐结石
或胱氨酸结石
其他
尿内含酸性磷酸 尿内混入多量血、脓,细菌
盐
污染,分解尿素等
尿比重(比密)
称重法、浮标法、折射计法
试带法
多聚电解质(甲乙烯稀酸酰马来酐)
含有随尿标本中离子浓度而解离的酸性基
团,离子浓度越多,酸性基团(氢离子浓
度)解离越多,而使模块中的pH改变,这
种改变可由模块中的酸碱指示剂变化显现
出来
pH6.2~7.0
比密的变化范围在1.000~1.030
蛋白质浓度增加使比密结果增加
尿胆红素
试带法
在强酸的介质中直接胆红素与二
氯苯胺重氮盐起偶联反应生成红色的
复和物。
尿胆原
试带法:
在强酸性条件下,尿胆原与对-二甲氨
基苯甲醛发生醛化反应,生成樱红色缩
合物,模块发生从黄色到红色的颜色变
化。
在强酸条件下尿胆原和对-甲氧基重氮
四氟化硼发生重氮盐偶联反应,生成胭
脂红色化合物。




尿液pH
胆红素的形成量
肝细胞功能
胆道梗阻
尿
正
常
肝前性黄疸
肝原性黄疸
肝后性黄疸
胆红素
阴性
阴性
阳性
阳性
液
尿胆原
少量
显著增加
轻度增加
减少或无
葡萄糖glucose
[reference interval]
定性:阴性
定量:<2.78mmol/L
尿中是否出现葡萄糖取决于三个因素:
 动脉血液中葡萄糖浓度
 每分钟流经肾小球的血浆量
 近端肾小管上皮细胞重吸收葡萄糖的
能力
摄食性糖尿、神经、
精神性糖尿
生理性糖尿
妊娠期糖尿
葡萄糖尿
真性糖尿病
病理性糖尿
糖尿
肾性糖尿
胰岛外性糖尿
半乳糖尿
非葡萄糖尿
果糖尿
戊糖尿
其他糖尿
胰岛外性高
血糖性糖尿
尿糖定性试验
1.班氏法(Benedict法)含有醛基的葡
萄糖,在高热及碱性溶液中能将蓝色的
硫酸铜还原为黄色的氢氧化亚铜及红色
氧化亚铜,出现黄色至砖红色沉淀物。
加班氏试剂1ml
加热
取尿液0.1ml加入上述试剂中
再加热
冷却
判断结果
尿糖定性结果判断:
实验结果
(g/L)
仍呈蓝色
蓝绿色,无沉淀
绿色,有少量
绿黄色沉淀
黄绿色,有较多
沉淀
土黄色,有大量
沉淀
砖红色沉淀,上
清液无色
结果判断
相当含量
±
+
<0.1
0.1~0.5
++
0.5~1.0
+++
1.0~2.0
++++
>2.0
2.试带法:
试带模块中主要含有葡萄糖氧化酶、过氧化
物酶和色源及其他物质。
葡萄糖氧化酶( glucose
oxidase ,GOD)作用于尿液中葡萄糖,使
其形成葡萄糖醛酸和过氧化氢(H2O2),后
者在过氧化氢酶(POD)的催化释放出[O],
后者使色源呈现不同的颜色变化。
蛋白质protein
[reference
interval]
定性:阴性
定量:<0.1g/L
尿蛋白
血浆蛋白
组织蛋白
肾小球性 肾小管性 混合性 溢出性 组织性
肾小管间
质病变、
中毒性肾
病
肾病
综合征、
肾病性
蛋白尿 原发、
继发肾
小球疾
病
泌尿系统、泌
尿外系统
浆细胞病、 肾脏疾病、
血管内溶
炎症、中
血、肌肉
毒、泌尿
损伤
道结石
泌尿道、
生殖道炎症、
出血、排泌
物污染
尿蛋白定性
1.磺柳酸法:在酸性条件下,磺基水
杨酸的阴离子和蛋白氨基酸阳离子结
合,形成不溶性蛋白盐沉淀。
敏感度 0.05~0.1g/L
NCCLS将其定为干化学检查蛋
白的参考方法,并推荐为检查尿蛋
白的确证试验。
加尿液1ml
加磺硫酸2滴
判断结果
实验结果
(g/L)
清晰透明无
改变
黑色背景下,
极轻度混浊
明显白色混浊,
但无颗粒
明显混浊,
出现颗粒
大量絮状沉淀
但无凝块
严重混浊,
有大凝块
结果判断
相当含量
-
0
±
<0.1
+
0.1~0.5
++
0.5~2.0
+++
2.0~5.0
++++
>5.0
2.加热醋酸法
加热煮沸使蛋白变性、凝固,然后
加酸使尿液pH接近尿蛋白质等电点,在
含有适量无机盐状况下,蛋白质更易于
变性沉淀。
3.试带法
pH指示剂的蛋白误差原理
蛋白质具有两性离子的电荷性,在溶
液中,能被指示剂相反电荷的静电吸
引,而生成蛋白指示剂复合物,引起
指示剂的进一步电离,从而使其所显
示的pH颜色发生转变,这种色泽变化
的差别,与蛋白质的含量成正比。
试带法影响因素:

尿液pH值

尿液所含蛋白成分

尿液中的干扰物

尿液存放的时间及污染
隐血
试带法:尿液中的血红蛋白或其破坏释
放的游离血红蛋白均含有亚铁血红素,
后者具有过氧化物酶样活性,可使过氧
化物分解释放出新生态氧[O],[O]能使
无色的邻甲联苯胺变成蓝色。
尿酮体
1.湿化学法:
2.试带法:
亚硝基铁氰化钠,在碱性条件下
可与尿液中的乙酰乙酸、丙酮起反应,
呈现紫色。
尿液必须新鲜,及时送检
不同病程酮体成分的变化会给检测结
果带来差异。
尿亚硝酸盐
试带法:当尿液中有大肠埃希氏菌增
加时,可将硝酸盐还原为亚硝酸盐,其
可将模中的氨基磺胺重氮化而成重氮盐,
后者与1,2,3,4-四氢并喹啉-3偶
联,使模块产生红色,借以诊断患者是
否被肠杆菌科细胞感染。
尿路感染的病原微生物种类
体内适量硝酸盐的存在
尿液标本留取的时间
药物的影响
菌尿症常见微生物及致病率
分类
含硝酸盐还原酶
不含硝酸盐还原酶
菌名
致病率
(%)
大肠杆菌属
Klebs氏杆菌属
变形杆菌
葡萄球菌属
假单胞菌属
72.0
16.0
5.0
5.0
1.0
粪链球菌属
1.0
白细胞计数
试带法:中性粒细胞胞浆中含有的
酯酶作用于模块中吲哚酚酯,使其产
生吲哚酚,后者与重氮盐反应形成紫
色化合物,其颜色的深浅与细胞的多
少呈比例关系。
维生素C
试带法:VitC在酸性条件下使
染料还原,模块颜色发生改变。
血红蛋白、胆红素、葡萄糖、
亚硝酸盐
尿液分析试纸
项目
缩写符号
酸碱度
蛋白质
葡萄糖
隐血
胆红素
尿胆原
酮体
亚硝酸
白细胞
比密
抗坏血酸
pH
PRO
GLU
BLD
BIL
URO
KET
NIT
LEU
d(SG)
ASG
反应原理
pH指示剂
pH指示剂的蛋白质误差法
葡萄糖氧化酶法
血红蛋白类过氧化物酶法
偶氮反应法
醛反应法、重氮反应法
硝基铁氰化钠法
亚硝酸盐还原法
酯酶法
多聚电解质离子解离法
还原法
中华医学会提出尿液干化学分析仪
筛检的标准:
当干化学尿液试带质量合格、尿
液分析仪运转正常情况下,试验结
果中白细胞、红细胞、蛋白及亚硝
酸盐全部为阴性时,可以免去显微
镜检查。
干化学过筛适用范围的局限性





肾科和泌尿科病人的尿液不适合于干化学过
筛显微镜检查。
以镜检结果作为诊断依据或疗效观察时,不
宜使用干化学方法作为过筛。
要结合临床表现判断结果。不可只看干化学
分析,忽视镜检。
尿液的外观与尿沉渣有一定的相关性。当尿
液外观异常时,应注意显微镜检查。
干化学试剂带的质量、稳定性及质量控制与
过筛的准确性密切相关。
组合型试带
肾病型四联试带:pH、蛋白、隐血、比密
糖尿病型五联试带:pH、蛋白、葡萄糖、
酮体、比密
肝脏病型二联试带:胆红素、尿胆原
结果分析:
干化学(+)
镜检(-)
WBC 细胞破坏
干化学(-)
镜检(+)
以淋巴细胞为主
RBC 为Hb、Mb尿, 大量VitC,试带失效
含热不稳定酶、
菌尿
NIT 标本放置时间
尿路感染的病原微生物种类、
过久或被污染
无硝酸盐的存在、
尿液标本留取的时间、
药物
(二)尿标本制备prepare of urine specimen:
1.离心centrifugation
离心10ml尿(离心管)水平离心机 有效半径为 15cm ,
相对离心力为378G
1500转5分钟
弃上清液,取剩余约0.2ml混匀
吸取混匀液0.02ml于载玻片上
盖片(18*18mm或22*22mm),防止产生气泡
低倍镜下:全片观察,计数管型(20个视野)
高倍镜下:细胞计数、复查管型、结晶(10个视野)
2.不离心not centrifugate
3.染色 stain
二.尿细胞成分检查及临床意义
urinary cell element examination
and clinic significance
(一)红细胞red cell
参考值reference interval:
混匀一滴尿 0~偶见/高倍视野
离心尿
0~3个/高倍视野
1.量quantity

肉眼血尿:如果每100ml尿液中含
有0.1ml以上的血液时,肉眼能看
到不同程度的浑浊红色,称为肉眼
血尿。
Visual hematuria:
Excretion of urine containing blood,
which can be demonstrated by eyes.
Usually RBCs are more than 50/HPF by
the microscope.

显微镜血尿microscopic hematuria:
100ml尿液中含有0.1ml以下的血
液,肉眼看不见,只有通过显微镜
才能发现,称显微镜血尿。
Microscopic hematuria:
Excretion of urine containing blood,
which can be demonstrated only by the
microscope and usually equal or more
than 3/HPF.
2.形态form(质quality)
新鲜尿中红细胞形态对鉴别肾小球源
性和非肾小球源性血尿有重要价值。异形
红细胞 >30%肯定诊断为肾小球性;
15%~30%初步诊断;
<15%肯定诊断为非肾小球性。
红细胞(非肾小球源性)
红细胞(S染色:非肾小球
源性)
瘤状、环状、岛状红细胞(未染色)
用相差显微镜观察计数红细胞,参照Brich
和李惊子判断标准将红细胞结果分为三型:
(1)均一型(均一红细胞血尿homogeneous erythrocyte
hematuria)
(2)多形型(变形红细胞血尿metamorphotic erythrocyte
hematuria)
(3)混合型(混合性血尿mixed hematuria)
诊断diagnosis:肾小球源性血尿多为变形红细
胞血尿,或以其为主的混合性血尿。
3.鉴别identification:
名称





形态
折光性
红细胞 淡黄色双
red cell 凹圆盘状
脂肪滴 无色正圆形
fat drop
草酸盐 无色圆形
oxalate salt 椭圆形
酵母菌 无色椭圆形
yeast
淀粉颗粒无色类圆
starch 形椭圆形
弱
大小
排列
一致
无规律
加蒸馏水 化学试验
破坏
隐血(+)
强
不一致 不一致
不破坏
苏丹III染色
强
不一致 无规律
不破坏
强
不一致 有规律
不破坏
10%盐酸可
溶解
隐血(-)
弱
不一致
无规律
不破坏
遇碘成蓝
紫色
(二)白细胞white cell
正 常 normal : 偶 见 1~2 个
/Hp。
白细胞white cell
镜下脓尿 microscopic pyuria :如果镜下白
细胞大于5个/Hp为增多。
Microscopic pyuria:
The production of urine that contains
white blood cells, when inspected by the
microscope. Examples which may result in
pyuria include urinary tract infection,
tuberculosis, cancer and acute
pyelonephritis.
脓细胞pus cell:炎症时白细胞发生变异
或已死亡,其外形变得不规则,结构
不清,称为脓细胞,其往往成团分布。
闪光细胞glitter cell:急性肾盂肾炎时,在
低渗条件下,有时可见中性粒细胞胞质
内颗粒呈布郎运动,由于光的折射,出
现闪光现象。
嗜中性白细胞(未染色)
临床意义clinic significance:
白细胞增加主要见于泌尿系
统炎症、结核、结石,以及膀胱、
尿道恶性肿瘤、肾小球肾炎白细
胞可轻度增加。
验尿
潜血反应(+)
尿沉渣检查
红细胞(+)
显微镜性血尿
红细胞(-)
显微镜性血尿
尿蛋白(+)
尿蛋白(-)
尿沉渣红细胞形态学检查
变形红细胞(+)
变形红细胞(-)
尿沉渣检查
白细胞(-)
肾小球疾病
肾功能检查
图象检查
肾活组织检查
泌尿系统疾病
图象检查
尿细胞诊断
膀胱镜
白细胞(+)
尿道感染
(三)吞噬细胞phagocyte
形态form:比白细胞大,含吞噬细胞
意义significance:泌尿道急性炎症,
常伴白细胞增加。
(四)上皮细胞epithelial cells:
尿中所见上皮细胞有:肾小管、
肾盂、输尿管、膀胱、尿道等处脱落。
1.正常鳞状上皮细胞(扁平上皮细胞)




正常normal
: 尿液中可见少量。
squamaus
epithelial cell
来源 souce :来自尿道前段和阴道黏膜的表
层。
形状form:见图
临床意义clinical significance:如大量出现,见
于妇女尿中成片出现无临床意义,如同时
伴有大量白细胞,表示泌尿生殖系统炎症。
下一张
表层扁平上皮细胞(未染色)
胞体较大,
扁平似鱼
鳞,形状
不规则呈
多角形,
边缘常卷
折,胞核
小而明显,
呈圆形或
卵圆形。
表层扁平上皮细胞(S染色)
返回
2.移形上皮细胞transitional epithelial cell



正常normal: 少见。
来源source:肾盂、输尿管、膀胱和尿道近
膀胱段等处的移形上皮细胞。
形状form:这类细胞由于部位不同和脱落
时器官收缩状态的差异,其大小和形态
有很大差别。
(1)表层移形上皮细胞(大圆上皮细胞)



正常normal:偶见,成片脱落可见于膀胱炎
来源souce:膀胱上皮表层,阴道上皮中层
形态 form :在器官充盈时脱落,则胞体较
大,约为白细胞4~5倍,多呈不规则圆形,
核较小,常居中央;在器官收缩时脱落,
则胞体较小,约为白细胞2~3倍。
(2)中层移形上皮细胞(尾形上皮细胞)



来源 souce :多来自肾盂,有时亦可来自输尿
管及膀胱颈部
形态form:体积大小不一,常呈梨形、纺锤
形或尾形,核较大,呈圆形或椭圆形
意义significance:正常不易见,上述部位有炎
症可成片出现
(3)底层移形上皮细胞(和肾小管上皮
细胞统称为小圆上皮细胞)
形态form :体积较小,形态较圆。底层上
皮细胞核相对较小,而整个胞体比肾小
管上皮细胞大 。
3.肾小管上皮细胞 renal tubular epithelial cell
来源souce:来自肾小管
形态 form:形态往往不规则,常为多边形,故又
称为多边形细胞,与白细胞相似,较白细胞略
大(大1/3左右),有一个大而明显的核和一
些不规则的颗粒,胞质中有小空泡、颗粒或脂
肪小滴。 见图
意义 significance :正常不见或偶见,成片出现表
示肾小管有坏死性病变,肾移植排斥反应可出
现成片。
复粒细胞compound granular cell(脂肪颗粒细
胞):在某些慢性肾病中,常见肾小管上皮细胞
发生脂肪变性,浆内充满脂肪颗粒,甚至将胞核
遮盖,此细胞称为复粒细胞。 见图
肾小管上皮细胞(未染色)
肾小管上皮细胞(S染色)
肾小管上皮细胞(S染色)
返回
复粒细胞
compound granulation cell
4.多核巨细胞multinuclear giant cell
来源souce:一般认为是由尿道而来的移形上
皮细胞。
形态form:大小20~25um,呈多角形,椭
圆形,有数个椭圆形的核,可见嗜酸性包
涵体。
意义significance:见于麻疹、水痘、腮腺炎、
流行性出血热等病毒性感染者尿中。
5.非典型性细胞atypical cell
肾脏和尿路系统肿瘤细胞,应用巴氏
染色。
扁平上皮癌细胞(S染色:子宫)
移形上皮细胞(S染色:膀胱癌)
三、管型casts



1877年 德国学者Vigla和Rayer最先报道
1962年 Mcqueen用免疫学方法证明透明
管型是TH粘蛋白和少量白蛋白为主的血浆
蛋白凝固沉淀而构成管型的基质
1944年 Olive用显微解剖观察肾单位时,
明确证实尿管型是在远曲肾小管和集合管
的官腔中所见的圆管状铸形
一、定义definition:尿液中蛋白在肾小管、
集合管内凝固而成的圆管状结构物。
二、形成条件formation condition:
 1.蛋白尿的存在
 2.肾小管有使尿液浓缩和酸化的能力
 3.要有可供交替使用的肾单位
(一)透明管型hyaline cast


形状 form :无色、半透明,圆柱形,
大小,长短不一,通常两边平行,两
端钝圆,平直或略弯曲,甚至扭曲。
在暗视野下易见,在碱性尿液中或稀
释时,可溶解消失。
正常参考 reference:0~1/LP(浓缩尿
中偶见)
透明管型的意义hyaline casts significance:




正常人激烈运动或老年人,一般无临床
意义。如持续多量出现,并可见异常粗
大的透明管型和红细胞,表示肾小管有
剥落现象,说明肾脏有严重的病变。肾
脏轻度/暂时性功能改变,肾实质病变时,
透明管型增加。
透明红细胞管型——肾出血
透明白细胞管型——炎症
透明脂肪管型——肾病综合征
(二)细胞管型cellular cast
其含细胞数量超过管型体积的1/3,
包括红细胞、白细胞、上皮细胞管型,
常表示肾脏病变在急性期。
Cellular cast
A cast in which there are red blood
cells or/and white blood cells et al.
1.红细胞管型red cell cast:


红细胞常互相粘连而无明显的细胞界线,有时
因溶血现象只存在红细胞的轮廓。如红细胞已
破坏,使管型基质呈红褐色后称“血液管型
blood cast”或“血红蛋白管型hemoglobin cast”
意义significance:表示肾脏有出血。急性肾炎、
慢性肾炎急性发作。急性肾小管坏死、肾移植
后急性排斥反应、溶血性输血反应。
2.白细胞管型leucocytes cast


其中含白细胞、脓细胞或其凝块,
POX染色呈阳性。
意义:化脓性炎症,见于急性肾
盂肾炎、间质性肾炎;非化脓性
炎症,见于SLE肾炎。
3.上皮细胞管型epithelial cell cast


含肾小管上皮细胞,表示肾小管上皮
有脱屑性病变。
意义significance:肾小管病变如急性肾小
管坏死、急性肾炎、重金属和化学物
质中毒、肾移植排斥反应及肾淀粉样
变性。
上皮细胞管型epitheial cell cast(S染色)
(三)颗粒管型granular cast
定义:内含大小不同的颗粒,其量超过
1/3面积时称为颗粒管型。外形较短
且亮,淡黄色或棕黑色。
来源:细胞崩解的残渣,或血浆蛋白及
其它物质直接聚集于基质而形成的。
分为粗颗粒管型和细颗粒管型。
意义:粗颗粒管型——慢性肾小球肾炎
细颗粒管型——慢性肾炎、急
性肾炎后期。
(四)肾功能不全管型renal failure casts



形状:宽达50um以上,是一般管型的
2~6 倍 , 又 称 宽 幅 管 型 ( broad
cast)。宽而长,不规则,易折断。
来源:损坏的肾小管上皮细胞碎屑在内
经宽大的集合管内凝聚而成。
意义:急性肾功能不全多尿早期、慢性
肾功能不全示预后不良
(五)脂肪管型fatty casts


含大小不等折光性强的脂肪滴,为肾
小管上皮细胞脂肪变性后的破碎物。
意义:慢性肾炎,尤肾病综合征、类
脂性肾病。
(六)蜡样管型waxy casts



形状:蜡黄色,质较厚,折光性强,边
缘常有切迹,有时分节或扭转状。
来源:管型在肾小管中停留时间过久或
淀粉样变的肾上皮细胞溶解所致。
意义:肾小管有严重的变性坏死,是不
良之兆。见于慢性肾炎晚期,肾淀粉样
变。
(七)易误认为管型的物质



1.类圆柱体cylindroid:
意义:肾血循环障碍或肾受刺激有关。
2.黏液丝mucous strands:
意义:正常情况下可见于正常人尿,尤
其是妇女。增高表示尿道受到刺激或有
炎症反应。
3.假管型pseudo cast:
四、结晶crystals
(一)酸性尿中结晶
常见非病理性结晶:尿酸、尿酸盐、草酸钙
病理性:
亮氨酸、酪氨酸——见于严重的肝实质损伤如
急性肝萎缩、肝硬化、磷和氯仿等中毒;
胆固醇——乳糜尿、脓尿等;
胆红素——黄疸、急性肝萎缩、肝癌、肝硬化;
胱氨酸——结石可能、PNH、先天性胱氨酸
病
(二)碱性尿中结晶:
磷酸盐结晶:三联磷酸盐无意义;
无定型磷酸盐无意义;
磷酸钙—常与代谢性疾病相伴随
碳酸钙:无意义,加HAC溶解,产生
气泡
尿酸钙:如刺苹果,若新鲜尿中出现,
示膀胱细菌感染。
尿液标本
混浊
加酸
加热
变清
变清
产生气泡
磷酸盐
碳酸盐
尿酸
草酸钙结晶calcrium oxalate crystal(未染色)
磷酸氨镁盐结晶
尿酸钙结晶(未染色)
尿酸结晶(未染色)
胆固醇结晶cholesterol crystal
胆红素结晶bilirubin crystal
含铁血黄素颗粒
五、细菌和真菌
germ and fungi
细菌germ(S染色)
真菌fungus(未染色)
埃及血吸虫
六、传统结果报告:








报告
白细胞
红细胞
上皮细胞
结晶
性)
管型
酵母菌
滴虫
细菌
多时按
正常参考值
0~5
0~3
0
0~3/HP(非病理
0
0
0
0~5/HP(数量过
视 野 范 围 : +~++++ )
七、尿沉渣检查中存在的问题:
1.各实验室之间检查方法不统一。
2.各检验机构、检验人员之间报告结果
差异较大。
3.实验步骤尤分析前繁琐,干扰实验的
各个环节较多。质控物制备困难,易受
主观因素影响,难以标准化。
八、定量板报告方式**/ul
定量板:配套的尿沉渣检查系统kova
system,包括:
 12ml塑料刻度离心管;
 带壶腹的塑料移液管;
 10孔固定6.6ul定量的有机玻璃板;
 S-M染色液;
 含不同细胞的质控物。
(一)操作步骤:
尿 液 12ml , 有 盖 kova 管 , RCF400G , r=6 英 寸 ( 约
15cm)
插入kova吸管,倾去上清液,移去吸管
加sternheimer、Malbin染料
用吸管混匀,吸适量移至kova计数板(每池内有10个
大方格,每大格1mm2,每大格有9个小方格)
低倍镜下数10个大方格管型;高倍镜下数10个大方格细
胞数然后计算**/L
(二)FAST-READ 10
尿沉渣定量分析板包括:
1.Biosed尿沉渣离心管;
2.FAST-READ10尿沉渣定量分析
板
八、注意事项:





1.新鲜尿,最好用中段尿,以免细菌生
长和细胞破坏。
2.加热加酸消除尿酸盐和磷酸盐结晶。
3.操作步骤、手法一致,以利对照。
4.尿宜使用PH酸性,以保持有形成分,
因高浓度和低PH有助于保存有形成分,
5.女性尿常混有阴道分泌物,必要时冲
洗外隐后留取标本。
脑脊液
Cerebrospinal Fluid, CSF
一、概述overview
(一)历史:
(二)CSF的生成 :
(三)CSF循环 :
(四)CSF的功能 :
(五)CSF的组成成分:
(六)CSF检查目的(下一张)
(二)CSF的生成:

婴儿为50ml;成人为150ml
CSF生成率是0.3~0.4ml/min,
每天分泌的量不超过400~500ml,
4~8小时更新1次,每日更换3~4
次。 (返回)
(三)CSF循环:
脉络丛(脑室)主
动分泌和超滤作
用产生
侧脑室
室间孔
第3脑室 中脑导
水管
第4脑
室
正中孔和外
侧孔
珠网膜下
腔
珠网膜上矢
状窦(静脉窦)
吸收后进入静脉
返回
(四)CSF的功能



1.保护功能
2.调节颅内压
3.代谢作用
返回
(五)CSF的组成成分:



Blood-brain barrier(BBB):The barrier
exists between the blood and the central
nervous system, the brain and the spinal
cord.
1.易透过的物质:Na+,cl- ,Mg2+,CO2,乙
醇。
2.不易透过的物质:清蛋白,葡萄糖,尿素,氨
基酸,肌酐,酮体,酶,乳酸。
3.最不易透过的物质:纤维蛋白原,胆红素,抗
体,补体,胆固醇等。
二、CSF采集spinal tap
(一)穿刺部位tap
position:
———————————————————
CSF压力的正常值
卧位
坐位
——————————————————————————————————
腰椎穿刺
60~180mmH2O
350~400
mmH2O
lumbar puncture
小脑延髓池穿刺
8~100 mmH2O
0
cerebellomedullary cistem
脑室穿刺
70~120 mmH2O
0或负数
lateral ventricle
———————————————————
(二)腰椎穿刺适应证



lumbar puncture indication
不明原因剧烈头痛、昏迷、瘫痪脑
膜刺激症
疑颅内出血,脑膜白血病,神经梅
毒
锥管给药、造影、腰麻
(三)禁忌证contraindication




疑有颅内高压者
处于休克,衰竭或濒危状态者
腰椎TB、穿刺部位有化脓性感
染灶
颅后窝有占位性病变或伴有脑
干症状者
(四)标本采集specimen collection
无菌采集
压力测定
收集三管
 T1
bacterial examination
 T2
chemical and immunological
examination
T3 cell count
各1~2ml,立即送检。

二、CSF常规检查内容
content of CSF routin examination
(一)一般性状检查general examination
1.颜色colour
2.混浊度turbidness即透明度transparency
3.薄膜film形成和凝块 coagulum
4.比密specific gravity
5.pH
1.颜色colour:
正常:无色透明
(1) 红色
病理:呈红色、红褐色、柠檬
黄色或淡黄色。
血性CSF的大致红细胞数
外观和性状
轻度浑浊
粉红色
×106
明显红色
血性
10000×106
估计红细胞数/L
(500~1000)×106
(1000~3000)
大于5000×106
大于
区别新鲜出血和陈旧出血
三管试验:
穿刺出血:留取标本时,第一管为血性,
以后两管颜色逐渐变淡,红细胞计数
结果也依次减少。
珠网膜下腔出血:三管呈均匀红色。
区别新鲜出血和陈旧出血
新鲜出血
外观:
浑浊、易形成凝块
离心沉淀:
无色透明
上清液
红细胞形态 :无变化或无皱缩
白细胞数:
不增加
反
红细胞/白细胞 : 500 : 1
例
陈旧出血
较透明
红、褐、黄
OB(+)
有改变
继发性或
应性增加
失去正常比
2.黄色:CSF黄变症cxanthochromin





出血性
郁滞性
梗阻性
黄疸性
其他色素
3.其他颜色




棕色或黑色
绿色
米汤样浑浊
乳白色
2.混浊度即透明度


观察方法:在腰穿后1小时取CSF
3~5ml,置无色透明玻璃试管内,
在自然光线下进行观察。
报告: 清亮
微混
混浊
3.薄膜形成和凝块
normal:
pathology:
purulent meningitis——往往1~2小时内形
成薄膜,凝块或沉淀
tuberculous meningitis——12~24小时形
成膜状物或纤细凝块
neurosyphilis——出现小絮状凝块而不形成
薄膜
subarachnoid cavity obstruct——其远端部
位的CSF因蛋白含量呈黄色胶胨状
4.比密


正常:1.006~1.008
增 高 : cephalitis 、 meningitis 、 brain
hemorrhage 、 brain verminosis and
tumor,etc。
5.PH
正常:7.31-7.34
二、显微镜检查
microscopic examination
CSF细胞的种类
CSF主要来源于血液中的细胞
去向主要通过淋巴系统引流、
变性和血液回流。
正常:
病理:
1.细胞计数
(1)细胞总数
(2)白细胞计数法
(3)红细胞计数
(4)白细胞正常值:0~10 × 106/L
2.白细胞分类
(1)直接法:
(2)染色法:
正常 淋巴:单核 = 7:3
4.临床意义:
clinic significance
(1)CSF中性粒细胞增多:脑膜炎症,
特别是急性炎症的渗出期;出血和脑
挫伤等。
(2)淋巴细胞占优势:急性病毒感染、
急性细菌性感染的恢复期、慢性细菌
性感染或霉菌性感染,肉芽肿等。
(3)嗜酸细胞增多:见于脑寄生虫病、
变态反应性疾病。
(4)白细胞增多,原始/幼稚增多:急
性脑膜白血病。
(5)吞噬细胞:如出现多见于中枢神经出血、
炎症、外伤等,最常见于珠网膜下腔出血。
(6)肿瘤细胞:脑、脊髓或软脑膜恶性肿瘤,
特别是肉瘤如黑色素肉瘤或髓母细胞瘤
(7)细胞数×106/L:化脑、流脑极度增高大
于1000×106/L以中性粒细胞为主。
结脑初以中性粒细胞为主,后淋巴细胞增
多,10~500×106/L。
(三)化学检查chemical examination
1.蛋白质protein:
部位
(mg/l)
脑
50~150
脑
100~250
腰 部
150~400
蛋白含量
室
池
脊
髓
珠
网
膜
下
腔
1)蛋白定性:正常阴性
(1)潘氏法(Pandy’s):蛋白+石炭酸——不溶性
蛋白盐白色沉淀,沉淀量与蛋白量成正比结果易于观
察。
方法特点:样本用量少,操作简单,灵敏度高,总蛋
白大于0.25g/l即可阳性。
(2)Ross-Jone’s:球蛋白+半饱和硫酸铵——白色
沉淀
特点:检测球蛋白,敏感性较弱。
(3)Nonne-Apett’s(诺-爱)
特点:先测球蛋白,除去球蛋白后,再以加热醋酸法
测白蛋白,特异性高于潘氏,但操作较繁,极少选用。
(4)李文生试验Levinson’s:用磺硫酸、氯化高汞分
别沉淀蛋白根据两管沉淀物比例以区分化脑/结脑。
2)蛋白定量
(1)比浊法:磺基水杨酸(沉淀白蛋白) —硫酸钠
(沉淀球蛋白)浊度法。
特点:操作简单,敏感性不如考马氏亮蓝法,必须先离
心,以排除细胞及细胞蛋白的影响。
(2)染料结合法:考马氏亮蓝法G-250
特点:灵敏度高,标本用量少,重复性好,但对球蛋白
的显色过浅,使结果偏低;对pH要求较严;形成的考
马氏亮蓝-蛋白复合物易黏附器皿,影响比色杯清洗
困难,要用95%乙醇或甲醇清洗。
(3)化学结合法:邻苯三酚红钼络和法
特点:敏感度同上,色素不吸附器皿,国产价格低廉,
故应用较广。
3)临床意义clinic significance
增高 脑梗阻、脑炎、脑出血、脑
软化、及脑退行性变、颅内占位
病变等。
减低 CSF鼻漏、耳漏、颅内压
增高、甲亢。
2.葡萄糖glucose
腰穿:
2.5~4.4mmol/L
小脑延髓池:2.8~4.2mmol/L
脑室:
3.0~4.4mmol/L
CSF中葡萄糖含量取决于以下几种因素:
1.血液葡萄糖的浓度
2.血脑屏障的通透性
3.CSF中葡萄糖的酵解程度
4.携带运转系统的功能
1)定性(半定量):基本同尿糖班氏法
2)定量:葡萄糖氧化酶法
3)临床意义:
增加:糖尿病、早产儿、新生儿、脑水
肿、脑溢血。
下降:化脑减少最明显、霉脑、结脑、
脑瘤、神经梅毒、低血糖。
3.氯化物chloride
CSF中氯化物主要是NaCl含量高于血中
正常normal: 120~130mmol/L
临床意义clinic significance:
减低 见于结脑最明显、流脑、化脑、
低氯血症,病毒性脑炎无显著变化。
增高 见于尿毒症、肾炎。
(四)细菌检查bacteriologic examination
1.direct smear
Gram’stain
Neisseria menigitidis 、
streptococcus pneumoniae
Acid-fast stain
tubercle bacillus
India ink preparation Cryptococcus
2.bacterial culture
Staphylococcus aureus、streptococcus
pneumoniae 、 Hemolytic streptococcus 、
Escherichia coli
Neisseria menigitidis、Haemophilus influenzae
三、选择检验项目
(一)蛋白
1.蛋白电泳:
(1)CSF和血清蛋白电泳的正常值
蛋白成分
前白蛋白
白蛋白
α1球蛋白
α2球蛋白
β球蛋白
γ球蛋白
脑脊液(%)
2~6
55~65
3~8
4~9
10~18
4~13
血清(%)
无
50~68
2~6
6~13
6~12
10~20
(2)临床意义:
前白蛋白
舞蹈病
帕金森氏
β球蛋白
退行性变
白蛋白
α1球蛋白
α2球蛋白
脑血管
脑部感染
脑部肿瘤
疾病
γ1球蛋白
周围神经炎
脑肿瘤
γ2球蛋白
多发性硬化症
病毒脑
2.蛋白商 protein quotient
指球蛋白与清蛋白的比值
(1)
球蛋白
按公式计算:比值=
——————
清蛋白
正常:0.3~0.7
(2)比值增加:神经梅毒、多发性硬化症、
脑脊髓膜炎、结节病等。
减低:脊髓压迫症、脑瘤、化脑的
急性期。
3.免疫球蛋白immuneglobulin
CSF免疫球蛋白正常值
类型
参考值(mg/L)
IgA
0~6
IgG
10~40
IgM
0~13
IgE
0
CSF免疫球蛋白正常值
IgG亚型
占IgG总量的百分比(%)
IgG1
66±8
IgG2
23±8
IgG3
7±4
IgG4
4±2.5
1970年 Tourtellotte 建议:IgG CSF比值=IgG
CSF/Alb CSF(≤0.28)
1972年Delpech和Lichtblau建议:IgG指数
1977年Tibbling对此指标进行标记化
IgG CSF/Alb CSF
—————————— ≤ 0.7
IgG S/Alb S
1975年Tourtellotte为了更好地评价中枢神经IgG合
成率创立了每日中枢神经IgG合成率(IgG SYN):
IgG SYN=[(IgG CSF-IgG S/369)-(Alb CSF-AlB
× 0.43] × 5
S/230 ) ×IgG
S/AlB
S
(mg/dl)≤3.3mg/dl
4.髓鞘碱性蛋白
myelin basic protein,MBP
MBP测定作为多发性硬化症的辅助
诊断指标,但缺乏特异性。急性中枢神
经系疾病如神经梅毒、脑血管意外、外
伤等。
正常:<4ug/L
(二)酶学检查
enzyme labeled compound assay
有关疾病CSF酶诊断指标的选择
CSF酶
LDH及其同工酶、LYS、腺甘酸激
酶、CK及其同工酶
病毒性脑膜炎
LDH及其同工酶、ADA
恶性肿瘤
脱氧腺甘酸酶、CK同工酶、烯醇化酶
软脑膜继发性肿瘤 LDH同工酶
脑血管疾病
CK同工酶、AST、ALT
脑损伤
CK、AST、NSE、腺甘酸激酶
结核性脑膜炎
ADA、LYS
疾病名称
细菌性脑膜炎
(三)其他other
1.乳酸lactic acid:
正常 小于2.8mmol/L
增高:脑缺氧、缺血、脑损伤、出血、脓肿、
多发性硬化症、细菌性脑膜炎和结脑等。
2.环磷酸腺苷adenosine phosphate cAMP
正常 13.0±2.3nmol/L
增高:当脑和脑膜疾患时,由于细胞代谢紊
乱而导致CSF中cAMP含量的改变,且较蛋白、
糖、细胞计数敏感。
四、细胞学检查cytology examination
(一)细胞收集方法
1.沉淀室法:
2.微孔薄膜筛滤法:
3.玻片离心法:
4.纤维蛋白网细胞捕获法:
(二)细胞检查
CSF基于近代细胞学、免疫学理论分为六
大类细胞
1.CSF腔壁细胞(脉络丛细胞,室管膜细胞,珠
网膜细胞)
2.免疫活性细胞(小淋巴细胞,转化型淋巴细胞,
淋巴样细胞,浆细胞)
3.单核吞噬细胞(单核细胞,激活型单核样细胞,
巨噬细胞)
4. 多形核粒细胞(中性粒细胞,嗜酸性粒细胞)
5. 肿瘤细胞
6. 污染细胞(软骨细胞,骨髓细胞)
(三)常见细胞形态及临床意义
细胞
义
小淋巴细胞
形态
意
与血中淋巴相似
正常CSF主要细胞,占
60~70%。增
加见于慢性
大淋巴细胞
激活淋巴细胞
脑梗
单核
脑膜炎
单核样激活细胞
浆细胞
正常偶见
着色较大淋巴淡
与血中单核相似
浆多,有突起
与血中相似
细菌、病毒感染
意义同小淋巴细胞
增加见于感染、珠血、
、 脑瘤
正常CSF中占30%
增加见于病毒性
正常少见,意义同单核
细胞
正常无
增加见于炎症、
肿瘤、珠
血等
细胞
中性细胞
形态
与血中相似
意义
正常无
增高见于炎症、外伤、
出血、
嗜酸细胞
与血中相似
梗塞、恶性肿瘤
正常小于1%,婴幼儿4%
增加见于结核、寄生
虫、病毒
脉络丛细胞
白血病
肿瘤细胞
常成团出现,核
圆偏于一侧,浆
丰,粉红 /蓝灰
与骨髓/血中幼稚
细胞相似
核大,核仁多而
大,核染色质多
、脑瘤
正常偶见,无诊断价值
常见于婴幼儿脑积水、脑室
穿孔或造影术后
脑膜白血病
肿瘤
(四)常见脑、脑膜疾患的CSF改变
疾病
压力 外观 凝固
细胞
蛋白
糖
氯化物
细菌
化脑
↑↑
混浊 可凝固 中性细胞 中、明显↑ ↓↓
↓
化脓菌
结脑 ↑↑/↑ 透/混
薄膜 早中性、晚淋巴 中
↓
↓↓ 抗酸杆菌
病毒脑炎 ↑
透
(-) 早中性、后淋巴 轻
正
正
(-)
新隐球菌脑↑ 透/微 (±)
淋巴
中
↓
↓
隐球菌
脑室/珠血 ↑ 血性 (±) 红细胞
轻度增加
↓
正
(-)
脑瘤
↑
透
(-)
淋巴
轻度
正
正
(-)
脑脓肿
/(-)
↑
微混
(±)
淋巴
轻度
正
正
(+)
浆膜腔积液检验`
serousmembrane fluid
SMF
Serous
coat
coat
coat
visceral serous
serous cavity
parietal serous
Serous cavity effusion:
Accumulation of
serous fluid in serous
cavity.
一、概述overview:
正常
胸腔20ml以下积液
病理
胸腔积液
pleural effusion
腹腔小于50ml积液
腹腔积液
peritoneal effusion
心包腔15~30积液
心包腔积液
ericardial effusion
SMF检验的目的
aim of SMF examination
1.鉴别SMF性质
2.寻找病原
二、标本采集要求
1.无菌术
2.抗凝
3.立即送检
留取中段积液:
常规
生化
细胞学检验
细菌
厌氧菌培养
结核菌培养
10ml
10ml
20ml
10ml
5ml
100ml
三、积液形成机理和常见疾病
浆膜腔积液
按性质和病因
漏出液(滤出液)
transudate
渗出液
exudate
漏出液 transudate
1、血浆胶体渗透压下降
2、毛细血管流体静水压升高
3、淋巴回流受阻
A transudate is derived fluid substance
from plasma, which has passed through
a membrane or been extruded from a
tissue.
渗出液exudate
见于细菌性胸腹炎、腹膜炎、
心包炎、恶性肿瘤、结缔组织病
等。
Material, such as fluid, cells or cellular debris,
which has escaped from blood vessels and has
been deposited in tissues or on tissue surfaces,
usually as a result of inflammation.An exudate,
in contrast to a transudate, is characterized by
a high content of protein, cells or solid
materials derived from cells.
四、一般检查general examination
(一)理学检查physical examination
漏出液
渗出液
transudate
1.量
2.色
色
3.透明度
菌
4.比密
5.凝固性
酶
淡黄、黄绿色
exudate
草黄、棕红、乳白、绿
透明、微混
不同程度浑浊,因含有细
小于1.015
一般不凝固
、细胞所致
大于1.018
一般凝固,但有大量纤溶
时可不凝固
(二)化学检查chemical examination:
漏出液
渗出液
transudate
exudate
1 . PH :
一般偏低
2.粘蛋白试验:
(-)
rivalta test
3.蛋白质总量: 小于25g/L
40g/L
4.葡萄糖测定: 与血糖相近
7.46±0.05
(+)
大于
降低
(三)酶学检查
enzyme labeled comound assay
Light提出:
LD活性大于200u/L
积液LD/血清LD比值大于等于0.6
可作为渗出液的指标
(四)显微镜microscopic examination
1.细胞计数:
(意义不大)
500×106/L
漏出液
渗出液
小 于 100×106/L
大于
2.分类:
(有一定意义)
3.病原体:
4.结晶体:
以淋巴和间皮为主 较多,各种细胞
微生物、寄生虫
(五)积液的实验室一般检查结果
检验项目
渗出液
外观
浑浊、不透明或血性
大于1.018
比密
总蛋白量(g/L)
大于30
积液/血清蛋白比值 大于0.5
乳酸脱氢酶(LD)
大于200U/L
积液/血清LD比值
大于0.6
白细胞数 /L
大于500×106/L,以
(有核细胞数)
中性细胞为主
红细胞数/ul
凝固性
大于100/ul,尤其是
恶性肿瘤积液
可凝固
漏出液
清晰、透明、淡黄色
小于1.015
小于30
小于0.5
小于200U/L
小于0.6
小于100×106/L单个
核细胞超过50%,以
淋巴、间皮细胞为主、
小于100/ul但创伤性积
可大于100
不易凝固
近年来,国内外用1972年Light
推荐的渗出液诊断标准,已被广泛接受:
1.LDH大于200U/L
2.蛋白质(积液/血清)大于0.5
3.LDH(积液/血清)大于0.6,恶性肿瘤大于
1.0。
结论:
1.以上三项中二项符合即为渗出液,反之为
漏出液。
2.但仍有5%误判,特别是大于40岁以上的。
五、选择性检验项目
(一)蛋白
1.铁蛋白(IBP):
含量可作为肿瘤性积液与结核性胸膜
炎性积液的鉴别诊断指标
癌性积液铁蛋白常大于600ug/L
2. 纤维连接蛋白(fibronectin,FN)
恶性腹水FN173.9±65ug/ml,非恶性13.4±6.8ug/ml
3.纤维蛋白原降解产物(FDP)
恶性肿瘤大于结核性胸膜炎及腹
膜炎大于肝硬化
如果积液 FDP大于1000mg/L,提示恶
性积液的可能性较大
4. C反应蛋白(CRP)
漏出液小于等于10mg/L
渗出液大于10mg/L
5.抗结核菌体蛋白衍生物(PPD)
可明确提供TB感染依据,是一种快速
诊断指标
(二)酶
1.溶菌酶(lysozyme,Lzm):
胸水<65ug/ml提示恶性可能
>80ug/ml提示结核可能
2.腺苷脱氢酶总活性测定
(adenosine deaminase,ADA)
以 ADA 活 性 大 于 50u/L为 限 ,
可区分结核性胸腔积液和恶性积液
3.淀粉酶(amylase,AMY):
食道破裂唾液经穿孔处流入胸腔,胸
腔积液AMY增加;
大多数胰腺炎患者或胰腺创伤等所致
腹腔积液中,可高达血清几倍到几十
倍。
4.碱性磷酸酶(AKP):
大多数小肠扭转穿孔患者的腹腔
穿刺液中增加。
积液AKP/血清AKP>0.1,有助于
恶性和非恶性积液的鉴别。
(三)肿瘤标志物检测
examination of tumor mark
1.Carcinoembryonic,CEA:
积液中CEA>20ug/L
积液CEA/血清CEA>1
应高度怀疑为癌性积液
2.AFP:
3.HCG(HCGβ链):
4. CA-125
六、浆膜腔脱落细胞学检测
七、良性与癌性胸腹水的鉴别
比较项目
良性
外观
血性少见
总蛋白
炎性多>40g/l
铁蛋白
<500ug/L
纤维连接蛋白
13.4 ± 6.8ug/L
LDH
<250U/L
ADA
>40U/L
唾液酸
<340mg/L
总胆固醇
<2.8mmol/L
积液同血清胆固醇比
>0.3
CEA
<20ug/L
积液同血浆CEA比
<1.0
CA19-9
正常
染色体分析
绝大多数为二倍体
细胞学检查
仅为炎性细胞
癌性
多为血性
20~40g/l
>500ug/L
137 ±6.5ug/L
>250U/L
<40U/L
>340mg/L
>3mmol/L
<0.3
>20ug/l
>1.0
升高
超二倍体及多倍体多见
多为非倍体并有各种畸变
可见癌细胞