Transcript Strep Grouping Kit [SV]

3. Försiktighetsåtgärder
Denna produkt är endast avsedd för in vitro-bruk.
STREPTOKOCKGRUPPERINGSKIT
Reagenserna
SV
DR0585A.......................... 50 Tests
1. Intended use
En
latexagglutinationstest
för
streptokockgrupperna A, B, C, D, F och G
Latexreagenserna får inte frysas.
identifiering
Alla latexreagenserna är klara för användning när de nått
rumstemperatur.
av
Lancefield1 visade att de flesta patogena streptokocker innehåller
specifika kolhydratantigener, som gör det möjligt att klassificera
streptokockerna i grupper. Dessa streptokockgruppantigener kan
extraheras från cellerna, och deras förekomst kan påvisas med
latexpartiklar som är coatade med gruppspecifika antikroppar.
Dessa latexpartiklar agglutinerar i närvaro av motsvarande
antigener, men förblir en klar suspension vid avsaknad av
sådana antigener. Oxoids streptokockgrupperingskit är en
agglutinationstest för identifiering av streptokockgrupper,
reagenser finns för grupperna A, B, C, D, F och G. Användning
av den nya enzymatiska extraktionsmetoden förkortar tiden för
antigenextraktionen och förbättrar antigenutbytet betydligt, i
synnerhet för grupp D-streptokocker.
DR 586 Latex grupp A reagens
DR 587 Latex grupp B reagens
DR 588 Latex grupp C reagens
DR 589 Latex grupp D reagens
Det är viktigt att latexreagenserna skakas ordentligt så att
lösningen blir homogen innan den används.
Enzymet späds ut med destillerat vatten till den volym som anges
på etiketten.
Den positiva kontrollen innehåller extrakt från alla sex
antigengrupperna
4. Konserveringsmedel
4.1. Varje latexreagens och positiv kontrollreagens innehåller
0.1 % natriumazid, som klassificerats som farligt vid
förtäring.
4.2. Extraktionsenzymet innehåller 1.7 % tiomersal och
akrompeptidas vid 7.32 %, som klassificerats som giftigt
och sensibiliserande.
T
Giftig
DR 500 Agglutinationskort för engångsbruk
2. Beskrivning, Förberedelse för användning
och rekommenderade villkor Förvaring
Se även Varningar och försiktighet.
Symbolen legend
____________________________________________________
R42/43
Kan ge allergi vid inandning
och hudkontakt.
R52/53
Skadligt för vattenlevande
organismer, kan orsaka skadliga
långtidseffekter i vattenmiljön.
S22
Undvik inandning av damm.
7.5. Vagga kortet försiktigt. Agglutination sker normalt i en
eller flera cirklar inom 30 sekunder. Vagga inte kortet i mer
än 1 minut. Använd inte förstoringsglas för att underlätta
avläsningen.
S36/37
Använd lämpliga skyddskläder
och skyddshandskar.
7.6. Den positiva kontrollen kan användas enligt ovan för
kontroll av latexreagenserna.
Latexreagenserna skall förvaras stående vid en temperatur
på 2-8°C. De behåller då sin aktivitet fram till det datum som
framgår av flasketiketten.
Katalognummer
B. Extraktionsenzym
In vitro-diagnostik Device
Det frystorkade extraktionsenzymet måste förvaras vid en
temperatur på 2 till 25°C.
Temperatur begränsning (Förvaringstemp.)
Konsultera bruksanvisningen (IFU)
Batch Code (Lot Number)
Använd Genom (slutdagen)
Tillverkare
7. Testmetod
7.1. Låt
laskorna
uppnå
rumstemperatur.
Blanda
latexsuspensionen genom att skaka flaskorna kraftigt.
Avlägsna eventuell latex från droppipetten för fullständig
blandning.
Giftigt vid inandning, hudkontakt och
förtäring.
5. Förvaring
A. Latexreagenser
Under sådana förhållanden behåller den sin aktivitet fram till det
datum som anges på flaskan. Efter spädningen med destillerat
vatten skall lösningen förvaras vid en temperatur på 2-8°C. Den
behåller då sin aktivitet i 4 månader.
Observera att grupp D-reagensen ibland inte reagerar med vissa
S.bovis- stammar och att dessa stammar kräver ytterligare tester
för identifiering.
Vid utförande av en serologisk identifiering för streptokocker ska
följande initiala observationer göras : (i) notera hemolysena,c,
(ii) notera cellmorfologinb,c, (iii) bedöm kolonitillväxten med
avseende på renhet och kvantitetd
6.3. Inkubera 10 minuter vid 37°C i vattenbad. Det är viktigt
att efter 5 minuter skaka rören ordentligt i 2-3 sekunder
och sedan fortsätta inkubationen. Ta ut och låt svalna till
rumstemperatur. Extraktet är nu klart för användning.
R23/24/25
För Laboratorieanvändning
6.2. Välj ut 2-5 testkolonier som är 2-3 mm stora med en steril
ögla och blanda upp dessa med enzymlösningen. Om det
är en blandflora, undvik kontaminering
Farligt vid förtäring.
Flödesschemat nedan redovisar det rekommenderade
utförande för identifiering av streptokocker med Oxoids
latexagglutinationstest.
6.1. Späd en flaska Oxoids extraktionsenzym (DR593) med
sterilt destillerat vatten till den volym som anges på
etiketten. Märk rören på lämpligt sätt och tillsätt 0.4 ml
enzym till varje provrör.
R22
Gör följande för varje odling som ska grupperas:
Kan ansamlas i kroppen och ge skador.
DR 592 Polyvalent, positiv kontoll
DR 593 Extraktionsenzym
Försök att utöka dessa metoder med icke-ßhemolytiska
streptokocker har inte varit framgångsrika, förutom för grupperna
B, D och N. N-streptokocker påträffas inte vid infektioner hos
människa.5
R33
DR 590 Latex grupp F reagens
DR 591 Latex grupp G reagens
6. Beredning av odlingar
Proven för identifieringen ska odlas på en blodagarplatta över
natten vid 37°C. Titta efter hemolytisk reaktion på misstänkta
kolonier. Vi rekommenderar dessutom att en gramfärgning- och
katalastest utförs för att bekräfta förekomsten av grampositiva,
katalasnegativakocker. Se standardtext för ytterligare
information2.
7.2. Tillsätt en droppe från varje latexreagens på de runda
cirklarna på reaktionskortet (DR500).
7.3. Sätt till en droppe extrakt till var och en av de sex cirklarna
med en pasteurpipett.
Negativa reaktioner på kortet
ß-hemolytisk
Upprepa extraktionen
med tjockare
suspension
Upprepa
testen
7.4. Sprid med en omrörningspinne ut blandningen i hela
cirkeln. Använd en ny omrörningspinne för varje cirkel.
7.7. Kassera reaktionskortet på ett säkert sätt i ett lämpligt
desinfektionsmedel.
OBS: Om bara ett fåtal tester ska utföras kan korten klippas
itu med en sax och de oanvända delarna sparas och användas
senare.
8. Tolkning av resultaten
Testen ska tolkas som positiv om agglutination uppträder med en
av grupperingsreagensen, eller om en av grupperingsagenserna
ger en betydligt kraftigare reaktion än de övriga fem. Testen ska
anses vara negativ om det inte blir någon agglutination.
Svaga spår av granulärt material kan observeras vid negativa
reaktioner och ska igoneras.
C. Positiv kontroll
9. Testens begränsningar
Falska negativa resultat kan uppträda om en felaktig mängd
kolonier används vid extraktionen.
Förvara den positiva kontrollen vid en temperatur på 2-8°C.
Den behåller då sin aktivitet fram till det datum som anges på
flasketiketten.
Så gott som alla ß-hemolytiska streptokocker som isoleras från
infektioner hos människa innehåller specifika kolhydratentigener,
vilka kan fastställas med serologiska reaktioner.
Om negativ,
rapportera
ej grupp
A, B, C, F
eller G
+/+
grupp
D-enterokock
α-eller icke-hemolytisk
Galleskulin/6,5%
NaCl-buljong
+/grupp D-icke
-enterokocker
-/Viridans
streptokocker
Positiv reaktion på kortet
β-hemolytisk
Testade
stammar*
icke-β-hemolytisk
Lancefield grupp
Reagerar
endast i
A, B, C, F
eller G
Rapportera
grupp
Reagerar i
grupp D
Positiv i
mer än
en grupp
Reagerar i
grupp B
Test i 6,5% Subkultivera Rapportera
NaCloch testa om ickehemolytisk
buljong
grupp B
+ växt
rapportera
grupp
D-enterokock
- växt
rapportera
grupp
D-ickeenterokock
Reagerar i
grupp D
Reagerar i
A,  C,  F
eller G
Galleskulin Biokemisk
/6,5% NaCl- identifibuljong
ering krävs
+/+
Gruppe D
-enterokockb
+/grupp
D-ickeenterokock
INGEN
56
(a) Uteslut Strep pneumoniae. Denna streptokock är alfahemolytisk, gallöslig och optochinkänslig. Andra streptokocker
är inte gallösliga och är optochinresistenta5.
(b) Aerokocker är icke-ß-hemolytiska, växer i 6,5% NaCl-buljong
och ger upphov till varierande reaktioner vid galleskulintesten.
De kan differentieras från enterokocker genom att de bildar
tetrader eller enkla celler, under det att enterokocker bildar
diplokocker eller korta kedjor5.
(c) Stafylokocker och Listeria monocytogenes är ß-hemolytiska
och kan skiljas från streptokocker genom sin cellmorfologi och
katalasreaktion6,7.
KÄNSLIGHET
%
SPECIFICITET
%
KÄNSLIGHET
%
SPECIFICITET
%
KÄNSLIGHET
%
SPECIFICITET
%
NA
99.4
NA
99.1
NA
99.4
30
100
100
100
100
100
100
29
100
100
100
100
100
100
C
30
96.6
99.5
96.6
99.5
96.6
99.5
D (Streptokock)
2
D
(EjStreptokock)
47
83.7
100
92.0
99.7
63.3
100
F
25
92.0
99.4
92.0
99.4
92.0
99.4
G
32
100
94.7
100
95.2
100
96.0
TOTALT
251
94.3
98.9
96.4
98.9
89.2
99.2
* Samtliga stammar testades med var och en av de sex
grupperingsreagenserna
Vissa Lancefield grupp D-organismer gav en D/G-reaktion.
Dessa resultat har tagits med i beräkningarna som sant positiva
grupp D-resultat och falskt positiva grupp G-resultat.
1
Dokumentationen bekräftar att det finns grupp D-stammar som
även ger G-antigener vid enzymatisk extraktion.
References
1. Lancefield R.C. (1938) Proc. Soc. Exp. Bio. Med. 38, 473.
2. Facklam R.R. (1980) in ‘Manual of Clinical Microbiology’, 3rd
Edition. American Society for Microbiology, Washington, D.C.,
pp. 88-110.
3. McIllmurray M.B. (1984) Lancet, I, 1353.
(d) Subkultivera om den misstänkta kolonin är överväxt eller
otillräcklig.
4. Birch B.R., Keaney M.G.L. and Ganguli L.A. (1984) Lancet, I,
856-857.
(e) Stammar med såväl D- som G-antigener har påträffats.4
5. Facklam R.R. and Carey R.B. (1985) in ‘Manual of Clinical
Microbiology’, 4th Edition. Eds. Lennette E.H., Balows A., Hausler
W.J., Shadomy H.J., Amer. Soc. for Microbiol., Washington, D.C.,
pp. 154-175.
Prestandakarakteristika
Sammansättningen av extraktionsenzymreagensen har
förbättrats. Prestanda för Oxoids streptokockgrupperingskit med
det nya enzymet har utväderats vid en testinstitution i Australien.
Testresultaten framgår av nedanstående uppställning.
Känslighet och specificitet hos Streptokock Grupperings Kit
Konkurrerande kit
A
1
-/Viridansstreptokocker
Oxoids Streptokock
Grupperings Kit och
den FÖRBÄTTRADE
enzymextraktions-reagensen
B
1
Biokemisk
identifiering om
problemet  inte
blir löste
Nr.
Oxoids Streptokock
Grupperings Kit och
den URSPRUNGLIGA
enzymextraktionsreagensen
6. Kloos W.E. and Jorgensen J.H. (1985) in ‘Manual of Clinical
Microbiology’, 4th Edition, pp. 143-153.
7. Bortolussi R., Schlech W.F. and Albritton W.L. (1985) in ‘Manual
of Clinical Microbiology’, 4th Edition, pp. 205-208.
Oxoid Ltd, Wade Road, Basingstoke
Hants RG24 8PW, UK
IFU X3981D, Reviderad augusti 2012
För teknisk hjälp, kontakta din lokala återförsäljare