Transcript CEDIA® opiattest 2K

CEDIA® opiattest 2K
In vitro diagnosticum
100090 (kit om 3 x 17 ml)
100099 (kit om 65 ml)
1815296 (kit om 495 ml)
Avsedd användning
CEDIA® opiattest 2K är en in vitro diagnostisk medicinsk anordning avsedd för kvalitativ testning
av opiater i humant urin (vid en brytpunktskoncentration på 2 000 ng/ml).1
Testet ger endast ett preliminärt analytiskt testresultat. En mer specifik alternativ kemisk metod
måste användas för att få ett bekräftat analytiskt resultat. Gaskromatografi/masspektrometri
(GC/MS) är den bekräftande metod som föredras.2 Kliniska överväganden och yrkesmässig
bedömning bör tillämpas för alla resultat från drogmissbrukstester, särskilt när preliminära
positiva resultat används.
Sammanfattning och förklaring av testet
Opium utvinns ur opievallmon Papaver somniferums omogna kapslar.3,4 Morfin och kodein är
naturligt förekommande opiumalkaloider.3,5 Båda har allmänt accepterad medicinsk användning,
huvudsakligen som smärtstillande medel, emellertid missbrukas båda läkemedlen ibland.3-7 Heroin
är en sammansättning som syntetiserats från morfin och den vanligast missbrukade opiaten.8
Opiater metaboliseras snabbt av kroppen, och metaboliseringen sker huvudsakligen i levern.5,6,9
Morfin utsöndras i urin som konjugerat morfin, fritt morfin och andra spårmetaboliter.4,5,9
Kodein utsöndras i urin som fritt och konjugerat kodein samt fritt och konjugerat morfin.4,6 Efter
kodeinadministrering kan totalt kodein elimineras snabbare än totalt morfin, med effekten att en
del urinpreparat från kodeinbrukare eventuellt endast visar förekomst av totalt morfin eller en
kvot för totalt morfin/totalt kodein som är större än ett.4,6,8 Heroin metaboliseras snabbt i helblod
till 6-monoacetylmorfin, som sedan hydrolyseras till konjugerat morfin i levern.4,7 Det utsöndras
huvudsakligen i urin som konjugerat morfin, men även i små mängder som fritt morfin och
6-monoacetylmorfin.4,7 Beroende på dosen och den analytiska metodens sensitivitet kan totalt morfin
spåras i urin i upp till 72 timmar efter den senaste administreringen av morfin, kodein eller heroin.4,6,8,9
CEDIA opiattest 2K använder rekombinant-DNA-teknik (USA-patent nr 4708929) för att
producera ett unikt homogent enzymimmunanalyssystem.10 Testet är baserat på bakterieenzymet
-galaktosidas, som genom genteknik har omvandlats till två inaktiva fragment. Dessa fragment
återförenas spontant och bildar fullt aktiva enzym som i testformatet klyver ett substrat och
genererar en färgförändring som kan mätas spektrofotometriskt.
I testet konkurrerar drog i provet med drog som förenats med ett inaktivt fragment av
-galaktosidas om antikroppsbindningsplatser. Om drogen finns i provet binder det till
antikroppen, och lämnar fragment från det inaktiva enzymet fria att bilda aktivt enzym. Om drogen
inte finns i provet binder antikroppen till den drog som konjugerats med det inaktiva fragmentet,
vilket förhindrar återförening av inaktiva galaktosidasfragment och därmed bildas inget aktivt
enzym. Mängden aktivt enzym som bildas och den resulterande absorbansförändringen är
proportionella mot mängden drog i provet.
Reagenser
1 EA-rekonstitutionsbuffert: Innehåller 13 µg/ml monoklonala antikroppar mot antiopiater, buffertsalter och konserveringsmedel.
1aEA-reagens: Innehåller 0,171 g/l enzymacceptor, buffertsalter, rengöringsmedel och
konserveringsmedel.
2ED-rekonstitutionsbuffert: Innehåller fosfatbuffert.
2aED-reagens: Innehåller 23,3 µg/l enzymdonator konjugerad med ett morfinderivat, 1,67 g/l
klorofenol röd- -D-galaktopyranosid, stabiliseringsmedel och konserveringsmedel.
Extra material: Alternativa streckkodsetiketter (endast katalognr. 100090 och 100099. Se
analysatorspecifikt tillämpningsblad för bruksanvisning). Tom analysatorflaska för överhällning
av EA/ED-lösning (katalognr. 100099). Tom analysatorflaska för överhällning av ED-lösning
(endast katalognr. 1815296).
Extra material som krävs (säljs separat):
CEDIA multidrogskalibrator, primära brytpunkter
CEDIA multidrogskontrollset
Försiktighetsanvisningar och varningar
Reagenserna innehåller natriumazid. Undvik kontakt med hud och slemhinnor. Spola berörda
områden med stora mängder vatten. Uppsök omedelbart läkare vid ögonkontakt eller om
produkten förtärts. Natriumazid kan reagera med bly- eller kopparrör och bilda potentiellt
explosiva metallazider. Vid kassering av sådan reagens spolas alltid med stora mängder vatten
så att inte azid ansamlas. Rengör exponerade metallytor med 10-procentig natriumhydroxid.
Förberedelse och förvaring av reagens
Se nedan för förberedelse av lösningar för Hitachi-analysatorer. För alla andra analysatorer
hänvisas till analysatorspecifikt tillämpningsblad. Ta ur kitet från kyld förvaring alldeles innan
lösningarna ska förberedas.
Förbered lösningarna i följande ordning så att eventuell kontamination minimeras:
R2 enzymdonorlösning: Anslut flaska 2a (ED-reagens) till flaska 2 (ED-rekonstitutionsbuffert)
med hjälp av en av de bifogade adaptrarna. Blanda genom att försiktigt vända upp och ned,
och se till att allt frystorkat material från flaska 2a förs över till flaska 2. Undvik skumbildning. Ta
loss flaska 2a och adaptern från flaska 2 och kassera. Förslut flaska 2 och låt stå ca 5 minuter
i rumstemperatur (15-25 °C). Blanda igen. Anteckna rekonstitutionsdatum på flasketiketten.
R1 enzymacceptorlösning: Anslut flaska 1a (EA-reagens) till flaska 1 (EA-rekonstitutionsbuffert)
med hjälp av en av de bifogade adaptrarna. Blanda genom att försiktigt vända upp och ned,
och se till att allt frystorkat material från flaska 1a förs över till flaska 1. Undvik skumbildning. Ta
loss flaska 1a och adaptern från flaska 1 och kassera. Förslut flaska 1 och låt stå ca 5 minuter
i rumstemperatur (15–25 °C). Blanda igen. Anteckna rekonstitutionsdatum på flasketiketten.
Katalognr. 100099 - Hitachi-analysator 717, 911, 912 eller 914: Överför de rekonstituerade
reagenserna till motsvarande tom 100 ml flaska R1 eller R2 som levererats med kitet. Hitachianalysator 917/modulärt analytiskt P-system: Använd de rekonstituerade reagenserna utan
överföring till flaska. Kassera de tomma 100 ml flaskorna.
Katalognr. 1815296 - Hitachi-analysator 747/modulärt analytiskt D-system: Använd medföljande
tratt för att föra över en del av R2-lösningen till lämpligen märkt medföljande tom flaska för
R2-lösning.
ANMÄRKNING 1: De komponenter som levereras i detta kit är avsedda att användas som en
odelad enhet. Blanda inte komponenter från olika partier.
ANMÄRKNING 2: Undvik korskontamination av reagenser genom att matcha reagenskork med
rätt reagensflaska. R2-lösningen ska vara orangegul till färgen. En mörkröd eller purpurröd färg
visar att reagensen har kontaminerats och måste kasseras.
ANMÄRKNING 3: R1- och R2-lösningarna måste hålla samma temperatur som analysatorns
förvaringsfack för reagens innan testet utförs. Se analysatorspecifikt tillämpningsblad för
ytterligare upplysningar.
ANMÄRKNING 4: Säkerställ EA-rekonstituerad reagenslösnings stabilitet genom att skydda den
från utdragen, kontinuerlig exponering för starkt ljus.
Förvara reagenser vid 2-8 °C. FÅR EJ FRYSAS. För oöppnade komponenters stabilitet hänvisas
till lådans eller flaskans etikett för uppgifter om utgångsdatum.
R1-lösning: 60 dagar kyld i analysator eller vid 2-8 °C.
R2-lösning: 60 dagar kyld i analysator eller vid 2-8 °C.
Insamling och hantering av preparat
Samla in urinprov i rena behållare av glas eller plast. Centrifugera preparat med hög turbiditet
före testning. Behandla humant urin som potentiellt infektiöst material. Ta ett nytt prov för
testning om utspädning av provet misstänks. Utspädning av urinprov kan påverka testresultaten.
I The Mandatory Guidelines for Federal Workplace Drug Testing Programs; Final Guidelines;
Notice rekommenderas det att preparat som inte genomgår ett första test inom 7 dagar från
ankomst till laboratoriet placeras i säkra kylenheter.11
Testförfarande
Kemiska analysatorer som kan upprätthålla en konstant temperatur, pipettera prover, blanda
reagenser, mäta enzymatiska hastigheter och tidsberäkna reaktionen exakt kan användas
för att göra detta test. Tillämpningsblad med specifika instrumentparametrar finns att få från
Microgenics, en del av Thermo Fisher Scientific.
Kvalitetskontroll och kalibrering12
Använd multidrogskalibratorn och primära brytpunkter för att analysera resultat. För Hitachianalysatorer ska vald brytpunktskalibrator placeras i lämpligt standardläge (S1) som användaren
valt. För alla andra analysatorer hänvisas till analysatorspecifikt tillämpningsblad.
Specificitet
Enligt god laboratoriepraxis bör kontroller köras varje dag patientprover testas och varje
gång kalibrering görs. Det rekommenderas att två nivåer av kontroller körs, en 25 % över vald
brytpunkt och den andra 25 % under vald brytpunkt. CEDIA multidrogskontrollset. Omkalibrera
testet om reagenserna ändrats eller om kontrollresultaten är utanför fastställda gränser.
Varje laboratorium ska fastställa sin egen kontrollfrekvens. Erhållna kontrollvärden ska falla
inom angivna gränser. Om någon tendens eller plötsliga skiftningar i värden upptäcks ska alla
driftparametrar ses över, eller kontakta Thermo Fisher Scientifics tekniska kundsupport för
ytterligare hjälp. Alla kvalitetskontrollkrav ska utföras i enlighet med lokala, regionala och/eller
nationella föreskrifter eller ackrediteringskrav.
När följande moderföreningar och metaboliter testades med CEDIA opiattest 2K gav de följande
resultat för korsreaktivitet:
Sammansättning
Resultat och förväntade värden
Brytpunktskalibrator 2 000 ng/ml används som referens vid särskiljandet mellan positiva och
negativa prover. Prover som ger ett svarsvärde lika med eller högre än kalibratorns svarsvärde
anses som positiva. Prover som ger ett svarsvärde lägre än kalibratorns svarsvärde anses som
negativa. Se analysatorspecifikt tillämpningsblad för ytterligare upplysningar.
Testad koncentration (ng/ml)
Morfin
2 000
100
Kodein
1 600
107
Diacetylmorfin
2 000
65
Dihydrokodein
2 000
89
Hydrokodon
2 000
77
Hydromorfon
Resultaten i detta test särskiljer endast positiva prover (> 2 000 ng/ml) från negativa prover.
Mängd spårad drog i ett positivt prov kan inte beräknas.
2 000
79
90 000
2,3
Morfin-3-glukuronid
2 000
64
Morfin-6-glukuronid
3 500
57
6-monoacetylmorfin
2 500
80
Imipramin
Begränsningar
1.Ett positivt testresultat visar endast förekomst av opiater; det varken visar eller mäter
intoxikation.
2.Vallmofrön kan innehålla opiater och förtäring av produkter som innehåller vallmofrön
kan orsaka ett positivt testresultat.13
3.Andra substanser och/eller faktorer som inte är listade kan interferera med testet och
orsaka felaktiga resultat (t.ex. tekniska eller procedurmässiga fel).
Petidin
Specifika prestandaegenskaper
Typiska prestandauppgifter erhållna från Hitachi-analysator 717 visas nedan.14 De resultat som
ditt laboratorium erhåller kan avvika från dessa uppgifter.
% korsreaktivitet
1 000 000
0,2
Oxymorfon
100 000
2,4
Oxykodon
64 000
3,9
Strukturellt orelaterade sammansättningar testades med CEDIA opiattest 2K och gav ett negativt
svar när de testades vid koncentrationerna nedan.
Precision
Studier över uppmätt precision, med färdiga reagenser, kalibratorer och kontroller gav följande
resultat i mA/min med en Hitachi-analysator 717.
Sammansättning
Paracetamol
500 000
Levotyroxin
Precision inom körning (n = 21)
Acetylsalicylsyra
500 000
Metadon
500 000
Prov
ng/ml
Sammansättning
ng/ml
50 000
Medelvärde
Standardavvikelse
(SD)
% variations­
koefficient (CV)
Amoxicillin
100 000
Metamfetamin
500 000
247,6
3,01
1,2
Amfetamin
500 000
Nifedipin
500 000
500 000
Fencyklidin
500 000
Låg kontroll
Brytpunktskalibrator
301,6
3,37
1,1
Bensoylekgonin
Hög kontroll
362,2
4,73
1,3
Captopril
500 000
Fenobarbital
500 000
Klordiazepoxid
100 000
Propoxyfen
500 000
Cimetidin
500 000
Ranitidin
500 000
Diazepam
500 000
Salicylursyra
500 000
Digoxin
100 000
Sekobarbital
500 000
Enalapril
500 000
11-nor-∆ -THC-COOH
Fluoxetin
500 000
Verapamil
Ibuprofen
500 000
Precision mellan dag (n = 61)
Medelvärde
Standard­avvikelse
(SD)
% variations­
koefficient (CV)
Låg kontroll
247,9
10,62
4,3
Brytpunktskalibrator
301,6
13,09
4,3
Hög kontroll
365,1
15,47
4,2
Prov
Exakthet
Tvåhundra kliniska urinprov och 20 prov spetsade med morfin till inom ± 25 % av 2 000 ng/mltestets brytpunkt testades med CEDIA opiattest 2K (brytpunkt 2 000 ng/ml) med Hitachi 717 med
CEDIA opiattest (300 ng/ml) som referens. Resultaten blev följande:
CEDIA
Opiattest
9
10 000
500 000
Ingen interferens observerades från följande substanser, som lagts till de normala endogena
koncentrationerna funna i urin, när de testades med CEDIA opiattest 2K:
CEDIA
Opiattest 2K
+
-
Substans
Aceton
< 1,0 g/dl
Hemoglobin
< 0,3 g/dl
+
84
35*
Askorbinsyra
< 1,5 g/dl
Humant serumalbumin
< 0,5 g/dl
-
0
101
Kreatinin
< 0,5 g/dl
Oxalsyra
Etanol
< 1,0 g/dl
Riboflavin
* De 35 proverna testades med GC/MS och befanns innehålla 172-1 899 ng/ml morfin.
Galaktos
-globulin
Glukos
Koncentration
< 10 mg/dl
< 0,5 g/dl
Substans
Koncentration
< 0,1 g/dl
< 7,5 mg/dl
Natriumklorid
< 6,0 g/dl
Urea
< 5,0 g/dl
< 3,0 g/dl
Sensitivitet
Testets sensitivitet, eller detektionsvärde (LOD), som representerar den lägsta opiatkoncentration som kan särskiljas från den negativa kalibratorn, är 60,8 ng/ml.
2
Referenser
1. Mandatory guidelines for federal workplace drug testing programs. Federal Register.
1997; 62 (189):51118-51120.
2. Hawks RL. Analytical methodology. In: Hawks RL, Chiang CN, eds. Urine Testing for Drugs
of Abuse. NIDA Research Monograph. 1986; 73 :30-41.
3. Balant LP, Balant-Gorgia AE. Opium and its derivatives. Clin Ther. 1992; 14 :846-848.
4. Baselt RC, Cravey RH. Disposition of Toxic Drugs and Chemicals In Man. 4th ed. Foster
City, Calif: Chemical Toxicology Institute; 1995.
5.Glare PA, Walsh TD. Clinical pharmacokinetics of morphine. Ther Drug Monit. 1991;
13 :1-23.
6. Cone EJ, Welch P, Paul BD, Mitchell JM. Forensic drug testing for opiates, III. Urinary
excretion rates of morphine and codeine following codeine administration. J Anal Toxicol.
1991; 15 :161-166.
7. Cone EJ, Welch P, Mitchell JM, Paul BD. Forensic drug testing for opiates, I. Detection
of 6-acetylmorphine in urine as an indicator of recent heroin exposure; drug and assay
considerations and detection times. J Anal Toxicol. 1991; 15 :1-7.
8. Mitchell JM, Paul BD, Welch P, Cone EJ. Forensic drug testing for opiates, II. Metabolism
and excretion rate of morphine in humans after morphine administration. J Anal Toxicol.
1991; 15 :49-53.
9. Hasselström J, Säwe J. Morphine pharmacokinetics and metabolism in humans:
Enterohepatic cycling and relative contribution of metabolites to active opioid
concentrations. Clin Pharmacokinet. 1993; 24 :344-354.
10.Henderson DR, Friedman SB, Harris JD, et al. CEDIA™, a new homogeneous immunoassay
system. Clin Chem. 1986; 32 :1637-1641.
11.Notice of Mandatory Guidelines for Federal Workplace Drug Testing Program: Final
guidelines. Federal Register. 1994; 110 (June 9):11983. (Revised Guidelines expected 2002).
12.Data on traceability are on file at Microgenics Corporation, a part of Thermo Fisher
Scientific.
13.Selavka CM. Poppy seed ingestion as a contributing factor to opiate-positive urinalysis
results: The Pacific perspective. J Forensic Sci. 1991; 36 (3):689-696.
14.Data on file at Microgenics Corporation, a part of Thermo Fisher Scientific.
Microgenics Corporation
46360 Fremont Blvd.
Fremont, CA 94538-6406 USA
Kundtjänst och
teknisk support i USA:
1-800-232-3342
För uppdateringar av bipacksedel gå till:
www.thermoscientific.com
Övriga länder:
Kontakta din lokala Thermo Fisher Scientific-representant.
CEDIA är ett registrerat varumärke som tillhör Roche Diagnostics.
10006525-1
2011 01
3
Microgenics GmbH
Spitalhofstrasse 94
D-94032 Passau Tyskland
Tel: +49 (0) 851-88 68 90
Fax: +49 (0) 851-88 68 910