CEDIA

®

Carbamazepine II-analys

För in vitro-diagnostisk användning

100006 (17 x 17 mL-kit)

Avsedd användning

CEDIA ® Carbamazepine II-analysen är en in vitro-diagnostisk medicinteknisk produkt avsedd för kvantifiering av karbamazepin i humant serum eller plasma.

Sammanfattning och förklaring av testet

Karbamazepin är ett antikonvulsivt läkemedel som i synnerhet används vid behandling av trigeminusneuralgi, 1 alla former av partiell epilepsi, generaliserade tonisk-kloniska kramper och enkla och komplexa partiella kramper.

dock endast en måttlig korrelation till dosen, 2–4 5,6 Effektiv serumkoncentration av karbamazepin är  mycket viktigt för anfallskontroll. Koncentrationerna av karbamazepin i serum uppvisar beroende på individuella skillnader i absorption, metabolism och clearance. Dessutom kan samtidig administrering av andra antiepileptiska medel påtagligt höja serumnivåerna av karbamazepin.

6

Försiktighetsåtgärder och varningar

Reagensen innehåller natriumazid. Undvik kontakt med hud och slemhinnor. Skölj exponerade områden med rikliga mängder vatten. Kontakta läkare omedelbart vid kontakt med ögonen eller vid förtäring. Natriumazid kan reagera med rörledningar som innehåller bly eller koppar och bilda potentiellt explosiva metallazider. Vid kassering av sådana reagens ska du alltid spola med stora mängder vatten för att förhindra ansamling av azider. Rengör exponerade metallytor med 10-procentig natriumhydroxid.

Beredning och förvaring av reagens

Ta ut kitet ur kylskåpet precis innan du bereder lösningarna.

Toxicitet av karbamazepin associerad med behandling kan vara dosrelaterad, men behöver inte vara det.

2-4 Symtomen yrsel, svindel och dubbelseende från centrala nervsystemet är dock dosrelaterade vid kronisk behandling. Tillsammans med övrig klinisk information är övervakning av karbamazepinnivåerna ett effektivt verktyg för läkare när det gäller att justera dosen och uppnå optimal terapeutisk effekt samtidigt som både subterapeutiska och toxiska läkemedelsnivåer undviks.

I CEDIA Carbamazepine II-analysen används rekombinant DNA-teknik (USA-patent nr 4708929) för att producera ett unikt homogent enzymimmunanalyssystem.

7 Analysen är baserad på bakterieenzymet -galaktosidas, som genom genteknik har omvandlats till två inaktiva fragment. Dessa fragment återförenas spontant och bildar fullt aktiva enzym som i analysformatet klyver ett substrat och genererar en färgförändring som kan mätas spektrofotometriskt.

Vid analysen konkurrerar analyt i provet med analyt som konjugerats till ett inaktivt fragment av -galaktosidas om antikroppsbindningsplatser. Om analyt finns i provet binder det till antikropparna och lämnar de inaktiva enzymfragmenten fria att bilda aktivt enzym. Om analyt inte finns i provet binder antikropparna till analytet som konjugerats till det inaktiva fragmentet, vilket förhindrar återförening av inaktiva -galaktosidasfragment och därmed bildas inget aktivt enzym. Mängden aktivt enzym som bildas och den resulterande absorbansförändringen är direkt proportionell mot mängden läkemedel i provet.

Reagens

1 EA-rekonstitutionsbuffert: 1a EA-reagens:

konserveringsmedel.

Innehåller 3-(N-morfolin) propansulfonsyra, 49 mg/L monoklonala anti-karbamazepin-antikroppar, stabiliserings- och konserveringsmedel.

Innehåller 0,171 g/L enzymacceptor, stabiliseringsmedel, buffertsalter och

2 ED-rekonstitutionsbuffert:

Innehåller 2-(N-morfolin) etansulfonsyra och konserveringsmedel.

2a ED-reagens:

Innehåller 22,1 µg/L enzymdonator som konjugerats till karbamazepin, 1,64  g/L klorofenol röd- -D-galaktopyranosid, buffertsalter, stabiliserings- och konserveringsmedel.

Ytterligare material som krävs (säljs separat):

100007

Kitbeskrivning

CEDIA Core TDM Multi-Cal Kommersiella kontroller – kontakta den tekniska supporten för rekommendationer Bered lösningarna i följande ordning för att minimera risken för kontaminering.

R2-enzymdonatorlösning:

före användning.

Anslut flaska 2a (ED-reagens) till flaska 2 (ED-rekonstitutionsbuffert) med en av de medföljande adaptrarna. Blanda genom att försiktigt vända upp och ned, samtidigt som du kontrollerar att allt frystorkat material från flaska 2a överförs till flaska 2. Undvik skumbildning. Ta loss flaska 2a och adaptern från flaska 2 och kassera. Förslut flaska 2 och låt stå ungefär 5 minuter i 15–25 °C. Blanda igen. Anteckna rekonstitutionsdatumet på flaskans etikett. Placera flaskan direkt i analysatorns reagensfack eller i kylskåp och låt stå i 30 minuter

R1-enzymacceptorlösning:

Anslut flaska 1a (EA-reagens) till flaska 1 (EA-rekonstitutionsbuffert) med en av de medföljande adaptrarna. Blanda genom att försiktigt vända upp och ned, samtidigt som du kontrollerar att allt frystorkat material från flaska 1a överförs till flaska 1. Undvik skumbildning. Ta loss flaska 1a och adaptern från flaska 1 och kassera. Förslut flaska 1 och låt stå ungefär 5 minuter i 15–25 °C. Blanda igen. Anteckna rekonstitutionsdatumet på flaskans etikett. Placera flaskan direkt i analysatorns reagensfack eller i kylskåp och låt stå i 30 minuter före användning.

ANMÄRKNING 1: ANMÄRKNING 2: ANMÄRKNING 4:

Komponenterna i detta kit är avsedda att användas som en integrerad enhet. Blanda inte komponenter från olika partier.

ANMÄRKNING 3:

Undvik korskontaminering av reagens genom att matcha rätt reagenslock med rätt reagensflaska. R2-lösningen (enzymdonator) ska ha gulorange färg. En röd eller lilaröd färg indikerar att reagenset har kontaminerats och måste kasseras.

Lösningarna R1 och R2 måste ha samma temperatur som analysatorns förvaringsfack för reagens innan analysen genomförs. Ytterligare information finns i det analysatorspecifika informationsbladet.

Säkerställ den rekonstituerade EA-lösningens stabilitet genom att skydda den mot långvarig kontinuerlig exponering för starkt ljus.

Förvara reagens i 2–8 °C.

FÅR EJ FRYSAS.

Se utgångsdatum på kartongens eller flaskans etiketter för information om stabilitet för oöppnade komponenter.

R1-lösning:

60 dagar kyld i analysator eller i 2–8 °C.

R2-lösning:

60 dagar kyld i analysator eller i 2–8 °C.

Insamling och hantering av prover

Serum- eller plasmaprover (Na- eller Li-heparin; Na-EDTA) är lämpliga för användning vid CEDIA Carbamazepine II-analysen. Vissa separationsrör med gel kanske inte är lämpliga för användning i kontrollanalyser av terapeutiska läkemedel. Se informationen från rörtillverkaren. Prover kan förvaras 1 vecka i 2–8 °C eller 4 veckor i -20 °C. Undvik upprepad nedfrysning och upptining. Centrifugera prover med utfällning innan du genomför analysen. Om provtagningen utförs konsekvent vid samma tidsintervall efter administrering av den senaste läkemedelsdosen ökar säkerheten och effektiviteten hos det antikonvulsiva läkemedlet.

Analysprocedur

Kemiska analysinstrument som kan hålla en konstant temperatur, pipettera prover, blanda reagens, mäta enzymatiska hastigheter och tidsberäkna reaktionen exakt kan användas för att utföra denna analys. Informationsblad med specifika instrumentparametrar kan erhållas från Microgenics, en del av Thermo Fisher Scientific.

Kvalitetskontroll och kalibrering

• efter byte av reagensflaska • efter byte av reagensparti

8

Tvåpunktskalibrering rekommenderas • vid behov efter kvalitetskontrollprocedurer.

Enligt god laboratoriepraxis bör kvalitetskontroller testas på minst två nivåer (låga och höga brytpunkter) varje dag som patientprover analyseras och varje gång som kalibrering utförs. Övervaka kontrollvärdena för att upptäcka eventuella trender eller förändringar. Om en trend eller förändring upptäcks eller om kontrollen inte återhämtas inom angivet intervall ska samtliga användningsparametrar granskas. Kontakta den tekniska supporten för ytterligare assistans och rekommendationer om lämpligt kontrollmaterial. Alla krav på kvalitetskontroll ska följas i enlighet med lokala, regionala och/eller nationella föreskrifter eller myndighetskrav.

Resultat och förväntade värden

CEDIA Carbamazepine II-analysen är avsedd för att kvantifiera patientprover mellan 0,5 µg/mL och värdet för Core TDM Multi-Cal hög kalibrator (cirka 20 µg/mL). Prover med värden under 0,5 µg/mL ska rapporteras som < 0,5 µg/mL. Prover som kvantifieras till ett högre värde än 20 µg/mL kan rapporteras som > 20 µg/mL eller spädas med en del prov och en del Core TDM Multi-Cal låg kalibrator och analyseras igen. Det värde som erhålls efter den nya analysen ska härledas på följande sätt: Faktiskt värde = (2 x utspätt värde) – koncentration för Core TDM Multi-Cal låg kalibrator Använd följande konverteringsfaktor för att konvertera µg/mL till µmol/L: µg/mL x 4,23 = µmol/L µmol/L x 0,236 = µg/mL Den terapeutiska effektiviteten och de toxiska effekterna har ett nära samband med läkemedelskoncentrationen i serum. De effektiva serumkoncentrationerna av karbamazepin för anfallskontroll har rapporterats som 8–12 µg/mL föreslagits.

5,10–13 4,9 för vuxna som behandlas med karbamazepin som det enda antiepileptiska medlet. Andra terapeutiska intervall för karbamazepin har också Dessutom kan lägre koncentrationer ge effektiv terapeutisk respons när andra antikonvulsiva medel används i kombination med karbamazepin. De terapeutiska intervallen anges endast som riktlinje för tolkning tillsammans med andra kliniska symtom, och ska inte betraktas som den enda indikatorn för dosjustering.

Begränsningar

1. CEDIA Carbamazepine II-analysens prestanda har inte fastställts med andra kroppsvätskor än humant serum och plasma.

2. Förekomsten av patienter som har antikroppar mot E. coli -galaktosidas är extremt låg. Vissa prover som innehåller sådana antikroppar kan emellertid ge felaktigt höga resultat som inte stämmer överens med den kliniska profilen. Kontakta den tekniska supporten för hjälp om detta inträffar.

3. Denna analys har validerats på analysatorer där integrerad celltvätt används. Kontakta den lokala representanten om din analysator inte har integrerad celltvätt.

Specifika prestandaegenskaper

Typiska prestandadata erhållna med Hitachi 911-analysatorn visas nedan.

erhållits i ditt laboratorium kan skilja sig från dessa data.

14 De resultat som

Precision

Studier av uppmätt precision, där poolat humant serum och kontrollserum användes, gav följande resultat när riktlinjerna för NCCLS-modifierat replikationsexperiment användes.

Precision inom körning Total precision

N x ¯ (μg/mL) SD (μg/mL) CV i % 126 4,2 0,06 1,5 126 10,6 0,08 0,8 126 16,8 0,12 0,7 126 4,2 0,15 3,5 126 10,6 0,21 2,0 126 16,8 0,29 1,7

Linearitet

Ett högt prov späddes med Core TDM Multi-Cal låg kalibrator. Procentandelen återhämtning fastställdes sedan genom division av det analyserade värdet med det förväntade värdet.

% högt prov

100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0

Förväntat värde (μg/mL)

21,42 19,29 17,15 15,01 12,88 10,74 8,61 6,47 4,33 2,20 0,06

Analyserat värde (μg/mL)

20,99 19,01 17,00 14,99 12,94 10,66 8,68 6,47 4,29 2,21 0,20

Återhämtning i %

98,5 99,1 99,9 100,5 99,3 100,8 100,0 99,1 100,5 -

Återhämtning

Karbamazepin i form av ett högt (spikat) patientprov tillsattes till ett lågt patientprov. Procentandelen återhämtning fastställdes sedan genom division av det analyserade värdet med det förväntade värdet.

% förväntat högt prov Analyserat värde (μg/mL) Värde i % (μg/mL) Återhämtning

100 21,74 21,03 90 80 19,58 17,41 19,21 17,13 98,1 98,4 70 60 50 40 30 15,25 13,09 10,93 8,77 6,61 14,92 13,34 11,03 8,91 6,57 97,8 101,9 100,9 101,6 99,4 20 10 0 4,44 2,28 0,12 4,46 2,15 0,13 100,5 94,3 -

Metodjämförelse

En jämförelse mellan CEDIA Carbamazepine II-analysen (y) och en kommersiellt tillgänglig immunokemisk fluorescenspolarisationsanalys (x):

Demings

y = 1,00x + 0,87 r = 0,986 Sy.x = 0,44

Linjär regression

y = 0,98x + 0,99 r = 0,986 Sy.x = 0,62 Antal mätta prover: 102 Provkoncentrationerna låg mellan 1,9 och 19,3 µg/mL.

Specificitet

Följande föreningar har testats för korsreaktivitet med CEDIA Carbamazepine II-analysen.

Förening

Amitriptylin

Testad koncentration (μg/mL)

100

Korsreaktivitet i %

18,6 Karbamazepin-10, 11-epoxid Diazepam Imipramin Metsuximid 250 250 200 1 000 7,4 4,8 5,6 1,0 Nortriptylin Fenotiazin Probenecid 50 200 500 17,2 8,6 2,0 Korsreaktiviteten är mindre än 1,0 % för följande föreningar:

Förening

2-fenyl-2-etylmalonamid

Förening

5-(p-hydroxifenyl)-fenylhydantoin Amobarbital Klorazepat Klordiazepoxid Etosuximid Etotoin Glutetimid p-hydroxyfenobarbital Mefenytoin Fenytoin Primidon Prometazin Sekobarbital Valproinsyra 2

Ingen interferens observerades i CEDIA Carbamazepine II-analysen:

Substans Koncentration Substans

Bilirubin Hemoglobin < 60 mg/dL < 1,0 g/dL Totalprotein Triglycerid

Koncentration

< 12 g/dL < 1 g/dL Reumatoid faktor < 180 IE/mL

Sensitivitet

Lägsta påvisbara koncentration av CEDIA Carbamazepine II-analysen är 0,5 µg/mL (2,1 µmol/L). Det här värdet har fastställts genom beräkning av den koncentration av karbamazepin som skulle ge en respons lika med två standardavvikelser ovanför responsen för Core TDM Multi Cal låg kalibrator.

Referenser

1. Blom, S.: Trigeminal neuralgia: its treatment with a new anticonvulsant drug (G-32883) Lancet, Is. 1962; 839-840.

2. Eadie, M.J., Tyler, J.H. Anticonvulsant Therapy: Pharmacological Basis and Practice. In: Churchhill Livingstone, Edinburgh. Great Britain, 1974: Chapter 7.

3. Penry, J. K., Newmark, M.E. The use of antiepileptic drugs. Annals of Internal Medicine 1979; 90: 207-218.

4. Scheuer, M.L., Pedley, T.A. The evaluation and treatment of seizures. N. Engl. J. Med. 1990; 322 (21):1468-1474.

5. Larkin, J.G., Herrick, A.L., McGuire, G.M., Percy-Robb, I.W., Brodie, M.J. Antiepileptic Drug Monitoring at the Epilepsy Clinic: A Prospective Evaluation. Epilepsia 1991; 32: 89-95.

6. Altafullah, I., Talwar, D., Loewenson, R., Olson, K., Lockman, L.A. Factors Influencing Serum Levels of Carbamazepine and Carbamazepine-10, 11-epoxide in children. Epilepsy 1989; Res. 4: 72-80.

7. Henderson, D.R., Friedman, S.F., Harris, J.D., Manning, W.B., Zoccoli, M.A. CEDIA, A New Homogeneous Immunoassay System. Clin. Chem. 1986; 32(9): 1637-1641.

8. Data om spårbarhet finns på fil hos Microgenics Corporation, en del av Thermo Fisher Scientific.

9. Troupin, A., Ojemann, L.M., Halpern, L., Dodrill, C., Wikus, R., Friel, P. Carbamazepine- a double blind comparison with phenytoin. Neurology 1977; 27: 511-519.

10. Strandjord, R.E., Johannessen, S.I. Single-drug therapy with carbamazepine in patients with epilepsy: serum levels and clinical effects. Epilepsia 1980; 21: 655-662.

11. Simonsen, H., Olsen, P.Z., Khul, V., Lund, M., Wendelboe, J. A comparative controlled study between carbamazepine and diphenylhydantoin in psychomotor epilepsy. Epilepsia 1976; 17: 169-176.

12. Shorvon, S.D., Chadwick, D., Galbraith, A., W., Reynolds, E.H. One drug for epilepsy. Br. Med. J. 1978;1:474-476.

13. MacKichan, J.J., Kutt, H. Carbamazepine: Therapeutic use and serum concentration monitoring. In: Taylor, W.J., Finn, A.L. eds. Individualizing Drug Therapy: Practical Applications of Drug Monitoring. New York: Gross, Townsend, Frank, Inc., 1981:1-25.

14. Data på fil hos Microgenics Corporation, en del av Thermo Fisher Scientific.

Microgenics Corporation 46360 Fremont Blvd.

Fremont, CA 94538-6406 USA Kundsupport och teknisk support i USA: 1-800-232-3342 Uppdateringar av bipacksedeln finns på: www.thermoscientific.com

Övriga länder:

Kontakta din lokala representant för Thermo Fisher Scientific.

CEDIA är ett registrerat varumärke som tillhör Roche Diagnostics. Microgenics GmbH Spitalhofstrasse 94 D-94032 Passau Germany Tel: +49 (0) 851-88 68 90 Fax: +49 (0) 851-88 68 910 3 10003606-3 2011 01