Transcript pobierz plik PPT

Wykrywanie substancji organicznych w
produktach spożywczych i przemysłowych




Wykrywanie białek
Wykrywanie skrobi
Wykrywanie glukozy
Badanymi materiałami są :różne gatunki mąki,
owoce i warzywa, śmietana, mleko, kremy i
maseczki kosmetyczne oraz suplementy diety
stosowane przy wspomaganiu odbudowy
chrząstki stawowej.
Białka zbudowane są z
aminokwasów
Cząsteczki aminokwasów zawierają dwie
grupy funkcyjne: grupę aminową -NH2 i grupę
karboksylową -COOH.
Wiązanie peptydowe
Aminokwasy egzogenne
Reakcja biuretowa




Rozcieńczyć roztwór biała solą fizjologiczną
Do 1ml roztworu białka dodajemy 1 ml roztworu
10% NaOH i parę kropli roztworu 0,5% roztworu
CuSO4. Pojawia się barwa fioletowa.
Próba kontrolna 1ml soli fizjologicznej + 1ml 10%
NaOH + kilka kropli CuSO4 .
Reakcja biuretowa pozwala wykryć dopiero
trójpeptydy. Nie ma pozytywnej reakcji z
aminokwasami wolnymi i dwupeptydami. (Dodatnią
reakcję biuretową dają także produkty hydrolizy
białek i dwuamidy)
Reakcja biuretowa – wykrywanie
białka
Jasny :kontrola i roztwór glukozy, ciemnoniebieski roztwór białka
Do wykrywania białek służy także reakcja
ksantoproteinowa
ze stężonym kwasem azotowym HNO3
Obserwujemy pojawienie się żółtego zabarwienia zmieniającego się na
pomarańczowe po wpływem działania amoniaku. Reakcja ta polega na
nitrowaniu pierścieni aromatycznych występujących w łańcuchach
bocznych niektórych aminokwasów
Skrobia - budowa
Skrobia - wykrywanie

Skrobię wykrywamy płynem
Lugola lub jodyną. Są to
roztwory zawierające JOD. Z
jodem reaguje amyloza dając
niebieskie zabarwienie a
amylopektyna –fioletowoczerwone. Aby zaszła reakcja z
jodem skrobia musi mieć kształt
helisy. Jeżeli próbkę ogrzejemy
zabarwienie znika ponieważ
rozkręca się helisa
Zegar skrobiowy



Do wody dodajemy kilka kropel jodyny i
trochę octu. Kolor ma przypominać herbatę.
Przygotowujemy roztwór witaminy C i powoli
dolewamy do roztworu jodyny aż do jej
odbarwienia. (zachodzi reakcja redoks i jod się
odbarwia)
Dodajemy kleik skrobiowy (1:1) mieszamy i
dodajemy pewną ilość H2O2 . Obserwujemy
zmiany .
Wybarwione ziarna skrobi obserwowane w
mikroskopie
Zdjęcie (z mikroskopu) wykonane na
zajęciach: barwienie ziaren skrobi płynem
Lugola
Glukoza
Wykrywanie glukozy
Należy przygotować odczynnik:
Płyn Fehlinga I wodny roztwór siarczanu
miedziowego
Płyn Fehlinga II wodny roztwór winianu sodowo
- potasowego (sól Seignette'a) i dodajemy do
niego NaOH.

Wykrywanie glukozy


Zmieszać odczynniki Fehlinga w stosunku 1:1 i
dodać roztwór glukozy 1% ( 1ml +1ml) Kontrola 1ml
wody.
Próbkę ogrzać. Wytrąca się czerwony osad tlenku
miedzi Cu2O. Reakcję redukcji miedzi prowadzą ją
wszystkie cukry mające zdolność do redukcji czyli
mające wolną grupę aldehydową lub ketonową
Obecność białka w próbce może maskować obecność
cukru i reakcja nie zachodzi
Ogrzewanie próbek na zajęciach
Próbki po ogrzaniu – próba Fehlinga
wykrywająca glukozę
Niebieska – kontrola, czerwona glukoza i sok z winogron
Próbki badane (identyfikujemy 4
roztwory o nieznanym składzie)



Dostajemy 4 probówki z bezbarwną cieczą.
Wiemy , że w jednej z nich znajduje się glukoza,
w innej białko, w kolejnych woda i sól
fizjologiczna.
Planujemy doświadczenia z tymi roztworami tak
aby odróżnić jaką substancję mamy w każdej
probówce. Uwzględniamy próby kontrolne i
badane. Zapisujemy wyniki. Wyciągamy
wnioski.
Jak możemy biologicznie odróżnić w której
probówce mamy sól fizjologiczną a w której
wodę destylowaną?