Transcript 8장 결합조직 염색3 (7Mbyte)

3. 탄력섬유 염색
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탄력성이 강한 섬유-황색섬유
병리조직학적 의의
1) 혈관질환의 진단-동맥경화증, 고혈압성 혈관질환, 동맥염
2) 콩팥생검조직의 진단-콩팥경화증, 콩팥이식거부
3) 비정상 심판막의 진단-섬유증식, 석회화, 감염
염색법-운나 올세인(Unna orcein)
바이게르트 레솔신푹신(weigert resorcin fuchsin)염색
베르헤프 철헤마톡실린(verhoeff iron hematoxylin) 염색
고모리 알데하이드푹신(Gomori aldehyde fuchsin)염색
올세인(orcein)염색
콩팥 내의 소동맥 내막의 갈색의 탄력섬유층이 충첩되어 있다
Verhoeff`s Elastic fiber
1. 원리 : hematoxylin + ferric chloride + iodine 복합체에 강한 친화력
2. 시약 :
1) Verhoeff solution – 5% alcoholic hematoxylin (주염색액)
10% ferric chloride(매염제 ) + Iodine 용액
2) 2% ferric chloride – 탈색제(퇴행성 염색)
3) 5% sod. Thiosulfate - 안정제
4) Van Gieson – 대조염색
3. 염색결과
1) 탄력섬유 (흑색) 2) 핵 (흑색), 3) 교원섬유 (적색), 4) 세포질 및 근섬유 (노란색
4. 유용성
동맥경화 시 탄력섬유가 석회화되거나 소실되면 조직이 탄력성 없어짐
탄력섬유 (흑색), 핵 (흑색), 교원섬유 (적색), 세포질 및 근섬유 (노란색)
Elastic fiber of arteriole
Elastic fiber of skin
베르헤프 철헤마톡실린
(Verhoeff iron hematoxylin)염색
코주변 피부의 결절성 콜로이드변성(nodular colloid degeneration).
A. 표피층이 얇아져 있고 진피층의 아교섬유가 불규칙한 배열을 하고 있다(HE염색).
B. 진피층 내 이상한 형태의 흑색의 탄력섬유가 증가되어 있다.
바이게르트 레솔신푹신(Weigert resorcin fuchsin)염색
하대정맥. 혈관내막에 단일 층의 탄력섬유 띠가 배열되어 있고,
외막에는 여러 겹의 탄력섬유가 중첩되어 있다.
탄력섬유가 흑갈색으로 염색된다
베르헤프 철헤마톡실린(Verhoeff iron hematoxylin)염색
A. 콩팥 내의 소동맥 탄력섬유
B. 피부 진피 내의 탄력섬유. 소동맥 내벽의 탄력섬유는 스프링 형태를 보이고
진피 내 흑색의 탄력섬유는 물결모양으로 나타난다.
고모리알데히드푹신
(Gomori aldehyde fuchsin)염색
괴사성 심근. A. 괴사성 심방심근(작은 화살표) 사이에 적혈구, 대식세포 그리고
아교섬유가 끼어 있다.
B. 붕괴된 속탄력막(큰 화살표)과 새로 형성된 혈관 통로(작은 화살표).
C. 탄력판이 하부 괴사성 심근 위에 수축되어 있다(큰 화살표). 괴사성 심근은 아
교섬유로 대치되어 있어 속공간이 좁아져 있다. 막대표시 A: 300 um B와 C는
400 um
빅토리아블루(victoria blue)염색
소동맥 내막의 탄력섬유 손상이 보인다
신선한 상태의 조직에서는 노란색을 띠며, 탄력형 동맥벽,폐포벽,각종 인대 등에
풍부하게 존재함.
주염색액
성
분
Gomori’s
aldehyde-fuchsin
Unna’s
Orcein
Verhoeff
-van Gieson
Weigert’s
resorcin-fuchsin
Hematoxylin
Basic fuchsin
Basic fuchsin
Orcein
Ferric chloride
Resorcin
HCl
HCl
Iodine
Ferric chloride
Paraldehyde
HCl
분 별
Ferric chloride
정 착
Sod.thiosulfate
대조염색
염색결과
Van Gieson
95% alcohol
Van Gieson
70% alcohol
70% alcohol
Light green
탄력섬유-흑색
탄력섬유-흑청색
탄력섬유-적색
핵-----흑색
핵-----흑색
배경----녹색
교원섬유-적색
교원섬유-적색
근섬유,세포질-황색
근섬유,세포질-황색
탄력섬유-암갈색
결합조직의 염색 (Stain of Connective tissue)
III. 탄력섬유 염색법의 종류와 원리
종류
원리
Unna Orcein
Orcein 염료와 봉입체의 흡착성을 이용한 염색
Weigert resorcin
fuchsin
염기성푹신-철-레졸신이 레이크를 만든 다음 레졸신의 페놀기가 탄력
섬유와 소수결합을 형성하는 것을 가정
Verhoeff iron
hematoxylin
탄력섬유의 hema + ferric chloride + iodine 레이크에 강한 친화력을
갖는 성질이용한 전형적인 퇴행성염색
Gomori
aldehyde fucshin
조직절편 내의 시스틴과 같이 황산기를 함유한 성분과 알데하이드푹신
이 화학적으로 결합
결합조직의 염색 (Stain of Connective tissue)
1. Australia antigen (Orcein)(HBs-Ag염색법)
1) 원리 : Orcein 염료는 봉입체와 흡착성 염색법에 의하여 염색된다.
2) 염색액제조
(1) 3% sulfuric acid : Sulfuric acid 3ml + D.W 97ml
(2) 5% Pot.permanganate : Pot.permanganate 0.5g + D.W 10ml
(3) 산화제 : 5% Pot.permanganate 9.5ml + 3% sulfuric acid 5.0ml 두용액을 섞은
다음 100ml 되게 D.W로 채운다.
(4) 2% Oxalic acid : Oxalic acid 2g + D.W 100ml
(5) Orcein solution
70% ethanol 100ml + Orcein 1g + Conc. HCl 1ml pH가 1-2 사이라야 한다.
결합조직의 염색 (Stain of Connective tissue)
3) 염색과정
(1) 탈파라핀, 함수, 증류수
(2) 산화액으로 10분간 산화시킨다.
(3) D.W로 씻고 2% Oxalic acid 에 2-3분간 두면 환원된다.
(4) 수돗물로 10분간 수세한다.
(5) Orcein 용액을 Coplin jar 에 filter 하고 이 용액에서 30분-1시간 염색한다.
현미경으로 검경해본다.
(6) D.W Wash 후 1% Hcl alcohol 용액으로 5-10회 dip 감별한 후 수돗물에 5분간 수세
(7) 탈수, 투명, 봉입
4) 염색결과
Cytoplasm of the hepatocytes : 진한갈색
탄력섬유 : 갈색
결합조직의 염색 (Stain of Connective tissue)
Orcein : 탄력섬유
결합조직의 염색 (Stain of Connective tissue)
2. Verhoeff elastic fiber
1) 원리 : 탄력섬유의 hema + ferric chloride + iodine 복합체에 강한 친화력을 갖는
성질이용
2) 염색액제조
(1) Verhoeff sol : 5% alcoholic hema 2.5ml + 10% ferric chloride 1ml + Verhoeff
iodine 1ml
(2) 2% ferric chloride : 10% ferric chloride 9ml + D.W 36ml
(3) 5% sod. thiosulfate
(4) van Gieson
(5) Verhoeff iodine : pot. Iodide 4g + iodine 2g + D.W 100ml
증류수 4ml에 pot. iodide를 먼저 용해 시키고 다음에 iodine을 첨가하여 완전히 용해
시킨다. 완전히 용해되면 나머지 증류수를 넣고 혼합하여 사용한다.
결합조직의 염색 (Stain of Connective tissue)
3) 염색과정
(1) 탈 파라핀, 함수과정을 거쳐 수세
(2) Verhoeff용액으로 20분간 실온에서 염색
(3) 수세 후 2% ferric chloride(탈색제)로 분별한다.
(4) 수세 후 5% sod. thiosulfate로 1분간 처리
(5) 5분간 수세 후 van Gieson(대조염색)용액으로 5분간 염색
(6) 수세없이 탈수, 투명, 봉입
4) 염색결과
탄력섬유 : 흑색
핵 : 흑색
교원섬유 : 적색
세포질, 근섬유 : 노란색
결합조직의 염색 (Stain of Connective tissue)
Elastic fiber
Elastic fiber of arteriole
Elastic fiber
Elastic fiber of skin
결합조직의 염색 (Stain of Connective tissue)
Elastic fiber of arteriole