Transcript pptx
PRIF UK KOCH Syntéza prekurzorov a Narylaminooxazolkarboxamidových inhibítorov VEGFR2 TK Marek Ondruš Školiteľ: Mgr. Juraj Dobiáš Ciele práce • Spracovať vybranú literatúru ohľadom vlastností, biologickej funkcie TAM TK receptorov a vývoja inhibítorov pre RTK • Navrhnúť metodiku syntézy a pripraviť intermediáty, ako aj predpovedané inhibítory VEGFR2 receptorov TK Prečo práve receptory TK? TAM rodina TK receptorov: Apoptická bunka Fotoreceptoru • nadmerná expresia vznik nádorových ochorení • tkanivová homeostáza (Mer) • proliferácia, migrácia (Axl) • agregácia krvných doštičiek (Tyro3) PtdSer Gla doména EGF domény SHBG doména Ig domény • súvis s CSCs • Axl, Mer, Tyro3 FNIII domény Tyrozín kinázová doména Makrofágy Dendrické bunky Sertoliho bunky RPE bunky VEGFR2 RTK: • produkcia VEGF • afinita VEGF k VEGFR2 receptorom EC buniek • proliferácia a migrácia http://www.joelertola.com/grfx/angio/edema.jpg (naposledy navštívené 28.5.2014) „SBCP“ vrecko „SBCP“ = Salt Bridge Containing Pocket (Phe, Lyz, Asp) • ľahšia syntéza • väčšia selektivita • prídavné interakcie I. SYNTÉZA Mechanizmus vzniku amidov 1H-NMR analýza Celkový výťažok I. syntézy: 14 % II. SYNTÉZA Problémová syntéza - Hypotézy • nízka nukleofilita anilínu • elektrónovo chudobné pyridínové jadrá (voľné elektrónové páry na atómoch N sa nezapájajú do konjugácie, atómy dusíka pôsobia len svojim elektrónakceptórnym efektom) selektívna nitrácia • možné problémy s chelatáciou pri reakcii s Me3Al • stéricky brániace vodíky na α a ß uhlíkoch • znížená reaktivita kyseliny 4 zavedenie Boc skupiny na mostíkovú NH skupinu III. SYNTÉZA 1H-NMR analýza Celkový výťažok III. syntézy: 36 % Záver • vypracovaná metodika prípravy amidov arylaminooxazolov z kyseliny 4 • v celkovo 16 syntetických krokoch sme pripravili prekurzor 6 a 2 potenciálne inhibítory pre receptory VEGFR2 TK v celkových výťažkoch 14 a 36 % • inhibítory 7 a 17 boli odoslané na biologické testovanie • kompletne fyzikálno-chemicky sme opísali 7 nových látok • problémová syntéza inhibítora 13 je predmetom našej ďalšej práce ĎAKUJEM ZA POZORNOSŤ I. Otázka: Boli urobené iné experimenty na určenie multiplicity signálov? 1D NMR spektroskopické metódy: • APT („Attached Proton Test“) – diferencuje uhlíkové jadrá s nepárnym počtom viazaných vodíkov - CH a CH3 (pozitívny signál) a párnym počtom vodíkov C a CH2 (negatívny signál). • DEPT – („Distorsionless Enhancement by Polarization Transfer“) – diferencuje len medzi CH, CH2 a CH3, quartérny nedokáže. • magnetizácia pri 135 ° pozitívny signál CH a CH3, negatívny signál CH2 • magnetizácia pri 90 ° pozitívny signál len CH • magnetizácia pri 45 °C pozitívne signálny všetkých uhlíkových jadier II. otázka: Aké metódy by ste mohli použiť na jednoznačné priradenie všetkých signálov v NMR? • NOESY – 2D NMR spektroskopia, vyžiarením NH vodíkov pozorované zvýšenie intenzity signálov priestorovo blízkych vodíkových jadier vo vzdialenosti menšej ako 5Å. • NOE (1D NMR), ROESY (NOESY v rotujúcom režime). III. otázka: Skúšali ste pomocou molekulového modelovania vypočítať elektrónové rozloženie HOMO orbitálu? Elektrónové rozloženie HOMO orbitálu: AM1/DFT-6-31G** IV. Otázka: V akom výťažku ste získali vedľajší produkt 7.1 a prečo je zrejme preferovaný vznik tohto produktu? Mate nejaké zdôvodnenie, prečo sa podarilo získať produkt analogickej reakcie 15 až v 82 % výťažku? Mechanizmus chránenia s Boc2O Mechanizmus redukcie SnCl2: N2H4.H2O: Mechanizmus odchránenia Boc Mechanizmus nitrácie Mechanizmus s Me3Al