UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y

Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz Soto Cruz Rivera Paula Ameyali Vela Veliz Mayra Irais López Guerra Domingo Lara Sánchez Elías Reyes Karol Leyda

Recordar que….

Los hongos crecen en dos formas:

Levaduras

• • •

Células únicas de forma esférica (3-15 µm).

producto de gemación.

pseudohifas

Mohos

• • • •

Colonias filamentosas multicelulares.

Túbulos cilíndricos Micelos Algunos divididos por septos.

Brook G, Butel j, Morse S. 2005.

Especímenes clínicos

Secreción de heridas Biopsias Cutánea (pelo, piel, uñas) Exudados mucosas Sangre Orina MO Secreción de VRB

Dx Micológico

Adecuada y abundante Reactivos.

Medios de cultivo.

Equipos .

Con experiencia en toma y manejo

Examen Directo

KOH • Hidróxido de potasio…....20 gr • Glicerol.......20 ml • Agua destilada.....60 ml KOH-dimetil sulfoxido • Hidróxido de potasio................10 gr • Dimetilsulfóxido..40 ml • Agua destilada.............50 ml Sol. Salina • Cloruro de sodio…. 0.85 gr • Agua destilada. 100 ml

• Limitaciones Sitio anatómico Cantidad de muestra # de microorganismos Tipo de paciente Calidad del personal del Lab. Artefactos

Cultivo de la Muestra (envases)

Cultivo de la Muestra (Agar)

Saburaud

• • • • • 2% glucosa.

pH 6.9

Medios estándar. No ideal para esporulación. Puede contener cloranfenicol o gentamicina.

Micosel, micobiótico

• • • Harina de soja Dextrosa Ciclohexamida y cloranfenicol

Papa-Dextrosa

• • Base de pulpa de papa.

Glucosa/dextrosa Como estimulante de pigmento: • Zanahoria y bilis

BHI con/sin Antibiótico

• • Hongos filamentosos y levaduras.

Sangre de carnero.

Antibiótico: • Cloranfenicol, Gentamicina, Cicloheximida. Colonias de Penicillium expansum (A) y Botrytis cinerea (B), creciendo en medio Agar Papa Dextrosa.

Conservar a 2-8 °C en una bolsa

Temperatura • • 25-30 °C 37 °C Tiempo • • Levaduras 24-48 hr.

Hongos filamentosos • • No patógenos 2-4 días Patógenos 6-15 días

Identificación de hongos

Color Tasa de crecimiento

Textura • • • • Algodonosa Aterciopelada Granular o polvorienta glabrosa

Topografía (colinas y valles) • • Rugosa Umbonada • • Verrucosa Aplanada

Examen del Cultivo

Cardaje Azul de algodón de lactofenol • Fenol, concentrado..20 ml • Acido láctico............20 ml • Glicerol....................40 ml • Azul de algodón.....0.50 gr • Agua destilada.........20 ml Fragmentos hifales • Metamina Argentica de Gomori • Tiñe de negro la pared celular • Ac. Peryodico de Schiff • Tiñe de negro la pared celular

• Cinta Adhesiva • Microcultivo

Trichophyton rubrum

Trichophyton tonsurans

Trichophyton mentagrophytes

Microsporum canis

Epidermophyton floccosum

Pitiriasis Versicolor

Coccidioides immitis

Fase tisular 37 °C Fase micelial 25-30 °C

Aspergillus spp.

• Morfología colonial

• Medios de cultivo Agar • Saburaud • Papa-Dextrosa Extracto de Malta • Glucosa 20 g/L • Extracto de malta • Peptona 1 • Agar 15 • pH = 5,4 (selectivo) Czapek-Dox • Medio para el cultivo de hongos y bacterias capaces de utilizar el nitrato de sodio como única fuente de nitrógeno.

Aspergillus terreus on Czapek dox agar showing typical suede-like cinnamon-buff to sand brown colonies while reverse is yellow to deep dirty brown.

• Identificación de Estructuras

Bibliografía

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