Transcript 芳胺类药物含量测定

芳胺类药物含量测定
杜 悦
非水溶液滴定法
 分光光度法
 盐酸普鲁卡因胺的快速荧光测定
 比色法
 高效液相色谱法

非水溶液滴定法

定义：非水滴定是在除水以外的溶剂中进行
的滴定方法。

适用范围：有机碱、有机碱（K<10-7）及其
盐类

溶剂的选择：
能增强样品的酸（碱）性；
对试样的溶解性好；
纯度高，使用安全，挥发性小，易回收。

常用的溶剂
碱性溶剂 : 受质子 如 乙二
胺， DMF
酸性溶剂：给质子 如 冰醋酸

质子性溶剂

非质子性溶剂
混合溶剂
无转移性质子，只起分散
和稀释作用，如 氯仿

质子性溶剂和非质子性溶剂合
用，如冰醋酸－酸酐
注意
弱碱性药物——酸性溶剂
弱酸性药物——碱性溶剂
常用的方法：


非水碱量法——在酸性溶剂中用高氯酸滴定剂滴定
弱碱性药物。
常用溶剂——冰醋酸；
滴定剂——高氯酸滴定液；
指示剂——结晶紫；
非水酸量法——在碱性溶剂中用甲醇钠滴定剂滴定
弱酸性药物。
常用溶剂：乙二胺、二甲基甲酰胺；
滴定剂：甲醇钠滴定液
指示剂：麝香草酚蓝
盐酸利多卡因的非水滴定
原理：侧链烃胺的叔氨基有弱碱性，在冰醋酸中，
与高氯酸可以进行酸碱滴定。
CH3
CH3
NHCOCH2N(C2H5)2.HCL
+
Hg(Ac)2
CH3
2
NHCOCH2N(C2H5)2.HAc
+
HgCl2
CH3
CH3
NHCOCH2N(C2H5)2.HAc
CH3
CH3
+
HClO4
NHCOCH2N(C2H5)2.HClO4
CH3
+ HAc
注意



醋酸汞作用：
药物为盐酸盐，高氯酸滴定时有氢卤
酸生成，影响滴定终点，加入醋酸汞，
清除氢卤酸的干扰。
醋酐作用：
有利于增强被测物的碱性。
非水操作、标定液温度、滴定终点的确
定
思考题？
本章药物采用非水滴定的药物有：盐酸利多卡因，
盐酸丁卡因，盐酸布比卡因。它们可以用亚硝酸
钠法测定吗？为什么？
分光光度法
应用：对乙酰氨基酚原料及其制剂含量测定
 测量方法：
中国药典(2000版):百分吸收系数（E1％1CM）法
原理：对乙酰氨基酚在0.4％NaOH溶液中，于
257nm处有最大吸收。
USP(24)：对照品比较法
原理：对乙酰氨基酚在甲醇－水混合溶剂中，
于244nm处测A。
优点：较亚硝酸钠滴定法灵敏度高，操作简单。

中国药典(2000版):百分吸收系数（E1％1CM）法
方法：
水
本品40mg＋0.4％NaOH50ml → 250ml，摇匀，精
密量取5ml，0.4％NaOH10ml → 100ml,257nm处测A。
E1％1cm ＝715
计算：
A= E1%cm×C×L
C% = A / E1%cm
A × F
样品%＝
E1%cm × W
＝
A× 50×100 ×1000
715 ×40
USP(24)：对照品比较法
方法： 分别配置供试品和对照品，在同样条件下测
A，计算含量。
计算：A样/A标 = C样/C标
样品%= A样/A标 × C标×F/W×100%
比较：
USP(24)：消除其它成分、仪器和溶剂等对光的反射
和吸收带来的测定误差；需要有标准品；多次测
定。
Ch P(2000):无需标准品；测定一次；仪器等误差大。
荧光分析法
原理：
物质受光照射后，发射出荧光，在一定浓度范
围内，当激发光强度等外界条件一定时，物质的
荧光强度与浓度成正比关系。
特点：
灵敏度高，专属性好。
要求
本身或与荧光衍生剂作用产生荧光
高浓度——熄灭
低浓度溶液中进行
须做空白对照
荧光分光光度计
1






λex
2
注意：
F
3
1－光源
2－单色光器1
3、6－狭缝
4－样品池
5－单色光器2
7－检测器
测紫外吸光度
4
F
5
λem
6
7
激发光谱
吸收池 ；仪器装置成直角
荧光光谱
nm
测定方法：
标准对照法（一点法）
Ci=(Ri-Rib)/(Rr-Rrb) ×Cr
标准曲线法（y=bx＋a）
由标准曲线或回归方程求出C样，再
根据F，W求出样品%。
注意：
灵敏度高，干扰因素多，因此多采用
标准品对照法.
盐酸普鲁卡因胺的快速荧光测定：
原理：
芳伯氨基＋荧胺→荧光物质→测定λex 400nm,
λem485nm处荧光强度。

CONHCH2CH2N(C2H5)2
CONHCH2CH2N(C2H5)2
o
+
NH2
o
o
N
OH
COOH
O
计算：
标准曲线法
注意：
反应条件：ＰＨ7.5(磷酸盐缓冲液)
本法也适用于普鲁卡因胺制剂的测定，若测定浓
度大于0.25ug/ml～2.5ug/ml的注射液时，可用水
适当稀释后测定。
优点：
与芳伯氨基重氮化法比较灵敏度高，操作简单.
比色法

原理：有色物质溶液的颜色深浅与浓度有一定
关系，且有色物质在可见光区有一定吸收，
通过测定A来测定物质浓度。

方法：
（1）重氮化－偶合反应→有色偶氮染料
特点:专属性低，凡能重氮化的有机化合
物均可以。
（2）经缩合反应生成有色络合物
以盐酸普鲁卡因为例介绍：

原理：
NH2
OH
O
OH
O
+
2
COOCH2CH2N(C2H5)2


+ H2O
SO3Na
N
OH
O
+
+
NaHSO4
SO3Na
方法：标准曲线法
特点：专属性强，准确。适合于盐酸普鲁卡因
及其制剂，普鲁卡因青霉素及其注射剂的测定。
肾上腺素、青霉素、焦亚硫酸钠、硝基苯及氯
甲酚等不干扰。
高效液相色谱法
优点：不需提取分离，方法简便、快捷，回收率高，
稳定性、重复性较好。
应用：糖浆中盐酸普鲁卡因的含量，感冒灵颗粒中
对乙酞氨基酚等。
方法：
内标法，标准曲线法。
谢谢