Transcript 조류생물학

12장
분자생물학적 연구기법
핵산
# 겔 전기영동(Gel electrophoresis )으로 DNA와 RNA를 크기에 따라 분리할 수 있다.
# 제한효소는 DNA의 특정자리를 자른다.
# 제한효소들은 항상 회문서열(palindrome)인 4~8 bp의 짧은 표적서열을 인식한다.
- 점착성 말단과 평편한 말단을 만든다.
# DNA 혼성화(hybridization)로 특정 DNA분자를 찾아낼 수 있다.
- 탐침(probe): 상보성 서열을 갖고 있는 DNA분자를 핵산 혼합물로부터 찾는 데 사용된다.
- 서던 블롯 vs 노던 블롯
# DNA 클로닝
- 벡터(vector)의 조건
1. 복제 개시점을 가지고 있어서
숙주세포와 독립적으로 복제할
수 있어야 한다.
2. 선택표지(selection marker)
를 가지고 있어야 한다.
3. 각각의 제한효소가 자를 수
있는 단일자리를 가지고 있어
야 한다(multi cloning site).
# 중합효소 연쇄반응
단백질
# 특정 단백질을 세포추출물로부터 순수분리
- 칼럼 크로마토그래피
- 폴리아크릴아미드 겔을 이용한 단백질 분리
- 면역블로팅(immunoblotting, 웨스턴 블롯)
핵산-단백질 상호작용
# 단백질과 결합하면 DNA의 전기영동적 이동성이 달라진다.
- 전기영동 이동성-변화 분석(electrophoretic mobility-shift assay, EMSA)
- 염색질 면역침전: 특정 DNA 부위(프로모터)가 대상 단백질과 결합여부를 조사하는 방법