Transcript 灌喂大豆蛋白的胃蛋白酶酶解物对大鼠免疫功能的影响

灌喂大豆蛋白的胃蛋白酶
酶解物对大鼠免疫功能的影响
博士研究生：左伟勇
指导教师：陈伟华 教授
南京农业大学动物医学院
农业部动物生理生化重点开放实验室
研究背景
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近年，对蛋白质消化过程肽的释放和肽的完整吸收都有了
进一步认识。肽作为动物消化道蛋白质的酶解产物，参与
生命活动调节。这类肽被称为腔内信号分子。
理想模式氨基酸日粮不能获得最佳的生产性能，肽吸收理
论日益为人们接受。从而对蛋白质传统营养提出了挑战。
肽吸收有其独特的优点。
目前，活性肽产品应用于医药、营养保健和畜牧兽医。我
国对植物蛋白的利用有悠久的传统。副产物蛋白多未充分
利用。
研究目的
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实验模拟胃内生理环境制备大豆蛋白胃蛋白酶
水解物。通过灌喂蛋白酶解物观察其对大鼠生
长性能和免疫功能的影响。旨在了解植物源蛋
白水解物的生理功能，并为其应用于畜牧生产
提供一定的理论和实验依据
研究内容
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大豆蛋白胃蛋白酶酶解生物活性肽的制备
灌喂大豆蛋白酶解物对大鼠体重及免疫脏器生长
的影响
灌喂大豆蛋白酶解物对大鼠免疫功能的影响
灌喂大豆蛋白酶解物大鼠几种血清激素和细胞因
子的影响
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经碱提酸沉法和氯化钠缓冲液洗涤法分别制
取大豆蛋白
胃蛋白酶,pH=1.4， 37℃，水解2小时，茚三
酮法测定水解度
半微量凯氏定氮法测定蛋白液、水解液氮含
量
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根据半微量凯氏定氮法，经碱提酸沉法制备的大豆
蛋白提取液蛋白含量为3.44±0.07g/100mL；大豆
蛋白水解液蛋白含量为13.46±0.20 mg/mL。用茚
三酮法测得大豆蛋白水解液水解度为14.49%，平均
肽链长度分别为6.9。
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实验设计：将50只28日龄SD大鼠分为两组，每组15只雄，
10只雌。饲喂基础日粮，每天上午8：00灌喂大豆蛋白水
解液（实验组）和灌喂大豆蛋白液（对照组），各1mL，
共21天。MTT法、 3H-TdR 掺入微量全血法分别检测腹腔
巨噬细胞吞噬功能和血液淋巴细胞转化情况。用NDV-Ⅰ
系苗检测B细胞免疫功能。用放射免疫分析法检测肠腔
sIgA水平、血液IL-2、Leptin水平。
数据处理:数据采用SAS分析软件处理，数值以Mean±SD
表示。
灌喂大豆蛋白水解液对大鼠体重及免疫
脏器重量的影响
项目
体重
对照组(n=25)
143.84±29.30
实验组(n=25)
158.68±16.04a
a
胸腺相对重
脾脏相对重
0.25±0.05%Bb
0.69±0.20%Bb
0.31±0.06%Aa
0.91±0.20%Aa
注：含相同字母表示差异不显著，不含相同字母者为差异显著,不同小写字母代表差异显著下同
（p<0.05），不同大写字母代表差异极显著（p<0.01），下同。
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灌喂大豆蛋白水解液对大鼠
免疫功能的影响
巨噬细胞吞噬 淋巴细胞转化
活性（A570） 率（SI）
(n=12)
(n=13)
B 细胞活性
（HI）
(n=10)
肠道 sIgA 水
平（μg/mL）
(n=25)
对照组
0.24±0.08Bb
1.51±0.40Bb
4.2±0.9Bb
0.35±0.08Bb
实验组
0.24±0.08Bb
2.76±1.06Aa
5.6±0.4Aa
0.47±0.15Aa
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灌喂大豆蛋白水解液对大鼠
血清激素水平和细胞因子的影响
对照组(n=25)
实验组(n=25)
IL-2（ng/mL）
1.81±0.34 Bb
2.50±0.72 Aa
瘦素（ng/mL）
1.22±0.20 Bb
1.39±0.22
Aa
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本实验采取的提取工艺是结合诸多因素制订的操作流程。 贮藏蛋白从功能蛋白
进化而来。进化过程若干功能区组装成机体所需的营养蛋白。我们认为：不同
的贮藏蛋白可能广泛存在有不同功能区，选择适当的酶就可以将其释放出来，
还原其功能特性
灌喂大豆蛋白水解液水解液，能显著提高大鼠免疫脏器重量，加快大鼠生长。
灌喂大豆蛋白水解液对大鼠腹腔巨噬细胞吞噬、淋巴细胞转化、B细胞免疫和胃
肠道粘膜分泌sIgA都有显著性促进作用。
灌喂胃蛋白酶水解液， 胰岛素、T3和T4水平无显著性变化； IL-2、Leptin则
有显著性增加。说明酶解物并非以营养调节作用致大鼠生长、免疫功能改善，
而是其中一些具免疫活性小肽作用的结果
谢
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