Transcript Evolis Twin Plus(ELISA) 분석항목

Evolis Twin Plus(ELISA)
분석항목
-현재 검사 진행중인 항목
Galactomanan
toxokara
-우리가 검사해야할 항목
TNF-a, IL-1b, IL-6, IL-8, IL-10
분석원리
- Evolis Twin Plus 는 검체 Sampling, 희석,
시약분주, 항온, 세척, Plate이동, Reading 등
을 해주는 전자동화 기기이다.
Evolis Twin Plus는 Windows에서 구동이 되
며 Assay는 Bio-Rad Assay에서 수정하여 사
용 가능하다.
- OD값 측정
- 검체: Serum or plasma
- 종목당 필요량: 10~20ul (+Dead Volume
150ul)
- 준비물:
1)D.W: Prime/Rinse/Dispense and Aspirate
2) Wash Solution
3)Tip
4)Diution Plate(필요시)
검사방법(menual)
*Galactimanan*
1. 검체를 Rac에 순서대로 정리하고 뚜껑 open후 튜브를
Sample 수만큼 꽂아놓음.
2. 튜브에 Labeling한다.(5단위로 기록)
Heating block 을 미리 켜놓는다.
3. Sample 300ul에 Treatment (R7) 을 100ul씩 첨가한다.
4. 미리켜둔 Heating Block이 120도가 되면 6분간 가열한다.
(단백질 제거를 위해)
그 후 10분간 원심한다.
여기까지가 검체의 전처리 과정
5. 원심을 한 검체는 상층액 50ul를 사용하며, Well에 conjugate
50ul를 넣는다.
6. 파라필름으로 실링후 1시간 15분간 37도에서 Incubation한다.
7. Washing. (기계에 8번으로 맞춰있음) Washing Solution은
D.W940+Buffer 60
8. TMB Solution 200ul씩 분주.
9. RT에서 암실에 30분간 Incubation.
빛차단이 필수이므로 호일로 감싼다.
10. Stop Solution 100ul 첨가
11. 450nm 에서 흡광도 측정
Menual 기계