Transcript 任超杰

H7N9的实验室检查与防护
任超杰
2014.2.20
主要内容
 H7N9的病原学特点
 H7N9标本的采集、运送
 H7N9实验室检查
 H7N9的预防
病原学特点
H7N9型禽流感是一种新型禽流感,属正粘病毒科,
甲型流感病毒属。
病原学特点
H7N9是禽流感的一种亚型。流感病毒颗粒外膜
由两型表面糖蛋白覆盖,一型为血细胞凝集素
(即H),一型为神经氨酸酶(即N),H又分
15个亚型,N分9个亚型。所有人类的流感病毒
都可以引起禽类流感,但不是所有的禽流感病
毒都可以引起人类流感,禽流感病毒中,H5、
H7、H9可以传染给人,其中H5为高致病性。依
据流感病毒特征可分为HxNx共135种亚型,
H7N9亚型禽流感病毒是其中的一种,既往仅在
禽间发现,未发现过人的感染情况。
抵抗力
H7N9病毒不耐热65℃,30分钟可被灭活。在室
温下很快丧失传染性。0℃~4℃可存活数周,70℃以下或冻干后可长期存活。在水中可存活1
个月。
H7N9病毒对干燥、紫外线敏感。病毒在直射阳
光下2天即可灭活,如果用紫外线可迅速将其灭
活。因此,平时多晒太阳是预防禽流感最简单、
有效的办法。
H7N9病毒对消毒剂也很敏感。如甲醛、乙醚、
乙酸及其他常用消毒剂都能迅速迷惑其传染性。
H7N9感染者主要表现
标本的采集
采集的临床标本包括:
1、病人的上呼吸道标本(包括咽拭子、鼻拭子
、鼻咽抽取物、咽漱液和鼻洗液)
2、下呼吸道标本(如气管吸取物、肺洗液、肺
组织标本)
3、血清标本等。
应当尽量采集病例发病早期的呼吸道标本,以前3天为佳
(尤其是下呼吸道标本)和发病7天内急性期血清以及间
隔2-4 周的恢复期血清。
标本的采集
鼻咽拭子采样方法
1、鼻拭子:将带有聚丙烯纤维头的鼻咽拭子轻
轻插入鼻道内,轻轻转动鼻咽拭子,并向鼻腔
内部推进至鼻腭处,停留片刻后缓慢转动退出,
将拭子头浸入采样液中,尾部折断弃去。
2、咽拭子:用带有聚丙烯纤维头的鼻咽拭子用
力擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁,将拭子头浸入
采样液中,尾部折断弃去。
标本的采集
采样时用干拭子采,不能蘸采样液,因为采样液中有抗菌素,防止过敏
采样液平时保存在-20℃或-70℃,采样前融化到4℃。
采样液颜色呈紫色时失效不能用了
标本的采集
标本的运送
新鲜的临床采集标本应在4℃条件下随样品送
检单24小时内运送至市CDC流感检测实验室或
有条件检测的实验室。未能24小时内送至实验
室的,应置-70℃或以下保存;冻存的标本应
在冻存条件下,低温送至实验室。
样本采集的防护
采样时应带口罩,穿隔离衣,带一次性手套及
帽子。若在现场进行快速检测,应将现场用过
的所有废物带回销毁。
实验室检查
一般检查
1.血常规。白细胞总数一般不高或降低。重症患
者多有白细胞总数及淋巴细胞减少,并有血小
板降低。
2.血生化检查。多有肌酸激酶、乳酸脱氢酶、天
门冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶升高
,C反应蛋白升高,肌红蛋白可升高。
实验室检查
显微镜的检查
电镜观察是快速诊断方法
用特异性抗体与标本或细胞培养物相互作用,
用离心沉渣进行免疫电镜观察,可提高检出率。
敏感性达50%
鼻咽拭子可制成图片固定与特异性抗体同孵育,
然后用荧光标记的抗抗体在荧光显微镜下观察
敏感性大50%-90%。
实验室检查
抗原检测
直接检测临床标本或细胞培养物中的流感病毒
抗原。
方法:IF
EIA
动态连续免疫荧光法
抗原检测灵敏度好、特异性高,能在30分钟内完
成,适合在各级医疗机构开展。
实验室检查
病原学检测
(1)核酸检测。对患者呼吸道标本(如鼻咽分泌物
、口腔含漱液、气管吸出物或呼吸道上皮细胞
)采用real time PCR检测到H7N9禽流感病毒核
酸。
实验室检查
(2)病毒分离(诊断的黄金标准)。从患者呼吸
道标本中分离H7N9禽流感病毒,可选用传代
狗肾细胞、人胚肾或猴肾细胞,培养7-10天,
进行鉴定与分型。
H7N9的预防
(一)尽量不去人多拥挤、空气不流通场所
H7N9的预防
(二)注意个人卫生,勤洗手,打喷嚏时注意遮
掩口鼻,不随地吐痰
(三)不要自行宰杀家禽,避免接触和食用病死
家禽。
(四)注意饮食卫生,加工。保存食品注意生熟
分开,不吃生或半熟肉、蛋等食品,不购买未
经检疫禽肉、猪肉品。
H7N9的预防
(五)保证充足睡眠,避免过度劳累,增强抵抗
力