Transcript LE MILIEU HUGH ET LEIFSON

LE MILIEU HUGH ET LEIFSON :
Recherche de la voie d’attaque du glucose
1. Intérêt
Les bactéries peuvent attaquer le glucose par :
- VOIE OXYDATIVE : le glucose est utilisé uniquement en présence de dioxygène
(faible libération d’acides)
- VOIE FERMENTATIVE : le glucose est utilisé :
- en absence et en présence de dioxygène (forte libération d’acides)
- ou seulement en absence de dioxygène (forte libération d’acides)
2. Composition
Ce milieu contient (entre autre) :
-une base nutritive avec peu de peptones : apport de facteurs de croissance, de source
de carbone d’azote, …
- le bleu de bromothymol : indicateur de pH
- du glucose stérile à 1% (à ajouter juste avant l’ensemencement)
3. Principe (cf. fiche technique)
LE MILIEU HUGH ET LEIFSON :
Recherche de la voie d’attaque du glucose
4. Technique d’ensemencement
Régénerer le tube
20 min à 100 °C
Ajouter stérilement
le glucose pour une
Cfinale = 1 %
puis refroidir sous
l’eau froide
Incuber à l’étuve
24h à 37 °C
Ensemencer avec une
piqûre centrale
à l’aide du fil droit
LE MILIEU HUGH ET LEIFSON :
Recherche de la voie d’attaque du glucose
5. Lecture (après avoir vérifié la présence de culture dans le tube)
OBSERVATION
INTERPRETATION
CONCLUSION
Acidification révélée par le virage
de l’indicateur de pH uniquement
en présence de dioxygène :
Acidification révélée par le virage
de l’indicateur de pH uniquement
en absence de dioxygène :
ATTAQUE DU GLUCOSE
UNIQUEMENT EN PRESENCE
DE DIOXYGENE
ATTAQUE DU GLUCOSE
UNIQUEMENT EN ABSENCE
DE DIOXYGENE
LES BACTERIES DEGRADENT
LE GLUCOSE PAR VOIE
OXYDATIVE
LES BACTERIES DEGRADENT
LE GLUCOSE PAR VOIE
FERMENTATIVE
LE MILIEU HUGH ET LEIFSON :
Recherche de la voie d’attaque du glucose
5. Lecture (après avoir vérifié la présence de culture dans le tube)
OBSERVATION
INTERPRETATION
CONCLUSION
Acidification révélée par le virage
de l’indicateur de pH en présence
et en absence de dioxygène :
Alcalinisation révélée par le virage
de l’indicateur de pH en présence
de dioxygène :
ATTAQUE DU GLUCOSE EN
ABSENCE (ET
EVENTUELLEMENT EN
PRESENCE) DE DIOXYGENE
PAS D’ATTAQUE DU GLUCOSE
MAIS UTILISATION DES
PEPTONES COMME SOURCE
D’ENERGIE ET DE CARBONE
LES BACTERIES DEGRADENT
LE GLUCOSE PAR VOIE
FERMENTATIVE
BACTERIES INERTES
(VOIE OXYDATIVE NON
EXCLUE)
VIS-A-VIS DU GLUCOSE