Transcript 实验动物的质量控制

实验动物
饲养条件及饮用水的控制
作为被限定饲养于特定环境之中，用于
科学研究的一个特定动物种群，实验动物
的营养物质需要，对于维持生命与健康，
保证生长发育和种群特性，对于保证实验
结果的准确性及再现性都是至关重要的。
关注动物的饲养条件、营养需求、加强
饲料、饮水的质量管理是实现实验动物标
准化的重要条件之一。
实验动物的质量控制：
微生物的控制：要求动物本身不携带
致病性微生物。
环境质量控制：要求饲养环境无病原
微生物存在。
动物在有害因素作用下，能产生一定
的保护性适应，但有害因素超过一定水平，
就会对动物机体产生直接或间接的危害，
引起各种疾病，最终影响实验动物的正常
繁殖、生长、发育和动物实验结果。环境
因素对实验动物的影响是多种因素联合作
用，其影响不是立刻表现出来，需一定的
时间和作用条件才能显现。
环境控制的检测形式：
1、静态检测：
是指在洁净实验动物设施空调送风系统
连续运行48h 以上，已处于正常运行状态，
工艺设备已安装，设施内无动物及工作人
员的情况下进行检测。
2、动态检测：
是指实验动物设施已处于正常使用状态
下进行测试。
1．普通环境
要求：采用自然通风或设有排
风装置，有防虫、防鼠设施，要
求笼具和垫料消毒、使用无污染
的饲料，人员进出有一定的防疫
措施。这类设施仅适用于普通级
动物。
用途：饲养普通级动物。
2．屏障环境
要求：要求与外界隔离，人、实验动物、
空气、其它物品必须严格的微生物控制，
空气经三级过滤净化后才进入屏障设施之
内，空气洁净度达万级。
人是最大的污染源 ，特别严格的操作程
序至关重要。
用途：饲养SPF级动物。
恒温：20℃－26℃，日温差≤ 4℃
恒湿：40－70％
空气压力梯度：20-50帕，洁净走廊、无
菌物品存放处空气压力最高处。
换气次数：10－20次/h
空气洁净度：万级（气中≥0.5μm的颗粒物350个/升
≥5. 0μm的颗粒物2.3个/升）
落下菌落数：0－3个/皿（φ90）
氨浓度：≤14mg/m3
噪声：≤60分贝
照度：工作照度150~300Lx，动物照度
15~20Lx
风淋室
风淋室是生物洁净室的理想配套设备。
作用：
1）清除人体和物品表面附着的
尘埃，减少带入洁净室的灰尘量。
2)有气闸室的功能, 可防止非洁净空气的侵入。
3)风淋室的板壁采用轻质隔热夹芯钢板，吹淋板采
用进口不锈钢制作，吹淋口方向可调，风淋时间
可在30-99秒间的调整。我们定的时间是60秒。
传递窗
洁净室的辅助设备。
主要用于洁净区与洁净区，洁净区与非
洁净区之间小件物品的传递，以减少
洁净室的开门次数，把对洁净区的污
染降低到最低程度。
自带空气自净装置：紫外线照射。
电子互锁：避免有菌空气穿过。
高效过滤器
 高效过滤器是用超细玻璃纤维纸作滤料，
胶板纸作分隔板，与铝合金框及镀锌钢板
框组合而成。
 特点：低阻高效、轻质、容尘量大
 适用于常温常压常湿条件下环境空气的净
化，尤其适用于需要高效空气过滤器覆盖
率高的净化环境。
净化走廊
 除生物安全屏障系统为负压以外，通常




应保持为正压，且不低于20--50Pa。
出风口设有防空气倒流装置。
屏障系统设有清洁走廊和污染走廊。
进入系统的笼具、饲料、饮水、垫料、
器械等一切物品都要经过严格的消毒灭
菌，人员进入要经淋浴、更衣，使用专
用的服装，进入的动物要有专用包装，
也经严格的消毒处理。
系统内的人员、物品和空气等采用单向
固定的流通路线，有呼吸系统疾病和皮
肤病的人员不能进入系统内。
独立通气笼盒（Individually
Ventilated Cages,IVC）
每一个盒子都带有独立的空气过滤设
施，这是一种小型的屏障隔离系统，由
于净化范围小，能耗小是显而易见的优
点，是小型啮齿类实验动物新一代SPF
级笼内净化通气的饲养设备。
与层流架或超净工作台配合使用，
按照超净台内微生物学实验的程序和
无菌操作原则，结合实验动物的特点
进行合理使用，方能保证笼盒内实验
动物的微生物、寄生虫质量到达SPF
级国家标准。
IVC本身设计也有明显的缺点，那就是自
身没有空气温度、湿度调节装置，就要求放
置IVC的环境建设要达到一定标准，符合饲
养动物温湿度的要求，才能发挥IVC的优势，
好的设计非常重要，等于是三套独立运行系
统，互不干涉。
3．隔离环境
以隔离器为主体及其附属装置组成的饲养环境。
要求：空气需经高效过滤，洁净度达100级，
饮水、垫料、饲料、笼具必须高压高温灭菌。
操作时，工作人员只能通过隔离器上的
橡胶手套来进行饲养或实验。
用途：饲养无菌动物和已知菌动物。
 物品是通过包装消毒后，由灭菌渡舱或传
递窗传入。
 动物是经由无菌剖腹产的方法进入。
 进入隔离器的空气，应经高效过滤，保证隔
离器内空气洁净度达100级，无菌并维持正
压状态。
 根据实验需要也可维持负压状态，但需要配
置空气排放装置，保证空气排放符合标准。
 另外，对实验动物设施的房舍设施的建设，如：地面、
门窗、墙壁、天花板、走廊及空气净化调节设备与送排
风系统等都有详细的要求。
 地面要求平而不滑，一般不设进、排水口。
 墙壁要求保温和隔音，墙涂料耐酸碱，易于消毒清洗。
 有压力梯度的系统，门应开向压力高的一侧等.
 总之，设施建设是从质量控制要求的角度，考虑到操作
和成本等因素来提出相应的要求。
 隔离罩是保持罩内无菌环境的全密封装置，是无菌
动物饲养、实验操作和实验观察的唯一设备.
 主要是作无菌控制，其他环境指标由罩外设备控制，
好的设备可维持1--3年的罩内无菌状态。
 用于无菌动物的隔离罩是正压装置，如作烈性感染
实验应采用负压隔离罩。
运输笼：
 国际上常用的运输笼具带有空气过滤通风系统和控
制温、湿度的装置，运输车辆上也装有各种环境指
标的控制系统，形成一个可移动的实验动物饲养设
施。
 我国目前尚未有此类装备，动物运输时，多采用在
普通饲养盒外包无纺布的简易运输笼，经运输后的
动物就可能达不到质量控制指标了。
垫料的要求：
对动物无毒、无刺激、无害
吸水性好，吸附臭气好
使用方便，价格低廉，容易获得
常用的垫料有：
木屑、木刨花、打碎的玉米棒及杆、吸水纸
设施的管理
即使设施完好并运行正常，操作者或
管理者的一次疏忽或错误，均可导致严重
后果，特别是对设施的微生物污染，一旦
发生，极难净化，除非中断生产或实验，
对设施进行全面的消毒灭菌，否则极难清
除微生物。
因此，污染一旦发生，损失巨大。
因此，设施的管理和严格的正确使用
至关重要。
空气调节特点：
1．新风量大，换气次数高，要求10～20次/小时。
2．空气要经初、中、高效过滤净化处理。
3．排出空气要经除臭及微生物处理，以保护环境
4．空气调节装置常年开放，只要有动物就不能停
止。
5．进行传染性实验、有毒、有害等实验时应在负
压实验装置内进行，以保证工作人员的健康。
实验动物设施的维护：
三个方面：空气过滤系统的维护
空调系统的维护
灭菌系统的维护
空气过滤系统的维护：
系统中有初效、中效和高效三级过滤，
过滤材料在工作时会沾染粉尘，逐渐造成堵
塞，而影响设施内的空气质量。
材料更换的次数取决于空气使用量和周
围空气的质量。
勤换初效和中效材料，可减少对高效材
料的更换，因为更换高效过滤材料会在一定
时间内造成设施内环境因素的不稳定。
 初效过滤材料应2周至3个月更换一次，
过滤材料经清洗、干燥，可重复使用。
 中效材料3至18个月更换一次，经清洗、
干燥也可重复使用。
 高效材料一般1-3年更换一次，一般不重
复使用。
空调系统的维护
 空调系统主要控制温、湿度两个重要
的环境指标，空调的热交换部件要经
常清洗，并要经常检查制冷剂有否泄
漏，自动控温装置是否有效。
灭菌系统的维护
 注意高压灭菌装置和饮水灭菌系统是否有
效，要经常监测。
 传递窗的紫外线灭菌是否有效。
 传递渡槽的消毒液要及时更换。
 做好设施的维护工作，反应了设施的管理
工作水平，要健全制度，建立岗位责任，
在管理上下功夫。
饮水设备和
饮用水的要求
1、普通级实验动物饮用符合生活用水的
标准即可。
2、SPF级实验动物饮水要求高，高温、
高压灭菌水是最可靠的方法，也是隔离器中
饲养动物饮水的唯一方法。
1、过滤加酸化除菌、
抑菌水制作：
自来水
↓
沙滤器粗滤
↓
活性炭过滤器
↓
加入适量化学纯盐酸
↓
酸化抑菌水
缺点：
由于是正压过滤，滤器
破裂不能及时发现，必
须随时监控水质量。
2、高温高压灭菌水制作：
121℃，30min高压灭菌
3、酸化桶装水：
动物实验使用的动物数量较少时，
可用市售人用过滤净水，加适当化学
纯盐酸，PH达到2.5—2.8范围，制成
动物饮用酸化水，质量也可保证。
4、RO型反渗透实验
动物饮用水制备系统
自来水
↓
石英沙强化过滤预处理
↓
精度5μm，长度20英寸的聚丙烯滤芯过滤：去污能力强
↓
二级活性炭过滤处理：主要是去除水中的游离氧化余氯，保护
后续的聚酰胺反渗透复合膜
↓
反渗透复合膜常压过滤
↓
终端紫外线消毒
↓
灌装水瓶