Transcript 遗传病的治疗（C13
《医学遗传学》网络课程 主讲人：郭奕斌 中山医学院医学遗传学教研室 第十三章、遗传病的治疗 第一节、手术治疗 第二节、药物治疗 第三节、饮食疗法 2020/4/24 ****《医学遗传学》CAI教学 **** 2 第四节、基因治疗 是指运用DNA重组技术修复患者细胞内有缺陷的基因，使 细胞恢复正常功能而达到治疗遗传病的目的，包括：1、基 因修正，即定点导入外源正常基因，代替有缺陷的基因，而 对靶细胞基因组无任何改变；2、基因添加，即非定点导入 外源正常基因，而没有去除或修复有缺陷的基因。 【例】电视机的修理，方法有二。 一、基因治疗的策略 2020/4/24 ****《医学遗传学》CAI教学 **** 3 (一)基本方式 1、生殖细胞基因治疗：可根治，但难且涉及伦理问题。 2、体细胞基因治疗：易但无法控制不传给下一代。 (二)必须具备的条件 1、疾病的发病机制及相应基因的结构功能清楚； 2、纠正疾病的基因已被克隆，而且该基因表达与调控的机 制与条件清楚； 3、导入基因具有适宜的受体细胞，并能有效表达； 4、具有安全有效的转运载体和方法。 2020/4/24 ****《医学遗传学》CAI教学 **** 4 二、基因转移的方法 (一)目的基因的转移 1、物理方法 (1)直接注射法：体外显微注射，一次只能注射1个。体内 注射，外源DNA摄入量大。 (2)电穿孔法：高压脉冲电场—击穿靶细胞膜—出现可逆 的小孔。 (3)微粒子轰击法：亚微粒的钨和金，能吸附DNA，形成 微粒—用轰击波获得超高速，进入靶细胞。 2020/4/24 ****《医学遗传学》CAI教学 **** 5 2、化学法：磷酸钙沉淀法改变膜通透性，以摄取外源DNA， 但转移效率低。 3、膜融合法：人工脂质体或红细胞影泡、微细胞、原生质 球等与靶细胞融合，释放外源基因。 4、受体载体转移法：重组质粒和特异性多肽（配体）形成 复合物，导向特异类型的细胞。 5、同源重组法：将外源基因定位导入受体细胞的染色体 上—同源序列交换—取代缺陷基因。如基因修正。 6、病毒介导转移法：以病毒作载体，转移目的基因，最有 效。有SV40、牛乳头状病毒等DNA病毒和逆转录病毒。 2020/4/24 ****《医学遗传学》CAI教学 **** 6 (二)靶细胞的选择 1、易于取材，自体移植无排斥反应； 2、易于培养和导入基因； 3、移植时不会因细胞老化而影响基因表达； 4、重新植入后，能高速血管化，便于释放外源基因编码 的蛋白质进入血管。 目前常用的靶细胞是骨髓干细胞、皮肤成纤维细胞、外周 血淋巴细胞、肝细胞、血管内皮细胞和肌细胞等。 2020/4/24 ****《医学遗传学》CAI教学 **** 7 三、基因治疗的方法 (一)反义寡核苷酸技术：一是利用DNA和RNA的碱基互补可 行成同源和异源双链的原理，将突变基因所转录的mRNA （DNA）阻断在翻译（或转录）前；二是反义寡脱氧核苷 酸形成异源双链后启动内源酶RNA，并裂解RNA及其他效 应物，可使症状得到改善。 1、反义RNA表达载体 2、反义RNA（或DNA）的体外微注射 3、用脂质体运送反义RNA 4、其他方法 2020/4/24 ****《医学遗传学》CAI教学 **** 8 (二)“自杀基因”疗法：自杀基因—特异酶—使药物转化为对肿瘤 有害的物质（对正常细胞无影响）—使肿瘤DNA无法复制而死亡。 旁观者效应：是指当将适量的HSV TK+癌细胞和HSV TK—癌细胞 共培养，当加入GCV药物后不仅前者被杀死，HSV TK — 癌细胞 也被杀死。 2020/4/24 ****《医学遗传学》CAI教学 **** 9 (三)多抗药基因疗法 在肿瘤治疗中，利用基因重组技术将已被克隆的多抗药 性（MDR）基因导入骨髓干细胞，进而使由此类干细胞 所衍生的白细胞对化疗药物的耐受性增强，从而通过加大 化疗药物剂量或延长化疗药物的使用时间达到治疗肿瘤目 的的治疗方法。 2020/4/24 ****《医学遗传学》CAI教学 **** 10 (四)抑癌基因疗法：将正常的抑癌基因导入肿瘤细胞以代替和补 偿缺陷的抑癌基因，从而抑制肿瘤的生长。即基因添加疗法。 CDK：细胞周期蛋白依赖性激酶；cyclin：细胞周期蛋白。 2020/4/24 ****《医学遗传学》CAI教学 **** 11 四、基因治疗的临床应用 (一)ADA缺乏症：美国学者Anderson于1990,1991分别对4岁 和9岁两个ADA缺乏症女孩行基因治疗，取得成功。 2020/4/24 ****《医学遗传学》CAI教学 **** 12 (二)乙型血友病 上海复旦大学遗传所薛京伦等1991年进行了世界首 次血友病B基因治疗的临床I期试验（该研究以皮肤成纤维 细胞为主要靶细胞，采用反转录病毒基因转移方法），先 后有4 名乙型血友病患者接受基因治疗，经治疗后出血症 状减轻，取得了安全有效的结果，获得基因治疗领域里第 一个国家卫生部颁发的临床试验许可证。 2020/4/24 ****《医学遗传学》CAI教学 **** 13 (三)肿瘤的基因治疗：已有细胞因子疗法、“自杀基因” 疗法、反义核酸导入以及抑癌基因重组体导入等疗法。 五、基因治疗存在的问题及解决办法 (一)导入基因的持续表达：外周血淋巴细胞和皮肤成纤维 细胞等靶细胞寿命有限，需不断回输，持续表达。 (二)导入基因的高效表达：将高效启动子构建入逆转录病 毒载体以提高表达效率。 (三)安全性问题：逆转录病毒的潜在致癌危险；随机整合 可能激活原癌基因或失活抑癌基因而引起癌变。 2020/4/24 ****《医学遗传学》CAI教学 **** 14