Transcript 让健康、快乐陪伴您的研究生生活

实验室生物安全
眼科学国家重点实验室
实验室意外事故频发
2009年10月
北京理工大学爆炸
实验室内5人均受伤
原因：厌氧培养箱调试时发生气体爆炸
2008年7月
云南省微生物研究所实验室突发爆炸
1名博士研究生受伤
原因：收集实验废料时操作不当引发爆炸
2011年6月
实验室办公室被盗
笔记本一台，相机一部，财物若干
原因：外来人员趁周末入室盗窃

实验室常见意外







溢出和泼洒
针头和注射器刺伤
锐器、碎玻璃割伤
动物咬伤、抓伤
火灾、爆炸
穿白褂到处走
戴手套随意开门柄、接电话
紫外线损伤
台面/器皿不清洁
中毒
实验后不收拾
针头等尖利物品不放入利器盒
无安全意识
实验室生物安全
实验动物生物安全
化学品生物安全
临床实验室生物安全
病原微生物实验室安全
基因工程生物安全
放射性实验生物安全
实验动物的分级
一级：普通级动物
大动物（比格犬、恒河猴、小型猪等）
豚鼠、家兔
二级：清洁级动物
豚鼠、家兔
大、小鼠均为二级以上
三级：无特定病原体（SPF）动物
豚鼠、家兔
大、小鼠
四级：无菌级动物
裸鼠、无菌豚鼠、无菌大小鼠
实验动物使用过程生物安全的相关因素

动物因素
 完整的资料
 品种、品系、遗传背景或其来源清楚
 微生物检测状况
 质量合格证号、生产许可证号

实验环境和设施的配备
 隔离检疫室、饲养室、实验处置室、储存室等

实验操作者因素
 严格做好防护，穿工作服、戴帽子、手套、口罩
动物实验安全注意事项
 不同级别的动物在相应的环境中进行实验

不得将普通级动物带进屏障环境中实验

不得将带出屏障环境的实验动物，再带回屏障环境
 特殊改造的实验室

涉及传染性、中毒性、放射性、致癌性、致突变或
致畸性动物实验
实验动物废弃物处理

无污染的实验动物尸体


及时装入专用塑料袋密封后，当天送回动物中心，
不得随意丢弃
已污染或具有危险性的动物尸体及组织

按规定收集、分离、包装标识后，当天送回动物中
心，统一运输到特定场所焚烧
被动物咬了怎么办？



凡不能确定伤人动物是否健康，应立即对受伤部位进行彻底清洗和
消毒，越早越好，24-48小时内
SPF级动物咬伤，建议注射破伤风及流行性出血热抗毒素
彻底冲洗


严格消毒


2～3％碘酒或75％酒精涂于伤口
酌情处置




肥皂水、清水、碘制剂或乙醇等，冲洗20分钟
未伤及大血管的伤口不要缝合及包扎
较大伤口或比较严重的浅部伤口，清创消毒后，先用狂犬病免疫血清或
球蛋白浸润伤口，数小时后（不低于2小时）再予缝合包扎
伤口深而大者 放置引流条，并使用抗生素和破伤风抗毒素以控制感染
接种疫苗

越早越好。已受伤一段时间而未接种狂犬病疫苗者，也应按接种程序接
种疫苗
化学品生物安全
危险化学品标志
危险化学品的分类


爆炸品 受热、受压或撞击时产生爆炸或燃烧，如叠氮钠、TNT
压缩和液化气体
受热、撞击或强烈震动时，导致容器破裂爆炸或气瓶阀门松动漏气，酿成火灾或
中毒，如氧气泄漏时可能引起火灾；氮气、二氧化碳泄露可能引起窒息




氧化剂和有机过氧化物 高温、摩擦、撞击等易燃烧，甚至爆炸，如硝酸盐等
易燃液体 乙醚、乙醇、乙醛、苯、甲醇等
易燃固体 自燃和遇湿易燃，如金属钠、红磷等
有毒品
通过呼吸道、皮肤和消化道进入体内，引起刺激、过敏、缺氧、昏迷和麻醉、致癌、
致畸、致突 变、尘肺等

腐蚀品
强酸（浓盐酸、浓硫酸）、强碱（氢氧化钠）或其他腐蚀品（氯化铜、甲醛溶液）

放射性物品
钋、镭、钴等，高毒甚至剧毒
化学品的储存

在适宜的温度和湿度下储存化学品，须远离高热源，如
烤箱；避免阳光直射，如靠近窗台

定期目测原料和包装容器：颜色、是否溢出、腐蚀等

不得将化学品存放在实验台上，防止被碰倒

不得将化学品存放在地面上，即使是临时放置也不允许

不能将通风橱用作化学品的存放地，以免破坏通风橱的
通风效果

不得将易漏有害性或腐蚀性化学品存放在视力水平以上
的药品架上
危险就在你身边!
核酸技术：
溴化乙锭（EB）

强诱变剂，嵌入碱基分子中导致错配，高致癌性
Golden view

赛百盛称“未发现其有致癌作用”，但有报道其与吖啶橙（强
致癌剂高度相似其安全性有待进一步评价）
焦碳酸二乙酯（DEPC）

潜在致癌物质，吸入时毒性最强，使用时应戴口罩，通风橱中
进行
Trizol /Tri-reagent

含有苯酚，毒性和刺激性，皮肤接触后立即用大量去垢剂和水
冲洗
氯仿（三氯甲烷）

致癌剂，易挥发，损害肝和肾
危险就在你身边!
蛋白技术： Western blot
丙烯酰胺

中等毒性物质，可致癌，累积毒性，不易排毒，主要引起神经、

生殖与发育的毒性
NN-亚甲双丙烯酰胺

有毒，影响中枢神经系统，切勿吸入粉末
过硫酸铵（APS）

对黏膜、上呼吸道组织、眼睛和皮肤有极大危害性，吸入可致命
四甲基乙烯二胺（TEMED ）

强神经毒性，防止误吸，操作时快速，存放时密封
危险就在你身边!
蛋白技术： Western blot
二硫苏糖醇（DTT ）

吸入、咽下或皮肤吸收而危害健康
苯甲基磺酰氟（PMSF）

吸入、咽下或皮肤吸收而致命
十二烷基硫酸钠（SDS）

有毒，刺激性，高热分解放出有毒气体造成眼睛的严重损伤
甲醇

神经麻醉作用，引起脑水肿
危险就在你身边!
蛋白技术：免疫组化
叠氮钠（NaN3）

毒性非常大，可因吸入、咽下或皮肤吸收，操作时应非常小心
丙酮

微毒类，主要是对中枢神经系统的麻醉作用，能刺激眼睛
吉姆萨（Giemsa）

毒性，危害不可逆性，吸入或皮肤吸收，应在通风橱操作
甲醛（福尔马林）

毒性大，致癌，腐蚀性，易挥发，也通过皮肤吸收
危险就在你身边!
细胞培养技术：
二甲基亚砜（DMSO）
 对皮肤有极强的渗透性，与蛋白质疏水基团
作用，导致蛋白质变性，具有血管和肝肾毒
性，吸入高挥发浓度可致头痛，晕眩
临床实验室生物安全

临床样本均具有不同程度的潜在传染性

血液传播性病原体（如HBV和HIV）的操作应在BSL-2下进行

应由受过培训的人员采集患者的血样

操作时应戴手套及眼睛和粘膜的保护装置

血液和血清应当小心吸取，不能倾倒

适当的消毒剂来清洗喷溅和溢出的标本

感染性废物应经过灭菌和焚烧处理
病原微生物实验室安全
生物安全实验室的分级

一级生物安全实验室（BSL-1）


二级生物安全实验室（BSL-2）


对人或环境具有中等潜在危害的微生物
三级生物安全实验室（BSL-3）


对健康成年人已知无致病作用的微生物
主要通过呼吸道使人传染上严重甚至致死性疾病的微生物，
已有预防疫苗
四级生物安全实验室（BSL-4）

对人具有高度危险性，尚无有效疫苗或治疗方法的微生物
基因工程实验室操作注意事项
基因工程生物安全

所存在的危害是潜在的

应了解基因工程基本原理、实验目的及所操作
生物的属性

充分认识所用菌种、受体、载体、目的基因、
基因操作方法和基因工程产品的安全性

生物材料和垃圾排放以前需高压消毒
放射性实验室生物安全
放射性物质的危害

急性放射病

皮肤放射损伤

凝血、造血功能障碍

癌症

遗传性疾病
放射性实验室基本防护规程





放射性核素实验应在符合防护要求的专门实验室
和专用工作台进行
连续从事放射性操作1个月以上应配带剂量仪
遇到少量放射性液体溅洒在手脚等情况时，立即
用吸水材料吸干，再用湿布由外向里反复擦洗
短半衰期的放射性废物主要用放置衰变法处理
长半衰期的放射性废物采用焚烧法或埋存法处理
实验室不具备放射性核素实验条件
常用仪器使用的注意事项
离心机

在装载离心管后应正确平衡

离心管应始终牢固盖紧

放置好离心管后盖上盖子才可开始离心

离心机放置高度应使实验人员能看到离
心机内部

有危险性的微生物，必须使用可封口的
离心桶
常用仪器使用的注意事项
磁力搅拌器




烧杯、瓶子应确保没有裂缝
搅拌时用盖子或保鲜膜封盖
有毒物品应在通风橱中进行
因玻璃容易破碎，故建议使用塑料容器
常用仪器使用的注意事项
高压蒸汽消毒锅

灭菌条件组合


134oC 3min，126oC 10min，121oC 15min，115oC
25min
注意事项



受过培训的人员负责消毒和日常维护
物品应放在空气能排出并具有良好渗透性的容器中，包装稍
松散
待温度下降到80oC 以下后才可打开门取出物品
常用仪器使用的注意事项
冰箱与冰柜

应定期除霜及清洁，清理出破碎的物品

清理时应戴厚橡胶手套，必要时进行面部防护

储存在冰箱内的容器应标明内装物品的名称，
日期和储存者

不能放置易燃物品

应当保存一份冻存物品的清单
常用仪器使用的注意事项
超净工作台

提前30分钟开台内紫外灯杀菌后，再提前
20分钟开风机

工作台面上，不要存放不必要的物品，以
保持工作区内的洁净气流正常流动，不受
干扰
常用仪器使用的注意事项
微波炉

运转时，人需保持1米以上的距离，切忌用眼睛观察运
转情况，以免受到微波等的损害

加热结束，戴好防护手套再取出加热后的物品

不可将金属容器和带金银边的器皿放入炉中加热，应选
择耐热玻璃制品、陶瓷制品或微波炉专用盛器
注意：请遵守执行








带回实验室的动物应及时处理，不得长时间留在实验室，严
格防止实验动物逃出
使用一次性注射器，用过的针头禁止折弯、剪断等，禁止用
手直接操作
感染性物质不能使用移液管反复吹吸混合
细胞培养房废弃物应及时处理
废弃物应经过高压灭菌后在其他地方焚烧后再处理，或在指
定垃圾场掩埋
污染的器械应完全浸泡在盛有适当消毒液的防碎容器中
生物安全柜在使用中不能打开玻璃观察挡板
操作有毒物品应在通风橱中进行
注意：请遵守执行

工作期间必须穿专用白大褂、戴防护手套，必要时
戴穿防护服、防护镜、头部保护罩等

实验结束后收拾、清洁台面，洗手

不得将实验室有毒（或可疑有毒）物品带入办公室，
不得戴手套在办公室接听电话，使用电脑等

不得在实验室进食
遇到问题，不知如何处理时，一定立即向知
情同学请教或老师汇报，不能擅自处理
Thank you！