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수혈 검사시약과 혈액형 검사법 DB. LEE 1. 수혈검사 시약 가. ABO 혈청형 검사용 A1, B, O cells 1) A1, B cells * A1형과 B형 혈액을 0.85% 생리식염수 로 각각 2-5% 혈구 부유액 제조 * 규칙항체인 항-A, 항-B의 유무를 확 인 2) O cell 1. 수혈검사 시약 나. ABO 혈액형 검사용 항-A, -B, -A,B, -A1, -H 1) anti-A, anti-B * 고역가를 지니고 있는 사람의 혈청이나 동물(mouse)을 면역시켜 얻은 혈청으로 부터 제조 * anti-A는 trypan blue(청색)를, anti-B는 나. ABO 혈액형 검사용 항-A, -B, -A,B, -A1, -H 2) anti-A1 lectine * 아형 A1과 A2형을 구별하기 위해서 사 용하는 시약 * Dolichos biflorus라는 식물의 씨앗에서 추출(식물응집소) 3) anti-H lectin IgM항체에 의한 적혈구 응집 A, B, H, I, P, MN, lewis IgG항체에 의한 적 응집 Rho,혈구 Kell, Kidd, Duffy, Diego, Ss ◈ 직접 쿰스법 ◈ 간접 쿰스법 다. Rh혈액형 항혈청, 항인글로불린 시약 1) anti-D, -C, -c, -E, -e * 적혈구 세포막의 Rh-Hr 계열 항원의 유무를 감별하는 시약 * clone 항체를 EB virus형질 전환법 또 는 세포융합법 기술에 의해 생산 * 일반적으로 D항원 검출용으로 monoclonal anti-D (IgM monoclonal 항 체 + IgG polyclonal human항체)를 사용 라. 항원.항체 반응의 증강제 1) IgG 항체가 피복(감작)된 적혈구의 응 집을 증강시킴 2) albumin, polyethlene glycol(PEG) polybrene, pyrrollidone(PVP) 2. ABO혈액형 검사 가. ABO 혈액형 검사 1) slide(plate)법 * 검체의 혈구농도 40-50% + anti-A anti-B, anti-D ⇒ 응집유무 * 2) tube 법 가) 혈구형 검사 * 환자의 2-5% 혈구부유액 + anti-A anti-B, anti-D ⇒ 3,400rpm 15초 또는 1,000rpm 1분 원심 ⇒응집유무 * 혈구형 검사의 판정 2) tube 법 나) 혈청형 검사 * 환자의 혈청(혈장) + 2-5% A, B, O cell ⇒ 3,400rpm 15초 또는 1,000rpm 1분 원심 ⇒응집유무 * 혈청형 검사의 판정 3. Rh 혈액형 검사 가. Rh(D)형 검사 tube 법 * 환자의 2-5% 혈구부유액 + anti-D ⇒ 3,400rpm 15초 또는 1,000rpm 1분 원심 ⇒응집유무 * 검사술식과 결과판정 ◇ 나. 약 D형(weak-D) 검사 : 간접쿰스검사(indirect Coombs test) 1) 검사방법 가) 1단계 ① test 시험관 : 환자의 2-5% 혈구부유액 + anti-D + 22% bovine albumin ② control 시험관 : 환자의 2-5% 혈구부유액 + 22% bovine albumin 나) 2단계 * 각각의 시험관을 (37℃/15-30분) 에서 감작 water bath 2) 검사순서 도해 및 결과 판정