Transcript 第24章疱疹病毒
医学微生物学 Medical Microbiology 病原生物学教研室 Department of pathogenic Biology of Gannan Medical University 第24章 人类疱疹病毒 疱疹病毒（Herpes viruses） 有包膜 双链线状DNA病毒 二十面立体对称，核衣壳外脂蛋白膜 大多可在二倍体细胞复制，明显CPE 在感染细胞核内形成包涵体 仅次于流感病毒的引起人类病毒性疾病 的病原体 病毒 亚科 潜伏细胞 单纯疱疹病毒Ⅰ型 (HSV-1) α 感觉神经节 单纯疱疹病毒Ⅱ型 (HSV-2) α 感觉神经节 水痘－带状疱疹病毒 (VSV) α 感觉神经节 EB病毒 (EBV) γ B淋巴细胞 巨细胞病毒 (CMV) β 巨细胞、淋巴细胞、分泌腺 人疱疹病毒6，7 型 β 巨细胞、淋巴细胞、分泌腺 人疱疹病毒8型 γ 淋巴组织 疱疹病毒的结构 疱疹病毒基因组的特点 疱疹病毒的复制 疱疹病毒的感染 增殖感染 潜伏感染 整合感染 先天感染 疱疹病毒共同特点 1、病毒为球形，立体20面体，线性双 链DNA，披膜 ，包膜，表面刺突 2、除EB病毒外，均能在人二倍体细胞 核内复制，产生明显的细胞病变，核内 有嗜酸性包涵体，形成多核巨细胞 3、感染类型：增殖性感染、潜伏性感染、 整合感染和先天性感染 单纯疱疹病毒（herpes simplex virus， HSV） 基因组有四种异构体（L、S） 两种血清型HSV1、HSV2 病毒包膜有11种糖蛋白（gB～gM） gB gD—吸附有关； gD 与融合有关，是HSV1、HSV2的共同 抗原，而 gC gG是型特异性抗原。 gE- gJ与扩散及免疫逃避有 关. gH gI是重要致病蛋白； 控制病毒从细胞核膜出芽释放 （gH） 诱导细胞融合（ gC ） 诱生中和抗体(gD 最强) 免疫逃避 (gC, gE). 细胞毒作用（已知的HSV糖蛋白均可） 单纯疱疹病毒 可在多种细胞中增殖:人胚肺、人胚肾 出现CPE、嗜酸性核内包涵体 动物感染范围广泛：家兔、豚鼠、小鼠 流行病学 普遍易感，多为隐性感染 病人和健康带毒者是传染源 亲密接触与性接触为主要的传播途径 HSV-1一般通过口腔或污染的手及飞沫感染 HSV-2一般通过性接触传播 病变部位：HSV-1多腰部以上 HSV-2多腰部以下及生殖器 HSV-1与HSV-2所致疾病的比较 单纯疱疹病毒 原发感染 唇疱疹 齿龈炎 生殖器疱疹 潜伏感染和复发 HSV原发感染产生免疫力 部分病毒可沿神经髓鞘到达三叉神经节（HSV—1）和骶神 经节（HSV—2） 以潜伏状态与机体处于相对平衡，不引起临床症状 各种非特异性刺激下，潜伏的病毒激活增殖 病毒沿神经纤维索下行至感觉神经末梢，至附近表皮细胞 内继续增殖，引起复发性局部疱疹 特点是每次复发病变往往发生于同一部位，最常见在唇鼻 间皮肤与粘膜交界处出现成群的小疱疹 先天性感染 垂直传播或分娩时感染 HSV-2与宫颈癌的关系 有生殖器疱疹者，宫颈癌发病率高 宫颈癌患者HSV-2抗体阳性率高 宫颈癌脱落细胞中可查到HSV-2抗原 HSV-2可使细胞转化并诱生肿瘤 两者好发部位相似 宫颈癌细胞中有HSV-2基因片段及特异 mRNA存在 免疫性 原发感染后1周左右血中可出现中和抗体 3-4周达高峰，可持续多年 细胞免疫起更重要作用 NK细胞可特异性杀死HSV感染细胞 抗体介导的ADCC效应亦可将HSV感染细胞裂解 细胞毒性T细胞和各种淋巴分子（如干扰素等）在抗 HSV感染中也有重要意义 微生物学检查 病毒分离 采取病人口腔、宫颈、阴道分泌液等 接种易感细胞中培养1～2天 细胞肿胀，变圆，相互融合等病变，可作初步诊断 抗原检测 用IFA、ELISA等方法直接检测细胞内或分泌液中抗原，快速诊断 HSV感染。 抗体检测 补体结合试验，ELISA抗体，可用于原发感染诊断 复发感染时很难观察到抗体效价上升 检测脊髓液抗体，对神经系统HSV感染有重要意义 防治原则 预防 避免同患者接触 防止医院内感染 剖腹产预防新生儿感染 HSV有致癌可能性，减毒活疫苗和死疫苗不宜用于人体 包膜蛋白（提纯的gG、gD）亚单位疫苗 基因重组疫苗、多肽疫苗 治疗 国内用HSV gC gD单克隆抗体制成滴眼液，用于治疗疱疹性角 膜炎，取得显著疗效 无环鸟苷（ACV）及脱氧鸟苷对疱疹病毒选择性很强的药物 水痘-带状疱疹病毒（VZV） 人是VZV的唯一自然宿主 皮肤是病毒的主要靶细胞 可由同一种病毒引起两种不同的病症 儿童初次感染引起水痘 潜伏体内的病毒受到某些刺激后复发引 起带状疱疹，多见于成年人和老年人 VZV的基本性状 基本性状与HSV相似 只有一个血清型 对一般实验动物不敏 感，在人胚成纤维细 胞中增殖，并缓慢产 生细胞病变 水痘(Chicken Pox) 病毒 经呼吸道、结膜、 皮肤等处侵入人体 先在局部淋 巴结增殖 进入血液散布到各个 内脏继续大量增殖 皮肤广泛发生丘疹， 水疱疹和脓疱疹 2～3周潜伏期 带状疱疹（Shingles） 儿童时期患 过水痘愈合 在皮肤上沿着感觉神 经的通路发生串联的 水疱疹，形似带状 病毒潜伏在脊髓 后根神经节或脑 神经感觉神经节 中 该神经所支配的 皮肤细胞内增殖 机体免疫力下 降等条件刺激 病毒沿感觉神 经轴索下行 微生物检查及防治 水痘一带状疱疹的临床症状典型，一般 不需作微生物学诊断 VZV减毒活疫苗预防水痘感染和传播有良 好效果 治疗可用无环鸟苷、阿糖腺苷和高剂量 干扰素 巨细胞病毒（cytomegalovirus， CMV） 感染的细胞肿大，并具有巨大的核内包涵体， 故名 CMV具有典型的疱疹病毒形态，其DNA结构也与 HSV相似 有高度的种特异性，人巨细胞病毒（HCMV）只 能感染人 病毒在细胞培养中增殖缓慢，复制周期长 核内包涵体呈“猫头鹰眼”状 CMV的包涵体 巨细胞病毒 立即早期—IE蛋白（1H）：调节蛋白 早期—E蛋白（2~4H）：功能蛋白 晚期—L蛋白（36H）：结构蛋白 检测E、IE蛋白可用于早期快速诊断 致病性 通常呈隐性感染，少数感染者有临床症状 可长期带毒形成潜伏感染 潜伏部位常在唾液腺、乳腺、肾等 传播途径有接触感染、先天感染、血源性感染、 性感染等 所致疾病 先天性感染 通过胎盘侵袭胎儿。早产、流产、永久必性智力低下、 耳聋和脉络视网膜炎等 围产期感染 多无临床症状，可表现为迁延性肺炎或肝功能损伤 接触感染 亚临床型 输血感染 输血后的单核细胞增多症和肝炎 免疫功能低下时的感染 肝炎、间质性肺炎、视网膜炎、脑炎 细胞转化与致癌潜能 宫颈癌、结肠癌等中CMV DNA检出率高 免疫性 主要是细胞免疫 微生物学检查 尿等标本离心沉淀，姬姆萨染色镜检， 检查巨大细胞及核内和浆内嗜酸性包涵 体 分离培养可将标本接种于人胚肺纤维母 细胞中，培养24小时后用DNA探针进行 原位杂交，检测CMV DNA 葡聚糖液提取外周血单核细胞，制成涂 片，加CMV单克隆抗体，采用免疫酶或 荧光染色，检测细胞内抗原 ELISA检测lgM抗体和lgG抗体，适用于 早期感染和流行病学调查 PCR 治疗与预防 丙氧鸟苷（ganciclovir DHPG）有防止CMV 扩散作用 耐丙氧鸟苷的CMV感染可选用磷甲酸钠，但 效果比前者差 CMV病毒活疫苗致癌潜能的问题有待解决 CMV包膜糖蛋白的亚单位疫苗是研究的方向 EB病毒（Epstein-Barr virus，EBV） Epstein和Barr于1964年首次成功地将Burkitt非洲 儿童淋巴瘤细胞时发现，故名 形态结构与其它疱疹病毒相似 主要侵犯B细胞 在B细胞内引起两种形式的感染 增殖性感染 非增殖性感染 不同感染状态时表达的抗原不同 EBV的增殖性感染 病毒增殖，感染细胞溶解死亡 增殖性感染相关抗原 EBV早期抗原（EA） EBV衣壳抗原（VCA） EBV膜抗原（MA） 非结构蛋白，具DNA多聚酶活性 与病毒DNA组成EBV的核衣壳 EBV的中和抗原（gp320） EBV非增殖性感染 包括： 潜伏感染 病毒基因组处于潜伏状态 感染的B细胞的“转化”或“永生 化” 可被激活而转为增殖性感染 恶性转化 转化的B细胞受到某些条件的 促发，可发生染色体易位并致 癌变 潜伏感染相关抗原 EBV核抗原（EBNA） 感染和转化的B细胞核内均可检出 潜伏感染膜蛋白（LMP） 潜伏感染B细胞的表面抗原 致病性 EB病毒在人群中广泛感染 我国3～5岁儿童感染率达90%以上 主要通过唾液传播，也可经输血传染 EB病毒在口咽部上皮细胞内增殖，然后感染B 淋巴细胞 感染B细胞进入血循环可造成全身性感染 病毒可长期潜伏 所致疾病 传染性单核细胞增多症 非洲儿童淋巴瘤（即Burkitt淋巴瘤） 鼻咽癌 传染性单核细胞增多症 一种急性淋巴组织增生性疾病，多见于青春期初次感 染EBV后发病 三个典型症状为发热、咽炎和颈淋巴结肿大 随病情发展可出现肝脾肿大、肝功能异常，外周血单 核细胞增多，并出现异型淋巴细胞（可杀伤表面有 EBV抗原表达的B细胞） 非洲儿童淋巴瘤（即Burkitt淋巴瘤） 于中非、新几内亚和美洲温热带地区呈地方性流行 多见于5～12岁儿童 好发部位为颜面、腭部 所有BL病人血清均含EBV抗体，其中80%以上滴度 高于正常人 在肿瘤组织中发现EBV基因组 鼻咽癌 我国南方（广东、广西）及东南亚是鼻 咽癌高发区 多发生于40岁以上中老年人 EBV与鼻咽癌 在所有病例的癌组织中有EBV基因组存在和表达 病人血清中有高效价EBV抗原的lgG和 lgA 抗体（主 要VCA和EA） 。病情好转后，这些抗体的滴度也随之 下降 EBV与鼻咽癌 (1)鼻咽癌活检组织均可检出EBV的DNA和 EBNA (2)病人血清中有高效价EBV特异的VCA -IgA 或EA-IgA 抗体 (3)鼻咽癌细胞在裸鼠传代中有完整的EBV形 式 (4)鼻咽粘膜尚未发生恶变前已经查出这些抗 体，治疗后好转者，抗体效价下降 微生物学检查 EBV分离培养困难 可用核酸杂交和PCR等方法检测细胞内EBV基 因组及其表达产物 血清学诊断 EBV特异性抗体的检测 检测病毒VCA-IgA或EA-IgA抗 体，滴度≥1：5~1：10有诊断 意义 异嗜性抗体凝集试验 用于传染性单核白细胞增多症的 辅助诊断 防治原则 我国用基因工程方法构建的同时表达EBV gp320和HBsAg的疫苗，重点使用在鼻咽癌 高发区 gp320膜蛋白疫苗，正在英国大学生患者中作 小规模接种，以期观察该疫苗是否能降低传染 性单核细胞增多症的发病率 其它疱疹病毒 HHV-6对T细胞有高度的亲嗜性 HHV-6具疱疹病毒的典型特征 可感染多种细胞，生长缓慢，CPE 可对幼儿及免疫力低下者致病 从标本中分离到HHV-6可确认 其它疱疹病毒 HHV-7与HHV-6相似，可致 幼儿急疹 HHV-8是KS的致病因子