Transcript EVALU ELISA DIAGNÓST DE LE

EVALUACION DE LA TÉCNICA DE
ELISA INDIRECTA COMO TEST
DIAGNÓSTICO PARA LA DETECCION
DE LEPTOSPIROSIS HUMANA,
ICA-LNDV,2006
DOCENTE DIRECTOR:
MARIA CRISTINA VASQUEZ
ESTUDIANTES QUE PARTICIPAN EN EL PROYECTO:
EDWARD JOHNNY ZAMBRANO MORA
ELIDA MAYERLITH PINTO SAAVEDRA
ENITH CASTILLA GOMEZ
INSTITUCIONES PARTICIPANTES
UDES
ICA
BIOGENIX
INTRODUCCION
TAXONOMIA
FAMILIA
Spirochaetacea
Trepomonema
Leptospiraceae
Borrelia
Leptospira
Interrogans
(180 serotipos)
18 subgrupos
Biflexa
(60 serovares)
SEROGRUPOS Y SEROVARES MAS
REPRESENTATIVOS DE L. Interrogans
SEROGRUPOS
SEROVAR (ES)
Australis
australis , bratislava , lora
Autumnalis
autumnalis , forbragg , bim , weerasinghe
Ballum
ballum , aroborea
Bataviae
bataviae
Canicola
canicola
Celledoni
celledoni
Cynopteri
cynopteri
Djasiman
djasiman
Grippotyphosa
grippotyphosa , canalzonae, ratnapura
Hebdomadis
hebdomadis , jules , kremastos
Hurstbridge
hurstbridge
Icterohaemorrhagiae
icterohaemorrhagiae , copenhageni , lai
Zimbabwe
SEROGRUPOS Y SEROVARES MAS
REPRESENTATIVOS DE L. Interrogans
SEROGRUPOS
SEROVAR (ES)
Javanica
javanica , poi
Louisiana
louisiana , lanka
Manhao
manhao
Mini
mini , georgia , swajizak
Panama
panama , mangus
Pomona
pomona
Pyrogenes
pyrogenes
Ranarum
ranarum
Sarmin
sarmin
Sejroe
sejroe,saxkoebing,hardjo
Semaranga
patoc
Shermani
shermani
Tarassovi
tarassovi
Pumarola, 1994; Levett, 2001. (Modificado)
RESERVORIOS Y SUS SEROVARES
ESPECIE
SEROVAR
Ganados y
búfalos
hardjo,
pomona,
icterohaemorragiae,
bratislava, canícola, tarassovi
Cerdos
Perros
Caballos
Pumarola, 1994; Levett, 2001. (Modificado)
pomona, tarassovi, bratislava
Canicola,bratislava, pomona,
grippotyphosa,
icterohaemorragiae
grippotyphosa,
icterohaemorragiae
LEPTOSPIROSIS
ANTROPOZOONOSIS DE
DISTRIBUCION MUNDIAL
ANIMALES
SILVESTRES
HOSPEDADOR
DE
MANTENIMIENTO
ANIMALES
DOMESTICOS
HOMBRE
HOSPEDADOR
ACCIDENTAL
DENGUE HEMORRRAGICO
HEPATITIS VIRAL
INFECCIONES POR HANTAVIRUS
EPIDEMIOLOGIA
Los países tropicales y subtropicales son los más afectados por sus condiciones
climáticas.
Precipitación
Temperatura
Humedad relativa
Son favorables para la
presentación de Leptospira.
El pH, estructura
La composición de suelo
• La OMS ha estimado una tasa de incidencia en humanos
entre 4-100 casos por 100 000 habitantes en estos países (22).
EPIDEMIOLOGIA
La seropósitividad de estudios hechos indican (2):
México
14.1%,
Colombia
18.5%,
El salvador
17.5%,
Brasil 9.8%
Argentina
3.8%
EPIDEMIOLOGIA
SEROVARES MAS FRECUENTES ENCONTRADOS EN COLOMBIA
.
TOMADO DE :Acosta Helbert, Moreno Carlos Hugo, Viafara B Daniel. Leptospirosis. Revision de tema, Colombia médica, Universidad del Valle, Cali, 1994 ; 25: 36-42
TRANSMISION
PATOGENIA Y SINTOMAS
FORMA
ICTERICA
FORMA
ANICTERICA
DIAGNOSTICO
TECNICAS O METODOS
DIRECTOS
INDIRECTOS
Observacion de campo oscuro
MAT
Tinciòn argenica
Msat
Fijación del complemento
Tinciòn inmunohistoquimica
ELISA
Deteccion de acidos nucleicos
Aislamiento
Aglutinación microscópica
Aglutinación en microcapsula
Hemoaglutinación indirecta
DIAGNOSTICO
TECNICA DE MICROAGLUTINACION (MAT)
Detectar
anticuerpos aglutinantes en sueros
Enfrentar a Ag
(cultivos vivos de Leptospiras).
NEGATIVO
Se divide en dos etapas
Cualitativa
POSITIVO
Cuantitativa
Determinar el titulo exacto de un suero si este contiene anticuerpos
contra Leptospiras,
DIAGNOSTICO
MAT
FASE
CUALITATIVA
Determina la presencia de
Ac sin precisar el titulo
exacto del suero.
Si se observa el 50%
de las Leptospiras aglutinan
se reporta el resultado
con un titulo de 1:100
FASE
CUANTITATIVA
Determina el titulo
exacto del suero.
DIAGNOSTICO
DESVENTAJAS MAT
Necesidad de una infraestructura adecuada y de
personal especializado y entrenado para su montaje,
lectura e interpretación.
Mantenimiento continuo de las cepas
7 a 15 días .
Ag.
+ aglutinante
La selección de los antígenos es un punto de vital
importancia, cuando se comienza a trabajar en una
zona donde no se conoce la prevalencia serológica.
Con respecto a los serovares utilizados en cada
batería no existe estandarización en la selección de
los mismos.
Dif result
DIAGNOSTICO
VENTAJAS DEL ELISA
Los laboratorios tienen capacitación, conocimiento y
equipos necesarios para el procesamiento de una
prueba de ELISA .
disminuye los riesgos en Bioseguridad, además en el
mercado se encuentra un kit comercial con un costo
razonable.
Elisa IgM se muestra mas sensible que el MAT en el
comienzo de la fase aguda (11) permitiendo brindar un
diagnostico diferencial oportuno con otras patologías
de origen viral que presentan sintomatología similar.
Por su rapidez la prueba de ELISA permite una
confirmación diagnostica rápida y segura, útil también
en situaciones epidémicas o brotes, posibilitando dirigir
medidas de vigilancia y control epidemiológico.
(Manuel Céspedes)
OTROS METODOS
SEROLOGICOS
LeptoTek Dri Dot Ensayo:
Aglutinacion en latex con suero.
LEPTO Dipstick Ensayo:
Detecta rápidamente anticuerpos IgM
específicos de Leptospira en sangre total.
LeptoTek Flujo Lateral Ensayo:
Detecta anticuerpos IgM específicosLeptospira en suero humano o las muestras de
sangre total.
FC y PCR DE LCR
FIEBRE AMARILLA:
Duración de la viremia mas corta
DENGUE:
Intensidad de dolores musculares es mayor
en dengue
HEPATITIS:
Inicio de fiebre menos brusco y de menor
intensidad, desaparece cuando comienza la
Ictericia
MENINGOENCEFALITIS:
LCR: leucocitosis – Meningitis bacteriana
MALARIA:
Hepatoesplenomegalia y anemia
Protección de trabajadores mediante el uso de
calzado y vestimentas apropiadas (botas,
delantal, guantes, antiparras, tapaboca).
Higiene personal y del ambiente doméstico.
Impedir el ingreso de animales al interior de los
domicilios.
Higiene y desinfección en los locales de ordeñe
así como de las máquinas o instrumentos.
Control de roedores.
Inmunización.
Antibioticoterapia.
Educación a la poblaciones de riesgo.
Limpieza y desinfección de los domicilios que se
inundan con solución de hipoclorito.
Vacunación de la población canina.
Vigilancia epidemiológica de las poblaciones
consideradas de mayor riesgo.
Educación y difusión de las posibles formas de
adquirir la enfermedad y como evitarla.
Medidas de prevención, protección y control para
los animales.
Realizar el aislamiento de cepas de Leptospira
spp. en distintas especies para conocer los
serovalentes involucrados.
Realizar estudios de reservorios silvestres.
Realizar estudios epidemiológicos para estudiar
la evolución de la enfermedad.
Implementar programas de control de roedores
e higiene ambiental.
PLAN DE VACUNACIÓN
Primo vacunación: Se vacunan todos los
animales del establecimiento,
machos, hembras y terneros.
2da. Dosis a los 21 días de la 1ra
dosis
Revacunaciones en forma anual o
semestral de acuerdo al laboratorio
productor.
Machos: vacunar antes de entrar al
servicio para proteger al rodeo.
Hembras: vacunar antes del servicio
y
previo a la parición.
Terneros: vacunar a los 2 meses de
edad y luego revacunar.
Notificación obligatoria ( Brasil, Cuba y
Uruguay).
CASO SOSPECHOSO:
a) Caso notificado hasta demostración de lo
contrario en la epidemiología.
b) signos y síntomas sugestivos de la Enf mas
Epidemiología compatible.
CASO CONFIRMADO:
a)
Aislamiento de leptospiras.
b)
Serología positiva mediante la prueba
de aglutinación microscópica (MAT) 2 mx
PREGUNTAS
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PREGUNTAS
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GRACIAS