实验八 果蝇的三点测交 雌 雄 湖州师范学院 生命科学学院生物系 《遗 传 学》校 级 精 品 课 程 一、实验目的 1、掌握三点测交的原理及方法; 2、学习三点测交的数据统计处理及分析方法; 3、了解绘制遗传学图的原理和方法 《遗 传 学》校 级 精 品 课 程.
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实验八 果蝇的三点测交
雌
雄
湖州师范学院
生命科学学院生物系
《遗 传 学》校 级 精 品 课 程
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一、实验目的
1、掌握三点测交的原理及方法;
2、学习三点测交的数据统计处理及分析方法;
3、了解绘制遗传学图的原理和方法
《遗 传 学》校 级 精 品 课 程
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二、实验材料
黑腹果蝇(Drosophila
melanogaster)品系:
野生型果蝇(+++): 红眼、长翅、直刚毛
三隐性果蝇(wmsn3):白眼、小翅、焦刚毛
三隐性个体:
白眼(w)、小翅(m)、焦刚毛(sn3),
这三个基因都位于X染色体上。
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三、实验仪器设备、药品
体视显微镜、恒温培养箱、培养瓶、
麻醉瓶、毛笔、滤纸、培养皿等。
乙醚、玉米粉、琼脂、红塘、酵母粉、
丙酸等。
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四、实验原理
位于同一条染色体上的基因是连锁的,而同源染色体上
的基因之间会发生一定频率的交换,使子代中出现一定数
量的重组型。
重组型出现的多少反映出基因间发生交换的频率的高低。
而根据基因在染色体上直线排列的原理,基因交换频率
的高低与基因间的距离有一定的对应关系。
基因图距就是通过基因间重组值的测定而得到的。
如果基因座位相距很近,重组率与交换率的值相等,直
接将重组值作为基因图距;如果基因间相距较远,两个基
因间往往发生两次以上的交换,必须进行校正,来求出基
因图距。
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四、实验原理
三点测交:用野生型纯合体与三隐性个体杂交,获
得三因子杂种(F1),再使F1与三隐性基因纯合体
测交,通过对测交后(Ft)代表现型及其数目的分
析,分别计算三个连锁基因之间的交换值,从而确
定这三个基因在同一染色体上的顺序和距离。
通过一次三点测验可以同时确定三个连锁基因
的位置,即相当于进行三次两点测验,而且能在试
验中检测到所发生的双交换。
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四、实验原理
如果两个基因间的单交换并不影响邻近两个基因
的单交换,那么预期的双交换频率应当等于两个单交
换频率的乘积,但实际上观察到的双交换值往往低于
预期值,因为每一次发生单交换,它邻近也发生一次
交换的机会就减少,这叫干涉。一般用并发率表示干
涉的大小。
观察到的双交换频率
并发率= 两个单交换频率的乘积
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四、实验原理
m
♀
P:
sn3
w
+
+
+
(♂)
×
m
sn3
♀
F1:
w
m
sn3
w
+
+
+
m
sn3
w
×
(♂)
(测交)
雌蝇X染色体上三对基因之间
发生交换重组,产生8种雌配子
+
m
sn3
m
+
+
sn3 w
m
w
+
sn3
m
+
w
+
+
w
m
sn3
sn3
w
+
m
+
sn3
w
+
m
sn3
+
m
+
w
+
sn3 w
+
+
w
+
sn3
+
+
+
+
+
+
+
+
m
+
+
+
m
sn3 w
雄蝇产生两种配子
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四、实验原理
因为F1代雄蝇为三隐性个体,所以F1代雌雄
蝇自交时,即测交,F2(Ft)代可以得到8种表
型。
F2 (Ft)中亲组合最多,而发生双交换的表
现型个体数应最少。
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五、实验步骤
1、选处女蝇:每组正、反交各1瓶,在8-12h内收集处女
蝇5-6只,可提前2-3天收集。
2、杂交:将处女蝇、雄蝇各5-6只,麻醉、转移到新的
杂交瓶中,确保杂交瓶中各只果蝇完全苏醒,没有
死蝇。贴好标签,注明杂交组合、日期、姓名,于
25℃培养;
3、释放亲本:7d后,处死杂交亲本(一定要干净) 。
4、观察F1:再过4-5天,F1成蝇出现,连续观察2—3天,
或在处死亲本7天后,集中观察记录F1表型。 要求
每组至少统计250只果蝇。
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五、实验步骤
4、 F1互交:选取5-10对F1果蝇,转入一新培养瓶(不
需处女蝇,正交和反交F1不能混),贴好标签,于25℃
培养。
5、释放亲本: 7d后,杀死F1代亲本果蝇。
6、观察F2: 再过4-5d,F2成蝇出现,开始观察眼色,
翅形及刚毛形态,同时记录F2各种性状果蝇的数目 ,
连续统计7-8d。
注意:(1)要求每组至少统计250只果蝇。
(2)如果做正交只需统计雄性个体。
(3)统计过的果蝇放入酒精瓶中,杀死 。
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六、实验报告
1、将观察到的F2代(包括正交和反交)各表型个
体数填入书本P17表5-1中,确定基因间重组发生的
情况;
2、计算基因间的重组值及双交换值;
3、根据计算结果画出遗传学图。注意用双交换值
对位于两端的基因间距离进行校正;
4、计算并发系数和干涉值。
七、思考题
正交组合F2统计为什么只需统计雄性个体?其雌性
个体F2代个体的表型如何?
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雌
雄
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一、实验目的
1、掌握三点测交的原理及方法;
2、学习三点测交的数据统计处理及分析方法;
3、了解绘制遗传学图的原理和方法
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二、实验材料
黑腹果蝇(Drosophila
melanogaster)品系:
野生型果蝇(+++): 红眼、长翅、直刚毛
三隐性果蝇(wmsn3):白眼、小翅、焦刚毛
三隐性个体:
白眼(w)、小翅(m)、焦刚毛(sn3),
这三个基因都位于X染色体上。
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三、实验仪器设备、药品
体视显微镜、恒温培养箱、培养瓶、
麻醉瓶、毛笔、滤纸、培养皿等。
乙醚、玉米粉、琼脂、红塘、酵母粉、
丙酸等。
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四、实验原理
位于同一条染色体上的基因是连锁的,而同源染色体上
的基因之间会发生一定频率的交换,使子代中出现一定数
量的重组型。
重组型出现的多少反映出基因间发生交换的频率的高低。
而根据基因在染色体上直线排列的原理,基因交换频率
的高低与基因间的距离有一定的对应关系。
基因图距就是通过基因间重组值的测定而得到的。
如果基因座位相距很近,重组率与交换率的值相等,直
接将重组值作为基因图距;如果基因间相距较远,两个基
因间往往发生两次以上的交换,必须进行校正,来求出基
因图距。
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四、实验原理
三点测交:用野生型纯合体与三隐性个体杂交,获
得三因子杂种(F1),再使F1与三隐性基因纯合体
测交,通过对测交后(Ft)代表现型及其数目的分
析,分别计算三个连锁基因之间的交换值,从而确
定这三个基因在同一染色体上的顺序和距离。
通过一次三点测验可以同时确定三个连锁基因
的位置,即相当于进行三次两点测验,而且能在试
验中检测到所发生的双交换。
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四、实验原理
如果两个基因间的单交换并不影响邻近两个基因
的单交换,那么预期的双交换频率应当等于两个单交
换频率的乘积,但实际上观察到的双交换值往往低于
预期值,因为每一次发生单交换,它邻近也发生一次
交换的机会就减少,这叫干涉。一般用并发率表示干
涉的大小。
观察到的双交换频率
并发率= 两个单交换频率的乘积
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四、实验原理
m
♀
P:
sn3
w
+
+
+
(♂)
×
m
sn3
♀
F1:
w
m
sn3
w
+
+
+
m
sn3
w
×
(♂)
(测交)
雌蝇X染色体上三对基因之间
发生交换重组,产生8种雌配子
+
m
sn3
m
+
+
sn3 w
m
w
+
sn3
m
+
w
+
+
w
m
sn3
sn3
w
+
m
+
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+
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m
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w
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sn3 w
+
+
w
+
sn3
+
+
+
+
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+
m
+
+
+
m
sn3 w
雄蝇产生两种配子
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四、实验原理
因为F1代雄蝇为三隐性个体,所以F1代雌雄
蝇自交时,即测交,F2(Ft)代可以得到8种表
型。
F2 (Ft)中亲组合最多,而发生双交换的表
现型个体数应最少。
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五、实验步骤
1、选处女蝇:每组正、反交各1瓶,在8-12h内收集处女
蝇5-6只,可提前2-3天收集。
2、杂交:将处女蝇、雄蝇各5-6只,麻醉、转移到新的
杂交瓶中,确保杂交瓶中各只果蝇完全苏醒,没有
死蝇。贴好标签,注明杂交组合、日期、姓名,于
25℃培养;
3、释放亲本:7d后,处死杂交亲本(一定要干净) 。
4、观察F1:再过4-5天,F1成蝇出现,连续观察2—3天,
或在处死亲本7天后,集中观察记录F1表型。 要求
每组至少统计250只果蝇。
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五、实验步骤
4、 F1互交:选取5-10对F1果蝇,转入一新培养瓶(不
需处女蝇,正交和反交F1不能混),贴好标签,于25℃
培养。
5、释放亲本: 7d后,杀死F1代亲本果蝇。
6、观察F2: 再过4-5d,F2成蝇出现,开始观察眼色,
翅形及刚毛形态,同时记录F2各种性状果蝇的数目 ,
连续统计7-8d。
注意:(1)要求每组至少统计250只果蝇。
(2)如果做正交只需统计雄性个体。
(3)统计过的果蝇放入酒精瓶中,杀死 。
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六、实验报告
1、将观察到的F2代(包括正交和反交)各表型个
体数填入书本P17表5-1中,确定基因间重组发生的
情况;
2、计算基因间的重组值及双交换值;
3、根据计算结果画出遗传学图。注意用双交换值
对位于两端的基因间距离进行校正;
4、计算并发系数和干涉值。
七、思考题
正交组合F2统计为什么只需统计雄性个体?其雌性
个体F2代个体的表型如何?
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