Transcript Les lymphocytes T CD4 naifs ANRS-EP38

ANRS-EP38-IMMIP
AG 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre
Florence Buseyne
F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre
ANRS-EP38-IMMIP
Inclusions et caractéristiques des sujets
93 patients inclus Février 2007-Février 2009
prélèvement sanguin unique
Infection périnatale par le VIH-1
>15 ans
Statut thérapeutique inchangé depuis au moins 6 mois
Age médian : 17 ans (15-24)
57% Filles
85% HAART, dont 75% ARN VIH <80 copies/ml
66% CD4 > 500 cellules/µl
F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre
ANRS-EP38-IMMIP : Objectifs
Naissance --------- >15 ans
Clinique
Traitement
CD4
Virus
Le statut
immunitaire et
virologique
actuel
Analyses univariées : Wilcoxon/Spearman ou Pearson
Analyses multivariées : régression linéaires
F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre
Différentiation des lymphocytes T (CD4 et CD8)
Périphérie
Tissus lymphatiques
Moelle
osseuse
Thymus
Mémoire
Naive Naive
Mémoire
Mémoire
Naive
Antigène
Mémoire
Mémoire
Naive
Naive
Destruction
La taille du compartiment T naif est liée à la diversité du répertoire et
la capacité des lymphocytes T à contrôler de nouvelles infections
F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre
VIH
Méthode : analyse des cellules du sang
périphérique par cytométrie en flux
central
naive
effecteur
Adapté de Maecker, NRI, 2012
F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre
Les proportions de lymphocytes T CD4 naifs sont
préservées chez les sujets de l’étude
100
100
80
80
% Naive CD8
% Naive CD4
«Témoin » : intra-laboratoire, adultes non infectés VIH et non infectés VHC
60
40
20
60
40
20
0
Non infectés
0
IMMIP
Non infectés
IMMIP
«Témoin » : Littérature
CD4
Médiane
(10-90th)
CD8
Médiane
(10-90th)
IMMIP
15-24 ans
56 (37-70)
31 (15-56)
Non infectés
(US 12-18 ans)
51 (31-65)
56 (42-73)
Buseyne
Shearer, JACI,F. 2003
CD4
Médiane
(25-75th)
CD8
Médiane
(25-75th)
IMMIP
15-24 ans
56 (44-64)
31 (22-45)
Non infectés
(US Adultes)
50 (41-58)
52 (41-59)
05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre
Roederer, JCI, 1995
Les proportions de lymphocytes T CD4 et CD8 naifs
sont corrélés au nombre de lymphocytes T CD4
=0.387 p=0.04
100
80
CD8N (%)
80
60
40
20
60
40
20
0
0
0
500
1000
1500
0
500
CD4/µl
1000
CD4/µl
=0.330 p=0.004
100
80
CD8N (%)
CD4N (%)
=0. 656 p<0.0001
100
60
40
20
0
0
20
40
60
80
CD4N (%)
F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre
100
1500
Les proportions de lymphocytes T CD4 et CD8
naifs ne sont pas liées à l’âge/durée d’infection
par le VIH
=-0.261 p=0.17
100
80
80
CD8N (%)
CD4N (%)
=0.030 p=0.79
100
60
40
20
60
40
20
0
0
15
20
25
15
Age (yrs)
20
25
Age (yrs)
Pas d’association avec l’âge au nadir de CD4, ni avec l’âge à l’initiation des HAART
F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre
Différentiation des lymphocytes T CD4 et CD8 et
les infections virales
Naive
Naive
VIH
Antigène
CMV
Mémoire
Mémoire
Mémoire
Mémoire
Mémoire
Naive
Naive
Destruction
VIH
Les infections par le VIH et le CMV induisent
une diminution des % de lymphocytes T naifs chez l’adulte
F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre
VIH
Les proportions de lymphocytes T CD8 naifs sont
diminués chez les sujets ayant une réplication active du
VIH et chez les sujets co-infectés par le CMV
100
p<0.0001
80
CD8N (%)
80
CD8N (%)
p<0.0001
100
60
40
20
60
40
20
0
0
< 80 copies/ml
>= 80 copies/ml
plasma HIV RNA
F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre
Negative
Positive
CMV serology
Les proportions de lymphocytes T CD4 naifs ne
sont pas diminués chez les sujets ayant une
réplication active du VIH et chez les sujets coinfectés par le CMV
100
p=0.10
80
80
CD4N (%)
CD4N (%)
p=0.46
100
60
40
20
60
40
20
0
0
< 80 copies/ml
>= 80 copies/ml
plasma HIV RNA
Résultat paradoxal
lien CD4 chez les sujets de l’étude
Littérature adultes Mildvan JID 2004
F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre
Negative
Positive
CMV serology
Suite de la présentation
Histoire de la maladie et lymphocytes naifs
→ Analyses stratifiées selon ARN VIH plasmatique au
moment du prélèvement (interactions)
Présentation limitée :
→ aux sujets dont l’ARN VIH était < 80 copies/ml au moment
du prélèvement
→ aux lymphocytes T CD4
F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre
Les proportions de lymphocytes T CD4 naifs sont
positivement corrélés avec la virémie cumulée
au cours des 10 ans précédant le prélèvement
=0.336 p=0.01
100
80
80
CD4N (%)
CD4N (%)
=0.224 p=0.11
100
60
40
20
60
40
20
0
0
5000
10000
15000
20000
Virémie cumulée 10 ans
(log10 (ARNVIH) x jours)
0
1
Sujets ARN VIH < 80 copies/ml au moment du prélèvement
F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre
2
3
log10 (HIV DNA copies/106 PBMCs)
4
Les % de lymphocytes T CD4 naifs sont plus
élevés chez les sujets ayant des virus X4R5
Tropisme génétique =virus « archivé »
Virus X4R5/R5 :
-Stades avancés de la maladie (déplétion CD4)
-Plus infectieux pour les lymphocytes T CD4 naifs
que les virus R5
p=0.001
100
CD4N (%)
80
60
40
20
Sujets ARN VIH < 80 copies/ml au moment du prélèvement
0
R5
X4R5
Tropisme
F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre
Les % de lymphocytes T CD4 naifs ne sont pas
liés à la sévérité clinique/immunologique de la
maladie
p=0.18
100
80
CD4N (%)
80
CD4N (%)
=0.107 p=0.58
100
60
40
20
60
40
20
0
non C
C
0
0
stade CDC
10
20
CD4 nadir (%)
Sujets ARN VIH < 80 copies/ml au moment du prélèvement
F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre
30
Les % de lymphocytes T CD4 naifs « émigrants
thymiques récents »
Kohler, Blood 2009
L’expression de la molécule CD31 définit deux populations de lymphocytes T CD4 naifs
Le % de lymphocytes T CD4 naifs CD31+ parmi les lymphocytes naifs est un marqueur
de l’activité thymique
PBMC congelés, n=57, cytométrie en flux
F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre
Les % de lymphocytes T CD4 naifs « émigrants
thymiques récents » sont plus élevés chez les
sujets ayant un ARN VIH plasmatique détectable
%CD4NCD31+ parmi CD4N
p=0.003
100
90
80
70
60
50
< 80 copies/ml
>= 80 copies/ml
ARN VIH plasmatique
Tous les sujets de l’étude
F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre
<15 ans :80-95%
20-30 ans : 60-80%
Kimmig JEM 2002
%CD4NCD31+ parmi CD4N
Les % de lymphocytes T CD4 naifs « émigrants
thymiques récents » sont positivement corrélés
au nombre de lymphocytes T CD4
=0.487 p=0.002
100
90
80
70
60
50
0
500
1000
1500
CD4/µl
= %CD4 naifs
Sujets ARN VIH < 80 copies/ml au moment du prélèvement
F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre
=-0.536 p=0.0004
100
%CD4NCD31+ parmi CD4N
%CD4NCD31+ parmi CD4N
Les % de lymphocytes T CD4 naifs « émigrants
thymiques récents » sont négativement corrélés à
l’immunosuppression antérieure, ne sont pas liés à
l’histoire virologique antérieure
90
80
70
60
50
0
50
100
150
Durée CD4%<15% (mois)
=-0.159 p=0.33
100
90
80
70
60
50
0
5000
10000
15000
Virémie cumulée 10 ans
(log10 (ARNVIH) xjours)
≠ %CD4 naifs
Sujets ARN VIH < 80 copies/ml au moment du prélèvement
F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre
Analyses multivariées
Sujets ARN VIH indétectable-%CD4 naifs
Estimate
Naive T CD4
[ 95% CI]
P
(% among CD4 lymphocytes)
Age
15-17 years
18-19 years
20-24 years
CD4 cell count
Per 100 cells/µl
Viral tropism
X4R5
R5
Cumulative viremia (10 yrs)
Per 1000 log10 copie x days
Reference
2.7
-2.4
0.54
[-4.8;10.3]
[-11.0;6.2]
1.7
[0.40;3.99]
Reference
-9.9
[-16.4;-3.5]
0.90
[-0.12;1.93]
F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre
0.01
0.004
0.08
Analyses multivariées
Sujets ARN VIH indétectable-%CD4 RTE
Estimate
CD4 RTE
[ 95% CI]
P
(% among naive CD4)
Age
15-17 years
18-19 years
20-24 years
Reference
-2.4
-1.1
[-6.4;1.6]
[-5.5;3.4]
CD4 cell count
Per 100 cells/µl
0.93
[0.21;1.65]
0.01
Lifetime duration of CD4% <15%
Per 100 months
-5.7
[-10.3;-1.1]
0.02
Sex
Male
Female
Plasma IL-10 (100x per pg/ml)
0.47
Reference
4.5
[1.0;8.0]
1.3
[-0.2;2.9]
F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre
0.01
0.09
Conclusions
Les proportions de lymphocytes T CD4 naifs et l’activité thymique (%RTE)
→ Sont positivement corrélées au nombre de lymphocytes T CD4 (≈adultes)
Li CID 2011
→ Ne sont pas diminuées/sont augmentées par la réplication du VIH (≠ adultes)
Comparaison sujets ARN VIH détectable/indétectable
Histoire virologique chez les sujets ARN VIH indétectable (%CD4 naifs)
Interprétation : chez les sujets de l’étude IMMIP, la destruction des lymphocytes
T CD4 par la réplication du VIH est compensée par une production accrue de
lymphocytes T CD4 naifs
Décrit chez l’enfant infecté Saitoh JID 2006
Décrit chez certains adultes (<40 ans) et avant immunosuppression
sévère McCune JCI 1998, Gautier JVirol 2007 Nobile Blood 2004
F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre
Discussion
Maintien d’une activité thymique élevée et de proportions de
lymphocytes T CD4 naifs préservées avec ou sans suppression de la
réplication virale
→ Résultat remarquable compte tenu des caractéristiques des sujets IMMIP
médiane 17 ans après l’infection,
nadir %CD4 = 8% (5-11)
Puberté : début involution du thymus (Mackall, NEJM, 1995)
→ Chez les sujets IMMIP : Equilibre virologique/immunologique a des
caractéristiques « pédiatriques », déjà observé via l’absence d’association
ADN VIH-CD4 si réplication est supprimée (Avettand-Fenoel, JID, 2012)
→ Un bémol : Chez les sujets avec suppression de la réplication virale, la
proportion de RTE est négativement corrélée à la durée
d’immunosuppression sévère
→ Une inconnue : combien de temps cette activité thymique élevée va-t-elle
durer?
→ Work in progress : impact des autres mécanismes immunologiques
(activation, homéostasie, …)
F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre
Remerciements
INSERM U1018
Y. Benmebarek
N. Bouallag-Bonnet
J. Lechenadec
J. Warszawski
ANRS
M. Trumeau
L. Marchand
Sites hospitaliers ANRS-CO-10
S. Blanche, F. Veber,
M.C. Mourey
A. Chacé, M. Bonnard
C. Dollfus, G. Vaudre
G. Firtion, N. Boudjoudi
M. Levine, A. Faye, C. Poder,
S. Leveillé
A. May
J.P.Viard, A. Maignan
C. Floch-Tudal
S. Lemerle
V. Jeantils, S. Tassi
Support financier
ANRS
Fondation AREVA
F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre
Laboratoire de virologie-EA3620
U. René Descartes
V. Avettand-Fenoel
C. Rouzioux
Institut Pasteur de Paris
UPIPV puis EPVO
F. Buseyne
C. Clairet
P. Louche
T. Montange
Y. Rivière
URIR
C. Didier
D. Scott-Algara
F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre
%CD4NCD31+ parmi CD4N
Les % de lymphocytes T CD4 naifs
« émigrants thymiques récents » sont plus
élevés chez les filles
p=0.002
100
90
80
70
60
50
M
F
Sexe
Sujets ARN VIH < 80 copies/ml au moment du prélèvement
F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre