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TITULAR: DR. IVÁN SALMERON OCHOA
AIDA ELIANETH BERNABÉ MALDONADO 205206
MÉTODOS RÁPIDOS DE IDENTIFICACIÓN DE
MICROORGANISMOS
DETECCIÓN
RECUENTO
MICROORGANISMOS
CARACTERIZACIÓN
SUBTIPIFICACIÓN
MÉTODOS RÁPIDOS
FISICO-QUÍMICAS
• Películas de medios de cultivo deshidratados
generales o selectivos.
• Medios cromogénicos y fluorogénicos
• Enzimoinmunoensayo
• Aglutinación
INMUNOLÓGICAS
• Radioinmunoensayo
• Inmunocromatografía
• Citometría
MÉTODOS RÁPIDOS
• Hibridación
MOLECULARES
• PCR
• Biochips
BIOQUÍMICAS
• Galerías miniaturizadas y automatizadas
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I
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M
:
3
M
PELÍCULAS DE MEDIOS DE CULTIVO DESHIDRATADOS
GENERALES O SELECTIVOS.
•
•
•
•
Optimizan el espacio de incubación
Manual
Posibilidad de lector automático
Validaciones internacionales
Recuento total:
•
•
•
•
•
Enterobacterias
E.coli/Coliformes
Mohos y levaduras
Staphylococcus aureus
Listeria ambiental
MEDIOS CROMOGÉNICOS Y FLUOROGÉNICOS
Colonias violetas, Mucosas.
Fluorescencia amarillo-verdosa
• Orientación
• Selectivos
Para la realización de estas
técnicas el anticuerpo se marca
con un fluorocromo detectándose
MÉTODOS CROMOGÉNICOS
VENTAJAS.
• Eliminan la necesidad del subcultivo
• Eliminan la elaboración de numerosas pruebas bioquímicas economizando
tiempo y dinero.
DESVENTAJAS:
• La actividad enzimática de los microorganismos
• Interpretación de los colores por parte del operador. Sin embargo con
respecto a esto último se han desarrollado equipos que facilitan la lectura
de las placas.
CITOMETRÍA
• Mide
las
características
de
dispersión de luz y fluorescencia
que poseen las células conforme se
las hace pasar a través de un rayo
de luz.
• Al atravesar el rayo de luz, las
células interaccionan con este
causando dispersión de la luz,
puede evaluar el tamaño de las
células.
Para la realización de estas técnicas el
anticuerpo se marca con un
fluorocromo
detectándose
la
formación del complejo Ag-Ac por la
fluorescencia
emitida.
PCR (REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA)
Método
para
detectar
número
extremadamente
bajo de microorganismos,
con una cierta rapidez
basado de la producción de
copias de genes específicos
de un microorganismo en
cuestión.
AGLUTINACIÓN
Cuando el antígenos se
encuentra
unido
o
formando parte de células,
bacterias o partículas, la
reacción Ag-Ac se puede
detectar y cuantificar por el
aglutinado
celular
o
bacteriano
formado.
RADIOINMUNOENSAYO
En esta técnica el anticuerpo se une un isótopo radiactivo
siendo posible la cuantificación del complejo Ag-Ac a través
de la radiactividad emitida.
BIOCHIP
Es un aparato capaz de realizar
rápidas reacciones bioquímicas en
escala reducida, con el propósito de
identificar
secuencias
genéticas,
agentes
contaminantes,
toxinas,
bacterias.
.
HIBRIDACIÓN
ENZIMOINMUNOENSAYO
Esta técnica, también se conoce como
ensayo de ELISA (Enzyme-Linked
ImmunosorbentAssay).
La
identificación de los complejos AgAc, se hace mediante el empleo de
enzimas, bien unidas al antígeno, o
bien unidas al anticuerpo.
GALERÍAS MINIATURIZADAS Y AUTOMATIZADAS
• Desarrollo algunos medios de cultivo selectivos
• Metabolismo de sustratos específicos
• Detección por sistemas indicadores
Ventajas:
• Reducción de volumen de reactivos y medio a emplear en los
ensayos
• Rapidez en la obtención de resultados
• Posibilidad de lectura e interpretación de resultados de manera
automatizada
GALERÍAS MINIATURIZADAS Y AUTOMATIZADAS
OBIS
• Tarjetas desechables para identificación sencilla de
colonias sospechosas-pruebas bioquímicas rápidas
SISTEMA API
• Galerías para identificación de más de 800
especies de bacterias y levaduras:
BBL ENTEROTUBE Y
OXI/FERM TUBE
• Tubos de plástico de compartimentos con
agar de distintos sustratos
BBL CRYSTAL, RAP ID
SYSTEMS Y MICRO ID
SISTEMA VITEK
• Soportes plásticos con sustratos cromogénicos
y/o fluorogénicos
• Cambios de color en sustratos y/o
producción de gas de cultivos inoculados
INMUNOCROMATOGRAFÍA
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
• http://www.madrimasd.org/blogs/alimentacion/2008/02/08/84070
• http://multimedia.3m.com/mws/mediawebserver?mwsId=66666UuZjcF
SLXTtMxMy4xTtEVuQEcuZgVs6EVs6E666666-&fn=HSCC%20Interp%20Guide_sp.pdf
• http://gotasmicrobiologicas.blogspot.mx/2011/02/medioscromogenicos.html
• http://www.unavarra.es/genmic/curso%20microbiologia%20general/12
-metodos%20de%20recuento.htm
• http://www.in-enologia-veritas.com/old/docs/Microbio.pdf
• http://www.finagro.com.co/html/cache/HTML/SIS/FOODSAFETY/LinaCa
rolinaCruz-DiagnosticoMicrobiologico.pdf