Transcript I Intérêt du milieu

MILIEU DE CHAPMAN
Sommaire
 I
 II
 III
 IV
 V
 VI
Intérêt de ce milieu
Principe
Composition
Lecture et interprétation
Tests supplémentaires
Tableau récapitulatif
I Intérêt du milieu
 Milieu sélectif des bactéries halophiles*
Staphylococcus
Micrococcus
Bacillus
rares bactéries à Gram négatif
*microorganismes exigeant des
concentrations élevées de NaCl pour
leurs croissances
II Principe
1. Inhibiteur: Forte concentration de NaCl
(75 g/L), ce qui permet un isolement
sélectif de bactéries tolérant ces fortes
concentrations.
2. Permet d’étudier la fermentation du
mannitol par virage au jaune de
l’indicateur coloré de pH : le rouge de
phénol, autour des colonies.
III
Composition
 Peptones
 Chlorure de sodium
11,0 g
1,0 g
75 g
 Mannitol
10,0 g
 Rouge de phénol
0,025 g
 Extrait de viande
 Agar
 Eau distillée (qsp)
15,0 g
1000 mL
IV Lecture et interprétation
Pas de virage ( le milieu reste rouge) :
les bactéries sont mannitol - car elles
ne fermentent pas le mannitol,
légère alcalinisation du milieu par
l'utilisation de peptones pour
leur métabolisme énergétique.
Virage au jaune du milieu : les
bactéries sont mannitol + car
elles fermentent le mannitol
pour leur métabolisme
énergétique
avec acidification du milieu.
Remarque: L'utilisation du mannitol se traduira par une acidification du milieu, provoquant le virage
au jaune de l'indicateur de pH.
Les colonies des bactéries mannitol + sont entourées d’une auréole jaune.
L'utilisation du mannitol est un caractère discriminatif important dans le
genre
Staphylococcus, Staphylococcus aureus étant mannitol +, mais ce n’est pas le seul.
V
Tests supplémentaires
le milieu de Chapman permet la sélection
des Staphylococcus et une orientation pour
l’identification de l’espèce S. aureus.
Mais il ne s’agit que d’un test de présomption
et une confirmation par des tests plus
spécifiques reste obligatoire :
 Présence d’une coagulase libre
 Présence d’un récepteur au fibrinogène et/ ou de la
protéine A
 Présence d’une Dnase.
5.1 Test de la coagulase libre
 Principe: La coagulase est un test utilisé
pour l’identification de Staphylococcus aureus.
Cet enzyme se présente sous deux
formes LIÉE (TEST SUR LAME )OU LIBRE
(TEST EN TUBE), lesquelles ont des
propriétés différentes et nécessitent
des tests différents pour les
identifier.
5.1.1 Test de coagulase libre
Coagulase libre
Thrombine
prothrombine
Fibrine + H2o
Fibrine + peptide
Polymérisation
en caillot
La coagulase agit en transformant la prothrombine en thrombine qui sera
active sur le fibrinogène afin de le transformer en fibrine (formation de caillot)
Pas de coagulation
24 à 37 h
Coagulase libre -
Pas de fibrine
Plasma (0,5 ml)+ bactérie (0,5 ml)
Coagulase libre +
Coagulation: fibrinogène
transformé en fibrine +
peptides.
Lecture: Toutes les 30 minutes pendant 24 h
Coagulum