Transcript 7. Gyors mikrobiológiai módszerek1

Gyors mikrobiológiai módszerek
Felületek vizsgálata
ATP kimutatás
Limulus-teszt
Impedancia (konduktancia) mérés
Redoxpotencial mérés
Petrifilm eljárás
Az élelmiszerrel érintkező felületek
tisztaságának ellenőrzése
1. Megtekintés - szemmel láthatóan tisztának kell lenni
2. Kismértékű szennyeződés kimutatása
A - Fehérje nyomok detektálása
B - Biolumineszcencia (ATP meghatározás)
C- Mikrobiológiai vizsgálat
A/ Fehérje nyomok kimutatása - biuret-reakció
(erős lúg + réz-ionok segítségével a peptid-kötések
lila színt adnak)
A vizsgálandó felületet tamponnal mintázzuk,
annak tartalmát vízzel elegyítjük, majd a
fehérjetartalmat színreakció alapján becsüljük
Fehérje nyomok kimutatása
B/ Bioluminescencia - ATP kimutatás
• ATP (baktérium, gomba, egyéb sejtek)
• + luciferine + O2 + luciferase =
• keletkeznek:
• AMP + Oxiluciferin + CO2 + PO4
• Zöld fény (562 nm)
• Optimális környezeti tényezők
• pH
7,75
• hőmérséklet
15-25 oC
A luminométer által jelzett fény intenzitása
arányos az ATP mennyiségével.
C/ Mikororganizmusok kimutatása tenyésztéssel
1. Felület lenyomatának vizsgálata táptalajjal
2. Tamponos módszer - A vizsgálandó felületet
tamponnal mintázzuk, majd annak tartalmát vízzel
elegyítjük, majd a decimális hígítási sor készítése
után táptalajokra oltjuk (mikrobaszám, kóliform,
enterobaktérium, egyéb indikátorok)