Transcript Mediciones del crecimiento microbiano

Crecimiento Microbiano
Bibliografía:
Brock. Cap 6. 10ma edición.
“Lo que se obtiene con violencia, solamente se puede mantener con
violencia.” -- Gandhi
CRECIMIENTO MICROBIANO
Definición: Crecimiento mibrobiano es el aumento en número de células (y no
en tamaño).
División celular por fisión binaria
Tiempo de generación: el tiempo
transcurrido desde que una célula
se divide y da 2 nuevas células.
Varía entre 0.5-6 horas.
Video
Crecimiento exponencial
La pendiente de la curva aritmética, aumenta constantemente.
Curva de Crecimiento
Es la tasa de crecimiento de una población analizada en un sistema
cerrado, monofásico, medida como el logaritmo del número de
células vs. el tiempo de incubación.
• Fase de latencia: es un período de inactividad en el cual las células se adaptan al
nuevo ambiente.
• Fase exponencial: es un período donde los organismos crecen a su tasa máxima.
• Fase estacionaria: el número de células vivas se mantiene constante. Tasa de Nacimientos
= Tasa de muerte.Se debe a la falta de nutrientes, deshechos tóxicos, etc.
• Fase de muerte: los organismos mueren a una tasa exponencial.
Preguntas
Cuánto tiempo vive una bacteria? Y una archaea?
En qué situación podría ser que la curva de crecimiento de una bacteria no
tuviera una fase de latencia?
Mediciones del crecimiento microbiano
Medición del número de células:
- métodos de recuento directo
- recuento de células viables.
Medición de la densidad o masa celular:
- por peso seco
- por luz dispersada
- por determinaciones bioquímicas.
Mediciones del crecimiento microbiano
Medición del número de células:
- metodos de recuento directo
Se utiliza una cámara de recuento especial que se observa al
microscopio óptico para estimar el número total de células en el cultivo.
Desventajas:
El método no sirve para cultivos poco densos, celulas móviles.
Frecuentemente es necesario teñir las células.
Mediciones del crecimiento microbiano
Medición del número de células:
- recuento de células viables.
Siembra por extensión
45-50C
Siembra por vertido en placa
Mediciones del crecimiento microbiano
Antes de la siembra, el cultivo debe diluirse para obtener 30-300 UFC en cada
placa.
Pregunta
Se ha visto que los recuentos de UFC revelan números menores que los
recuentos directos al microscopio. Por qué?
- el recuento directo al microscopio incluye células muertas
- diferentes organismos poseen requerimientos fisiológicos diversos
y no todos crecen en las condiciones de cultivo.
Mediciones del crecimiento microbiano
Medición de la densidad o masa celular:
- por turbidez, mediante un espectrofotómetro.
Este método requiere la preparación de un estándard que relacione el
número de células con la turbidez.
Es problemático para muestras de organismos que forman agregaciones
o biofilms. Se suele realizar agitación.
Pregunta
Piensa que el método de turbidez subestima o sobreestima el número de
bacterias presentes?
Si se le pide que realice una estimación del número de bacterias
presentes en un cuerpo de agua contaminado. Qué método utilizaría
y por qué?