第一部分 实验技能

色谱常用的洗脱剂及其洗脱能力（按次序递增）： 己烷、石油醚＜环己烷＜四氯化碳＜二硫化碳＜甲苯＜苯＜ 二氯甲烷＜三氯甲烷＜乙醚＜乙酸乙酯＜丙酮＜丙醇＜乙醇＜ 甲醇＜水＜吡啶＜乙酸。 20

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四、显色剂

•紫外灯： 多环芳烃基团等 •碘蒸气： 很多有机物显黄棕色 •茚三酮、浓硫酸 等特殊显色剂

21

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柱层析

22

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• • • • • • • • • 概述 层析柱的选择 吸附剂 洗脱剂 装柱 上样 洗脱分离 快速柱层析 反相硅胶板和反相硅胶柱 柱层析 23

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一、概述 柱层析，又叫柱色谱 (Column Chromatography) ，通常在玻璃管中填入表 面积很大、经过活化的多孔性或粉状固定吸附剂（如硅胶和氧化铝）。当 待分离的混合物从柱顶加入，流经吸附剂（固定相）时就被吸附在柱的上 端，然后从柱顶加入洗脱剂（流动相）。当洗脱剂流经吸附剂时，便发生 了 吸附和解吸 过程，即混合物的各组分在固定相和流动相之间发生无数次 的交换。由于各组分对吸附剂的吸附能力（或称亲和力）不同，便以不同 的速度随流动相下移，形成若干色带。吸附能力最弱的组分随洗脱剂首先 流出。分别收集各组分，进行逐个鉴定，从而达到分离纯化的目的。 作为一种十分高效的分离提纯方法，柱色谱有着相当广的应用范围，适 用于大量、少量甚至微量物质的分离。 关键词：吸附和解吸、吸附能力、物理过程 。 24

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25

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二、层析柱 .

任何细颈玻璃管或带旋塞的滴定管均可用作层析柱。 . 专门定制各种尺寸规格的带有特氟珑旋塞和底部配备砂芯（以代替玻璃棉）的 层析柱。 . 层析柱的选择。

Column Size (ml) Fraction Size (ml) Sample Size (g)

200 10 1~2 400 20 3~5 600 30 5~8 1000 50 10 2000 100 20~30 4000 150~200 50 8000 250~400 100 26

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27

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三、吸附剂 常用的吸附剂有硅胶、氧化铝等，颗粒大小一般以通过 成拖尾不集中，分离效果也不好。 200 目左右筛孔为宜。颗 粒太大，洗脱时溶剂推进太快，分离效果不好，反之如果颗粒太小，展开慢而造 1 、硅胶 硅胶一般分为硅胶 G( 掺入 13% 的粘合剂煅石膏 ) 、硅胶 H （不含粘合剂，层析用） 和硅胶 H/GF 254 （含荧光物质）。柱层析一般用比表面积 300-400 米 2 / 克，颗粒度 在 300 目以下的硅胶 H 做吸附剂。 2 、氧化铝 色谱用氧化铝一般可分为酸性、中性和碱性三种。酸性氧化铝是用 1% 盐酸浸泡 后用蒸馏水洗至悬浮液 PH=4~4.5

，用于分离酸性物质。中性氧化铝 PH=7.5, 用于 分离中性物质，其应用最广。碱性氧化铝 PH=9~10 ，一般用于分离生物碱等化合 物。 28

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3 、吸附剂的选择 选择吸附剂的首要条件是与被吸附物无化学作用。 氧化铝的极性比硅胶大，比较适合用于分离极性较小的化合物如烃、醚、醛、酮、 卤代烃等。因为极性化合物被氧化铝较强烈地吸附，分离较差。相反，硅胶适合 用于分离极性较大的化合物如羧酸、醇、胺等，而非极性化合物在硅胶上吸附较 弱，分离较差。 4 （ 、吸附剂的活性 吸附剂的活性与其含水量有关。含水量越低，活性越高。将氧化铝放在高温炉 350℃-400℃ ）烘 3 小时得无水氧化铝，加入不同量水分得不同程度活性氧化铝。 一般常用 Ⅱ-Ⅲ 级（硅胶也可如法处理）。

Activity Alumina(% water) Silica gel(% water)

Ⅰ 0 0 Ⅱ 3 5 Ⅲ 6 15 Ⅳ 10 25 Ⅴ 15 38 29

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5 、化合物的吸附能力（亲和力） 化合物的吸附能力（亲和力）与分子极性有关。分子极性越强，其吸附能力也就 越大。分子中所含极性较大的基团，其吸附能力也较强。通常吸附能力按下列排 列次序递增： -Cl,-Br,-I

10~20:1,

最好不少于

7

：

1

，当然这一比例 关系也可随具体的分离效果作适当调整。 层析柱、吸附剂和待分离样品的经验选择关系 样品量

(g)

吸附剂用量

(g)

柱的直径

(mm)

柱高

(mm)

0.01 0.3 3.5 30 0.1 3.0 7.5 60 1 30 16 130 10 300 35 280 * 注：具体选择应视样品的分离情况而定。 30

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四、洗脱剂 选择洗脱溶剂时应考虑到被分离各物质的极性和溶解度。 非极性化合物用非极性溶剂，而极性溶剂对于洗脱极性化合物是有效的。被分离 各物质应在洗脱溶剂中有非常好的溶解性，否则会严重影响分离效果。若欲分离 的混合物组成复杂，单一溶剂往往不能达到有效的分离，通常可以选用混合溶剂 作洗脱剂。 下列为柱色谱常用的洗脱剂及其洗脱能力（按次序递增）： 己烷、石油醚＜环己烷＜四氯化碳＜二硫化碳＜甲苯＜苯＜二氯甲烷＜三氯甲 烷＜乙醚＜乙酸乙酯＜丙酮＜丙醇＜乙醇＜甲醇＜水＜吡啶＜乙酸。 实验室一般常用石油醚 ( 正己烷 )/ 乙酸乙酯系 ( 分离极性较小的化合物 ) 和二氯甲烷 ( 氯仿 )/ 甲醇系 或醋酸。 ( 分离极性较大的化合物 ) 。对于分离极性较大的化合物，如氨类、 酰胺类化合物，为防止其产生拖尾现象，可在洗脱剂中加入少量的三乙氨、氨水

*

具体选择应参照

TLC

的结果选择合适的洗脱剂。 31

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五、装柱

*

重要事项：装柱一定要在抽风良好的通风橱中进行，并带好口罩，以防吸入过 多的硅胶或氧化铝粉尘而对身体产生致命伤害。 装柱是柱层析中最为关键的操作，装柱的好坏将直接影响分离效率。 首先必须将层析柱 垂直 固定在铁架上，填充时要求将柱填装 均匀 、严实， 不应夹 有空气泡，并使柱顶表面保持水平。 柱层析的装柱一般有干法和湿法二种。下面以吸附剂硅胶为例分别讲述这两种装 法。 32

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1、干法装柱：将硅胶慢慢地从柱顶小心加入，同时用橡皮棒轻轻敲击玻璃柱，以使硅 胶颗粒尽可能填充均匀严实（可以用水泵抽）。任何隙缝、断层、气泡都将影响分离 效果。装好硅胶后，最好在其上铺上一层石英沙，以防止在加入洗脱剂和待分离样品 时冲坏硅胶层的顶部。然后从柱顶小心加入非（小）极性溶剂或洗脱剂并使其充分润 湿硅胶层，并以一定的流速流入接受瓶。在此过程中，也要防止隙缝、断层、气泡的 产生以影响分离效果。通常可以先用非（小）极性溶剂或洗脱剂预洗（可以加压）柱 子一定体积消除上述现象后再上样分离，这样也可以把硅胶、石英沙、砂芯（玻璃棉） 本身可能带有的一些杂质洗去。 干法装柱还可以先在层析柱中装入非（小）极性溶剂或洗脱剂，在慢慢加入硅胶。 2、湿法装柱：先把硅胶和非（小）极性溶剂或洗脱剂（一般按体积比 1 ： 2 ）充分混合， 形成均一的可流动浆状物，小心倾入层析柱，然后一些石英沙，用一定体积的非（小） 极性溶剂或洗脱剂预洗以去除可能产生的气泡。其他注意事项和干法装柱一样。 33

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注意：在加待分离样品前，不能让柱子流干。加样时，当非（小）极性溶剂或洗脱 剂的液面与硅胶层顶部，即石英沙层相平时（切记不可超过该水平线！否则会产生 新的裂缝和气泡！）即可加入样品。 柱色谱装置 正常展开的层析和应避免的的两种情况的对比 左为水平表面，中为非水平表面右为夹有空气泡的情形 34

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35

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六、上样 上样一般按待分离物的性质而分为液体上样和固体上样两种。 1．液体上样：把要分离的试样配制成适当浓度的溶液。将硅胶上多余的溶剂放出， 直到柱内液体表面到达石英砂表面时，停止放出溶剂。沿管壁加入试样溶液，注 意不要使溶液把石英砂、硅胶层冲松浮起，试祥溶液加完后，开启下端旋塞，使 液体渐渐放出，至溶剂液面和石英砂层表面相齐(勿使石英砂表面干燥)即可用溶 剂洗脱。 2、固体上样：当待分离样品为固体时不能直接上样，一般采用拌硅胶上样法。将 固体样品溶于丙酮、氯仿等低沸点溶剂中（注意：样品在选择的溶剂中应有相当 好的溶解性，尽量避免用甲醇、乙醇等沸点较高的溶剂，以防最后不能除尽而影 响分离效果）加入一定量的粗硅胶（一般用100-200目的硅胶，用量大致和样品 的重量量比为3-5：1）充分摇匀，然后旋干溶剂，干燥得到的细粉状固体后小心 倒入准备好的层析柱中，并使其表面呈水平，再加入一层石英砂以防加入洗脱剂 破坏其表面。小心加入洗脱剂后便可开始走样了。当然，如果该固体在洗脱剂中 有较好的溶解度，也可使其直接溶于尽量少的洗脱剂中按液体上样法处理。此法 只适用于较少的样品量。 36

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七、洗脱和分离 在洗脱和分离的过程中，应当注意以下几点： 1、继续不断地加入洗脱剂，应保持一定高度的液面，在整个操作中勿使硅胶层表 面的溶液流干，一旦流干，再加溶剂，易使硅胶柱产生气泡和裂缝，影响分离效 果。 2、收集洗脱液，如试样各组分有颜色，在硅胶柱上可直接观察。洗脱后分别收集 各个组分。在多数情况下，化合物没有颜色，收集洗脱液时，多采用等份收集， 每份洗脱剂的体积随所用硅胶的量及试样的分离情况而定。一般若用50 g硅胶， 每份洗脱液的体积常为50 mL。如洗脱液极性较大或试样的各组分结构相近似时， 每份收集量要小。 3、控制洗脱液的流出速度，一般不宜太快，太快了柱中交换来不及达到平衡，因 而影响分离效果。 4、由于硅胶表面活性较大且显弱酸性，有时可能促使某些成分破坏，所以应尽量 在一定时间内完成一个柱色谱的分离，以免试样在柱上停留的时间过长，发生变 化或扩散而影响分离效果 37

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38

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八、快速柱层析 柱层析分离的最大的缺点就是耗时，需要极大的耐心。如果要在分离效果和时间 两 者 间 取 一 个 比 较 高 的 “ 性 价 比 ” 的 话 ， 那 么 快 速 柱 层 析 （ Flash Column Chromatography）无疑就是最好的选择。 和普通柱层析相比，不同之处在于快速柱层析是用大约10 psi的压力迫使流动相 以较快的速度通过固定相。快速柱层析特别适用于样品量在0.1-10g，需要组分的 R f 值为0.35并与杂质有0.15的R f 差距（TLC）。 39

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Select a column that is 10, 20, 40 mm ID based upon preparative requirements. The following table presents a general information on this aspect.

Column Diameter Volume of Eluent Sample Load(mg) Fraction Size

cm ml R f >0.2 R f >0.1 ml 1 100 100 40 5 2 200 400 160 10 3 400 900 360 20 4 600 1600 600 30 5 1000 2500 1000 50 The height of the column normally ranges 15~25cm depending on the resolution.

Operation

Dry pack adsorbent(silica gel) into the appropriate column. Gently tap vertically to pack the gel. Clamp and assemble. Fill with solvent, pressure slightly to compress the silica gel and force solvent and air through the column. The top of the column should not be allowed 40

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to run dry. Apply the samples as a 20 - 25% solution and elute at a flow rate of 5cm/min. Generally, it takes about 5~10 minutes to run the column. Gram quantities are expected to acquired, typically 0.5 - 2.0g. Can be increased to 10g if less resolution is required and/or larger columns are used.

Summary

Flash Chromatography is a fast, cost efficient Prep LC approach. Separations are based upon traditionally obtained TLC results which are simply extrapolated to prep scale. Best of all, elaborate equipment and the purchase of expensive equipment is not necessary.

41

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九、反相硅胶板和硅胶柱 当被分离的样品为极性很大的化合物（如氨，酸等），用普通的以硅胶为填充料 的柱子可能很难有效分离，这时就可以选择反相硅胶板和硅胶柱。其主要的区别 在于吸附剂的不同，主要以硅胶作基质，在其表面键合十八烷基官能团（ODS）的 非极性填料，（其他还可键合C 8 、C 4 、C 2 、苯等）。洗脱剂一般用甲醇（乙睛）和 水的混合物。 42

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Chromatography

• • Pre-TLC Column Chromatograghy

43

特点

• • • 分离时间短，效率高 操作简便 分离样品少

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44

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原理

各组分对吸附剂吸附能力不同 • • 吸附能力弱（即极性较弱的）随流动相移动快 吸附能力强（即极性较强的）随流动相移动慢 45

PTLC

过程

• • • • • •

展开缸

PTLC

板 点板 展板 显色 刮板与洗脱

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46

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展开缸

• • • • •

24



24



7cm

使用混合溶剂时

,

可能会发生边缘效应 预防措施

:

在四壁放上滤纸有助于蒸气饱和，防止边缘效应 流动相液面高度一般为

10--15mm.

使用混合溶剂体系，应在每次爬板后清洁展缸 每次只准备一天的溶剂 在爬板时保持展缸密闭 47

Spanning Drug Development & the Globe PTLC

板

• 吸附剂 最常用的吸附剂是硅胶 硅胶是无定型多孔物质，略具酸性 适用于中性或酸性物质的分离。 • 制备和活化 • 负载量

1.0mm

，

<5mg/cm2 e.g. 20

×

20cm, 10~100mg

48

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点样

--A key step

• 工具 自动

TLC

取样器 自制的玻璃滴管 • 溶剂 推荐挥发性溶剂

—

乙酸乙酯

,

己烷

,

二氯甲烷 避免使用不挥发溶剂

–

甲醇

,

水

.

引起问题

:

扩散 • 样品的浓度

PTLC---5~10%

49

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50

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• • 用滴管吸取样品溶剂，缓慢并且匀速地在板上划一条直线 如果点样太宽，可用大极性溶剂将其展开至

2~4cm

，再吹干 • • 不要污染板 线条尽可能细 • • • 如果可能，点样后先在

UV

下检查 小心

: UV

光线直接照射进眼里是有害的

,

最好带上眼镜，并用镊子夹住板 样品不能太多，否则会过载 由于边缘厚度不均匀及边缘效应

,

应留

5~8mm.

51

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展板

• • • • 在展

PTLC

板之前，必须先用

TLC

选用溶剂条件

.

PTLC

可以直接使用

TLC

条件 将准备好的

PTLC

板放入展开缸

,

盖上盖子

.

溶剂前沿离板上端大约

0.5cm

—1cm

即可取出 52

几个常用的溶剂体系：

• • • 己烷（石油醚）

/

乙酸乙酯 己烷（石油醚）

/

丙酮 氯仿

/

甲醇

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53

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选择溶剂系统，必须经过多次的尝试，不断改变溶剂极性，根据板层情况， 选择最佳的溶剂体系 一般来讲，提高溶剂极性，化合物爬的越高 （反之则相反

).

极性 溶剂 （展开剂） 烷烃

(

己烷

,

石油醚

)

甲苯 二氯甲烷

,

氯仿 乙醚 乙酸乙酯 丙酮 醇 醋酸 54

Spanning Drug Development & the Globe PTLC

中的问题：

• 板上的化合物是一片 样品过载

.

或者是由于你的样品十分不纯

.

• 板上的化合物拖尾

.

样品有酸性或碱性基团

(

胺或羧酸

)

有时在

PTLC

板会有严 重的拖尾。加入几滴氨水或

TEA(

胺

)

或醋酸

(

羧酸

)

55

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显色

• • 如果样品是有颜色的

,

用铅笔轻轻标出 如果样品需在紫外灯下看

,

则在紫外灯下用铅笔标出 • •

从板上割下一条或用玻璃盖住大部分板，然后

如果样品无色，且在紫外下也不显色

,

那么试一试碘 你也可选择在板上喷洒事先准备好的显色剂 56

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刮板及洗脱

• • 在确定好所要的带后，可用刮刀将其刮下，碾细 以玻璃漏斗洗脱 通过柱层析洗脱 57

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操作过程请注意

:

• 尽快处理你的化合物

,

长时间与吸附剂接触会增加你的样品变坏的可能性 • 小心选择溶剂

,

甲醇可能会溶剂硅胶板里的融解黏合剂及荧光物质

,

选择氯 仿，丙酮和乙醇会好一些

;

如果可能的话，尽量选择低极性的溶剂 •

1g

吸附剂需用大约

5ml

溶剂 • 柱层析有助于除去黏合剂和荧光物质 58

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无水无氧操作

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一、 常用溶剂的纯化

§

1-4

无水无氧操作

二、敏感化合物的实验操作装置 三、敏感化合物的实验操作技术 四、敏感化合物的储存 60

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常用溶剂的纯化

化学供应商提供的常用试剂仅可满足一般化学反应的需要。 为了确保一些有机合成反应的顺利进行，常常要对试剂进行 进一步的纯化处理。常用的溶剂处理方法是蒸馏。如果反应 要求仅仅是无水，可在冷凝管上加干燥管，油封或充氮气球 即可，如果需要达到无水无氧的条件，溶剂则需要脱氧处理。 一般在氮气氛下进行。 61

Spanning Drug Development & the Globe 1.

常用溶剂的纯化 试剂级溶剂的纯化 无水的试剂级溶剂常有足够的纯度，有时可以不用蒸馏。 为保证充分的干燥度，可在储藏时向其加入活性分子筛。 欲使溶剂脱氧，可利用注射器或玻璃管向其中鼓入氮气约五分钟。

2.

一般溶剂的纯化 大多数溶剂，只要在惰性气氛中将其从干燥剂中蒸馏出来， 就可以达到足够的纯度。 （ 1 ） 烷烃 如己烷、戊烷等。首先用浓硫酸洗涤几次以除去烯烃，水洗， CaCl 2 干燥，必要时用钠丝或 P 2 O 5 干燥，蒸馏。存放于带塞的 试剂瓶中。 （ 2 ）芳香烃类 如苯、甲苯、二甲苯等。 CaCl 2 干燥，必要时用钠丝或 P 2 O 5 干燥， 蒸馏。存放于带塞的试剂瓶中。 62

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（ 3 ） 氯代烷烃类 常用溶剂的纯化 如二氯甲烷、氯仿、四氯化碳、二氯乙烷等。水洗除去醇等， CaCl 2 干燥，在 P 2 O 5 ，或 CaH 2 中回流蒸出。 绝对不能用钠丝干燥， 否则会发生爆炸。 长期储藏应放于密闭的瓶中，并保存于黑暗中。 （

4

） 醚类及呋喃类 如乙醚、四氢呋喃等。许多醚类在和空气接触下会慢慢生成 不易挥发且结构不明的过氧化物。过氧化物在加热下容易分解而 爆炸。 因此贮藏过久的醚类和呋喃类化合物在使用前，尤其是在 蒸馏前应当检验是否有过氧化物的存在。检验的方法：用包含一滴 淀粉指示剂的 1 mL 10% KI 溶液和 10 mL 醚液混合，没有颜色变化， 则没有过氧化物。或者用 1% 硫酸亚铁铵溶液，硫酸亚铁和硫氰化钾 溶液测试。若有，则加入 5% FeSO 4 或偏亚硫酸氢钠溶液于醚中 并摇动，使过氧化物分解。 CaCl 2 预干燥，在钠丝或 LiAlH 4 中回流 蒸出。储藏于密闭的瓶中，并保存于阴凉黑暗中。 63

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（ 5 ）酰胺类 如二甲基甲酰胺，二甲基乙酰胺， HMPT 常用溶剂的纯化 等。加入 CaH 2 回流， 减压蒸出，否则其容易分解。加入新活化的分子筛储藏于瓶中， 并注明日期。 （ 6 ）二甲基亚砜 加入 CaH 2 搅拌过夜，然后减压分馏。加入新活化的分子筛 储藏于小瓶中，并注明日期。 （ 7 ） 吡啶 可以用 KOH ， NaOH, CaO, BaO 或钠，然后蒸出。加入新活化的 5Å 分子筛密闭保存，并注明日期。 64

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常用溶剂的纯化 （ 8 ）乙醇 主要杂质为杂醇油，醛，醇，酮和水。可用的纯化方法为镁屑 和碘回流，与 CaO 一同回流并蒸出。加入新活化的 3A 分子筛 储藏于小瓶中。 注意：在应用金属化合物作为纯化剂时，蒸馏时蒸馏瓶中 的溶剂应最少保持在四分之一的体积，绝不允许蒸干， 否则会发生危险。 这里介绍的仅仅是部分溶剂的处理方法，其它溶剂的纯化 见有关参考书（如 Purification of laboratory chemicals, fourth edition, 世界图书出版社 2000.6.

）。 65

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敏感化合物的实验操作装置

所谓敏感化合物，这里指在空气中的氧或水汽的作用下会迅速 发生明显变化的那些物质。涉及这类物质的反应，可在普通的 磨口仪器中进行，也可在专门的玻璃仪器中进行。所需的附件 包括：一个惰气源，真空泵和双排管。 66

1.

反应装置

1

）普通装置 一般用二口瓶或三口瓶。

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敏感化合物的实验操作装置 敏感化合物反应的普通装置 67

Spanning Drug Development & the Globe 2

）实验室常用的其它专门反应仪器 敏感化合物的实验操作装置 敏感化合物反应的其它专门装置 68

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敏感化合物的实验操作装置

2.

双排管 双排管的一端接惰性气体，另一端接真空泵。 向下的接口通向反应装置。 ( 图 7) 图

7

双排管 69

Spanning Drug Development & the Globe 3.

惰性气体和真空泵 敏感化合物的实验操作装置 常用的惰性气体是氮气，氩气和氦气。由于氮气价廉易得，大多数有机金属试剂 在其中均能保持稳定，因此最为常用。它还有密氮气度与空气相近的优点，所以 再其中称量物质时无须校正。一般来说，含量在 99.998% 的氮气即能保护大多数 空气敏感化合物。 实验室存放氮气一般用氮气钢瓶。为了防止发生意外，氮气钢瓶一般存放于实验 室内的固定位置，并用铁链固定。打开或关闭氮气钢瓶都是首先要拧动钢瓶开关， 然后再旋动减压阀和调节旋钮。 为了纯化气体，在惰性气体进入反应器之前，通常需要用氧化银柱，分子筛柱等 进行干燥和纯化。 在双排管的一端连接惰性气体，另一端则连接真空泵。之所以连接 真空泵， 是为了节约惰性气体。对于很大的反应器，若仅靠以惰性 气体冲洗来置换空气， 则不但费时，也颇浪费。一般先将反应器 抽成真空，然后再充以惰性气体。如 此重复几次，即可将氧气除净。 期间若以小火烘烤，效果更佳。为了保护真空 泵，要在真空管道上 装干燥塔。 70

Spanning Drug Development & the Globe 1.

敏感化合物的实验操作技术

反应器的除水除氧 一般先将反应器抽成真空，然后再充以惰性气体。如此重复几次， 即可将氧气除净。期间最好小火烘烤，效果更佳。

2.

液体的转移 1 ） 注射器 将洗净烘干的注射器装好后，通过吸入和挤出氮气将针管冲洗几次。用注射器 从惰性气体冲洗装置中，吸取相当于总容量四分之三的氮气，将针筒推至总 行程的一半处，借此对针筒进行最后一次清洗。然后刺入储器，将针筒内的 氮气全部推出。将针头深入液面下，利用储器中液面上的压力，让液体进入针筒， 直至超过所需数量的 10-20% 。 将针尖抽出液面，稍加弯曲，以使针筒倒转，从而使注射器内的气泡升至顶部。 推压针筒芯，将气泡驱出后，一直推到所需的刻度。再将针筒芯抽回一些， 以吸入氮气保护层。仍然将针筒倒转着，将整个针筒从储器中抽出，刺入接受器 的隔膜。针管一旦穿入受器，即可翻转注射器，将液体推出。将液体推出后， 再将筒芯往回拉，以吸入少量惰气。再将针筒拔出。若这只注射器很快又将使用， 可讲针刺刺入橡皮塞中暂放。 71

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敏感化合物的实验操作技术 （

2

） 双尖针管法 它能解决大量敏感液体的转移问题。用一只与惰性气源相连的 针管插入放敏感液体的储器，使其高于液面，同时吹入氮气。 将双头针的一端穿入储器的隔膜，使其略高于液面，用氮气对 双头针进行清洗。双尖针管的另一端插入计量器，计量器通过 鼓泡器与外界相连。然后将穿入储器的双头针尖插入液面下， 通过氮气的压力，使液体通过针管进入计量器。然后将针管从 储器中拔出，插入接受器，再将鼓泡器从计量器换接到接受器上。 向计量器中压入氮气，这样形成的正压力使液体通过针管进入 接受器。 72

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敏感化合物的实验操作技术

3.

固体的转移 （

1

） 加料 一般要求的反应，可在反应器处于氮气正压力的情况下快速加入。 如果加料顺序对反应没有影响，可将固体先加入，再将反应器 除水除氧。如有可能，可将固体物变成溶液，再以液体的转移 技术加料。还可利用特殊的玻璃仪器直接加料。 73

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敏感化合物的实验操作技术 （

2

） 过滤 当必须从敏感溶液中除去悬浮杂质或者从中析离敏感的固体 产物时，可以在氮气环境下，通过一些专门设备，进行过滤。 1 ）大孔的双头针和带有橡皮隔膜的玻璃漏斗。应用氮气的 正压力，过滤将不难进行。 2 ）气体分布管。它通过软管与接受瓶相连，借助氮气的 正压力，将滤液压入接受瓶。 3 ）过滤室（带有磨口和支管的砂心漏斗）。它插入接受瓶， 利用双头针管法将待滤液转入过滤室过滤。 74

4.

气体的转移 1 ）小钢瓶 2 ） 气体注射器 3 ） 气体的溶液

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敏感化合物的实验操作技术 为储藏和转移少量的气体，将其制成标准溶液比较方便。 如硼烷制成四氢呋喃溶液。

5.

蒸馏技术 1 ） 简单蒸馏 2 ） 减压蒸馏 75

Spanning Drug Development & the Globe 1.

四、 敏感化合物的储存

液体的储存 任何容器，只要能保持内部的惰性气氛，都可用来储存对空气 敏感的液体和经过干燥并脱氧的溶剂。为便于用注射器取用， 储器上应附有某种形式的隔膜进口阀。如需长期储存，最好采用 配有可控特富隆的容器，旋塞的口部罩以隔膜。

2.

固体的储存 对空气敏感的固体，可以储存在配有可控特富隆旋塞的烧瓶里。 76

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敏感化合物贮存 77

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敏感化合物贮存 78

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敏感化合物贮存 79

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敏感化合物贮存 80