Transcript 第二节含量测定样品的处理

第四章
中药制剂的含量测定
中药制剂教研室
复
习
TLC鉴别的实验步骤
薄层板的制备
点样
展开
显色与检视
薄层板类别
基线离底边距离 圆 点 状 直 径 条 带 状 宽 度 点 间 距 离
（mm）
（mm）
（mm）
（mm）
普通薄层板
10～15
≤3
5～10
≥8
高效薄层板
8～10
≤2
4～8
≥5
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复
习
对照物选择
对照品对照
阴阳对照
对照药材和对照品同时对照
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大纲要求
掌握中药制剂含量测定的目的特点
掌握含量测定样品处理的目的及作用
熟悉样品提取分离常见的方法及其特点
熟悉色谱法分离净化样品常用填料及其特点
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第一节 含量测定的目的与意义
目的
通过制剂中某种成分的含量高低是否符
合规定来判定药物的优劣
意义
保证中药制剂的质量，达到临床用药有
效、安全、稳定
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第一节 含量测定的目的与意义
中药制剂含量测定的特点
中药制剂与化学药品含量测定区别
含量测定内容 中药制剂
化学药品
对象不同
供试品溶液制备
待测成分确定
成分单一
方法简单
成分明确，一般
选择主要成分
组成及成分复杂
方法繁琐，大多需要净化分离
先根据中医药理论选择药味，
再综合选择待测成分
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第二节
含量测定样品的处理
作 用
1.除去杂质、纯化样品，提高分析方法的重现性和
准确度
2.富集浓缩或进行衍生化
3.制成便于分析测定的稳定试样
4.使试样的形式及所用溶剂符合分析测定的要求
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含量测定样品的处理
步 骤
1. 粉碎
2. 提取
3. 分离净化
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含量测定样品的处理
一、样品的粉碎
目的：
1.保证所取样品均匀而有代表性，提高测定结果的
精密度和准确度
2.加速被测定组分的提取完全
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含量测定样品的处理
一、样品的粉碎
注意
细粉：全部通过5号筛（80目），并含能
过6号筛（100目）不少于95％的粉末
1.避免过细
2.避免样品受污染
3.避免粉尘飞散及挥发性成分的损失
4.避免丢弃不易通过筛孔的部分颗粒
设备
粉碎机、研钵；高速匀浆机、玻璃匀浆器
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含量测定样品的处理
二、样品的提取
冷浸法
回流提取法
连续回流提取法
超声提取法
超临界流体提取法
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含量测定样品的处理
供试品的制备方式
1.部分测定法（等量法）： 即将浸泡后的溶液，
用适宜滤器滤过，精密量取一定体积，进行
测定
注：此法不适宜挥发性较大的提取溶剂
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重量
法定
容
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含量测定样品的处理
供试品的制备方法
2.全部测定法（即总量测定法）：将浸泡后的溶液
滤过，滤渣充分用溶剂洗涤至提取完全，合并滤
液及洗液，浓缩或蒸干，残留物用另一溶剂溶解，
定量转入量瓶中，稀释至刻度，摇匀，进行测定
注意： 转移完全
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乙肝宁颗粒
供试品溶液的制备 取装量差异下
（黄芪甲苷）
的本品，研细，取约5g或1g（无蔗糖），
中国药典
精密称定，加水20ml使溶解，用以水饱
2005年版一
部P291
和的正丁醇振摇提取4次，每次20ml，
合并正丁醇液，用氨试液20ml分2次洗
涤，取正丁醇液，用以正丁醇饱和的水
20ml分2次洗涤，取正丁醇液，蒸干，
残渣加甲醇适量使溶解，移至5ml量瓶
中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续
滤液，即得。
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含量测定样品的处理
三、样品的分离净化（色谱法）
固相萃取（ Solid-Phase Extraction ）/液-固萃
取（Liquid-Solid Extraction)
原 理
当目标分析物与SPE填料极性相似时，样品流过SPE柱后，
目标化合物在填料上有较好的保留，而极性与填料相差较远
的非目标化合物或杂质直接流出，再用适当洗脱液把目标化
合物洗脱、收集，可直接分析或浓缩后分析；或使杂质保留
于柱上，直接洗脱被测成分进行测定。
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含量测定样品的处理
LSE常用的净化剂
硅胶、氧化铝
键合相硅胶
大孔树脂
聚酰胺
硅藻土
离子交换树脂
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LSE常用的净化剂
硅胶
作用机制：溶质在吸附剂表面的极性吸附作用
特点：通常适于酸性和中性物质的分离；如分离
碱性物质，可在展开剂中加入少量稀碱（如三乙
醇胺）
常见的商品硅胶柱为SEP-PAK
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LSE常用的净化剂
键合相硅胶
借助于化学反应的方法将固定液的官能团
键合在硅胶的表面而构成键合相硅胶。
有机硅烷与硅胶表面化学键合反应，形成
的-Si-O-Si-C-键是对溶剂、热和化学稳定的
结构
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LSE常用的净化剂
键合相硅胶
常用的有十八烷基（octadecylsilane； C18/
ODS)、氨基、氰基键合相键合相硅胶。分别将氨丙
硅烷基（-Si-CH2-CH2-CH2-NH2）及氰乙硅烷基（Si-CH2-CH2-CN）键合在硅胶上而制成。
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含量测定样品的处理
LSE常用的净化剂
氧化铝
类型：碱性氧化铝、中性氧化铝和酸性氧化铝
分离机制：溶质在吸附剂表面的极性吸附作用
碱性氧化铝适于碱性和中性物质的分离
酸性和中性氧化铝适于分析酸性和中性物质
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对照品溶液的制备 取芍药苷对照品适量，
精密称定，加甲醇制成每1ml含30ug的溶液，摇匀，
即得。
供试品溶液的制备 取重量差异项下的本品，
剪碎，取约2g，精密称定，精密加入70%甲醇50ml，
称定重量，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，
用70%甲醇补足减失的重量，滤过，精密量取续滤
液25ml，通过中性氧化铝柱（100~200目，2g，内
径1cm，用50%甲醇湿法装柱），收集至50ml量瓶
中，再用50%甲醇洗脱，收集洗脱液至近刻度，加
50%甲醇至刻度，摇匀，即得。
八宝坤
顺丸
测定法 分别精密吸取对照品溶液10ul与供试
品溶液10 ~15ul，注入液相色谱仪，测定，即得。
P311
中国药
典
2005年
版一部
本品每丸含白芍以芍药苷计，不得少于2.6mg。
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