Transcript Maria Luiza BAzzo SAF
Ilíada Rainha de Souza - UFSC
“Tuberculose e doença pulmonar causadas por micobactérias em indivíduos soropositivos ao HIV: epidemiologia molecular e avaliação de técnicas diagnósticas”. Secretaria de Estado da Saúde Secretaria de Estado do Desenvolvimento Econômico Sustentável
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“Tuberculose e doença pulmonar causadas por micobactérias em indivíduos soropositivos ao HIV: epidemiologia molecular e avaliação de técnicas diagnósticas”. Equipe: Profa. Dra. Rosemeri Maurici da Silva (UNISUL); Enf. Mônica Ferreira Gruner, MSc (HNR); Dra. Simone Gonçalves Senna (UFSC); Farmac. Darcita Burguer Rovaris (LACEN); Mestranda Letícia Muraro Wildner (UFSC); Mestranda Christiane Lourenço Nogueira (UFSC); Graduanda Susie Coutinho Liedke (UFSC).
Coordenação : Profa. Dra. Maria Luiza Bazzo Secretaria de Estado da Saúde Secretaria de Estado do Desenvolvimento Econômico Sustentável
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Micobactérias
Contexto
estuda métodos moleculares aplicáveis ao SUS para diagnóstico da tuberculose e identificação de micobactérias não-tuberculosas.
Espessa camada lipídica 27/100.000 hab.
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Objetivo Estudar a epidemiologia molecular e avaliar as técnicas diagnósticas para a tuberculose e doença pulmonar causadas por micobactérias em indivíduos HIV soropositivos.
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Estratégias:
1.
2.
3.
4.
Avaliar um método modificado para o tratamento das amostras de escarro; Estudar a epidemiologia molecular de cepas circulantes de M. tuberculosis no Estado de Santa Catarina; Isolar e identificar Micobactérias Não-Tuberculosas (MNT) em Laboratório e Hospital de Referência para Micobactérias do Estado de Santa Catarina; Avaliar técnicas moleculares rápidas para diagnóstico e identificação de micobactérias Secretaria de Estado da Saúde Secretaria de Estado do Desenvolvimento Econômico Sustentável
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Estratégia:
1.
Avaliar um método modificado para o tratamento das amostras de escarro Micobactérias Espessa camada lipídica Secretaria de Estado da Saúde Secretaria de Estado do Desenvolvimento Econômico Sustentável
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Estratégia: 1.
Avaliar um método modificado para o tratamento das amostras de escarro
Resultado: Protocolo Rotina Protocolo Modificado
+
73,3% (IC 95%)
&
IS 6110 81,7% (IC 95%) 100%
IS 6110 16S rRNA Secretaria de Estado da Saúde Secretaria de Estado do Desenvolvimento Econômico Sustentável
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Estratégia: 2.
Estudar a epidemiologia molecular de cepas circulantes de M. tuberculosis no Estado de Santa Catarina Secretaria de Estado da Saúde Secretaria de Estado do Desenvolvimento Econômico Sustentável
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Estratégia: 2.
Estudar a epidemiologia molecular de cepas circulantes de M. tuberculosis no Estado de Santa Catarina DR DR DR Região cromossômica específica do complexo MTB Locus de repetição direta DR (Direct Repeats) DR Sequências repetitivas de 36 - 41 pb ausência ou presença Secretaria de Estado da Saúde Secretaria de Estado do Desenvolvimento Econômico Sustentável
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Estratégia: 2.
Estudar a epidemiologia molecular de cepas circulantes de M. tuberculosis no Estado de Santa Catarina PGG1 PGG2 East African Indian (EAI) Central Asian (CAS)
Beijing
Latin American and Mediterranean (LAM)
Harleem
X PGG3 T
RASTOGI & SOLA, 2007
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Estratégia: 2.
Estudar a epidemiologia molecular de cepas circulantes de M. tuberculosis no Estado de Santa Catarina
Beijing
PGG2 Latin American and Mediterranean (LAM)
Harleem
T PGG3 Secretaria de Estado da Saúde Secretaria de Estado do Desenvolvimento Econômico Sustentável
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Estratégia: 2.
Estudar a epidemiologia molecular de cepas circulantes de M. tuberculosis no Estado de Santa Catarina 406 isolados clínicos 111 spoligotypes 74 SITs
(
Shared International Types
)
7 famílias 32 subfamílias 6 perfis Orphan 84,7% 2,0% 31 perfis Unknown 13,3% Secretaria de Estado da Saúde Secretaria de Estado do Desenvolvimento Econômico Sustentável
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Estratégia: SIT42/LAM9 (1) SIT42/LAM9 (2) SIT106/U(LAM3?) (1) SIT106/U(LAM3?) (1) SIT50/H3 (1) SIT93/LAM5 (1) Unk21 (3) SIT73/T2-T3 (2) SIT150/LAM9 (1) SIT17/LAM2 (1) SIT216/LAM9 (1) SIT42/LAM9 (1) SIT106/U(LAM3?) (1) SIT50/H3 (2) SIT93/LAM5 (1) SIT73/T2-T3 (1) Unk21 (1) Unk3 (1) Cepas MDR idênticas Risco para a saúde pública Secretaria de Estado da Saúde Secretaria de Estado do Desenvolvimento Econômico Sustentável
2.
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Estratégia: Estudar a epidemiologia molecular de cepas circulantes de M. tuberculosis no Estado de Santa Catarina Dissertação defendida por Christiane Lourenço Nogueira 13/4/2012 Subfamília Penitenciária e
p
Sim (43) Não (347) “ LAM9 Unk4 S N S N 4 (9,3%) 39 (90,7%) 4 (9,3%) 39 (90,7%) 74 (21,3%) 273 (78,7%) 2 (0,6%) 345 (99,4%) 0,042 0,002 Unk7 Unk21 S N S N 3 (7,0%) 40 (93,0%) 3 (7,0%) 40 (93,0%) 0 (0%) 347 (100%) 1 (0,3%) 346 (99,7%) 0,001 0,005 Secretaria de Estado da Saúde Secretaria de Estado do Desenvolvimento Econômico Sustentável
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Estratégias:
3.
Isolar e identificar Micobactérias Não-Tuberculosas (MNT) em Laboratório e Hospital de Referência para Micobactérias do Estado de Santa Catarina Secretaria de Estado da Saúde Secretaria de Estado do Desenvolvimento Econômico Sustentável
3.
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Estratégias:
Isolar e identificar Micobactérias Não-Tuberculosas (MNT) em Laboratório e Hospital de Referência para Micobactérias do Estado de Santa Catarina
Mycobacterium
150 espécies
M. leprae
Complexo M. tuberculosis (CMTB) Micobactérias Não-Tuberculosas (MNT) TUBERCULOSE MICOBACTERIOSE Pulmonar ou extrapulmonar Clinicamente indistinguíveis Tratamento diferente para cada espécie Secretaria de Estado da Saúde Secretaria de Estado do Desenvolvimento Econômico Sustentável
3.
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Estratégias: Isolar e identificar Micobactérias Não-Tuberculosas (MNT) em Laboratório e Hospital de Referência para Micobactérias do Estado de Santa Catarina C ULTURAS SUSPEITA L ACEN /SC MNT – A MOSTRAS ( ESCARRO OU CULTURA ) PACIENTES INTERNADOS HNR IDENTIFICAÇÃO DA ESPÉCIE PRA-hsp65 MMSA S EQUENCIAMENTO ( DISCORDANTES ) Secretaria de Estado da Saúde Secretaria de Estado do Desenvolvimento Econômico Sustentável
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Estratégias: C ULTURA 152 Suspeitas MNT 49 CMTB 88 MNT 57 AMOSTRAS DE E SCARRO 56 M. tuberculosis 1 M. intracellulare/ M. chimaera (1,8%) Secretaria de Estado da Saúde Secretaria de Estado do Desenvolvimento Econômico Sustentável
3.
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Estratégias: Isolar e identificar Micobactérias Não-Tuberculosas (MNT) em Laboratório e Hospital de Referência para Micobactérias do Estado de Santa Catarina P ERFIL DOS P ACIENTES INTERNADOS COM M ICOBACTERIOSE TB D IAGNÓSTICO I NICIAL TB: 4/6 PACIENTES MNT
8 MESES A 3 ANOS
2 CASOS
3 internações até a alteração do diagnóstico
6 PACIENTES
15 internações 34,3 dias
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DISTRIBUIÇÃO ISOLADOS DOS P AÍSES DESENVOLVIDOS TB MNT
Distribuição dos casos de TB em Santa Catarina.
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3.
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Estratégias: Isolar e identificar Micobactérias Não-Tuberculosas (MNT) em Laboratório e Hospital de Referência para Micobactérias do Estado de Santa Catarina Dissertação defendida por Letícia Muraro Wildner em 09/03/2012 “ Isolamento e Identificação de Micobactérias Não-Tuberculosas em Laboratório e Hospital de Referência do Estado de Santa Catarina” Secretaria de Estado da Saúde Secretaria de Estado do Desenvolvimento Econômico Sustentável
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Estratégias:
4.
Avaliar técnicas moleculares rápidas para diagnóstico e identificação de micobactérias Padronização da técnica PRA-hsp65 (comparação com MMSA e sequenciamento); Padronização de uma PCR multiplex para micobactérias, CMTB e MNT; Padronização da PCR em tempo Real (comparação com PCR convencional com IS6110 e 16S rRNA).
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Estratégias:
4.
Avaliar técnicas moleculares rápidas para diagnóstico e identificação de micobactérias Artigo submetido para saludiciencia “Identification of Mycobacterium Species by Multiplex PCR Assay in University Hospital from Florianópolis Santa Catarina – Brazil” (ICE 18815.03.12).
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Aplicabilidade para o SUS
Implementação de novas técnicas tanto para diagnóstico (Real Time) como para tipificação (PRA
hsp65
) e genotipagem do
M. tuberculosis (spoligotipping)
permitirão maior resolutividade diagnóstica e compreensão da dinâmica das infecções TB e MNT no Estado de Santa Catarina.
Parceria estabelecida com o Setor de Tuberculose LACEN (referência Estadual) Identificação das amostras de MNT Parceria com o Hospital Nereu Ramos para o tratamento) (referência estadual Identificação de amostras e testes moleculares para TB em líquor .
Diagnóstico molecular da TB em líquor, tecidos, escarro e outros materiais para o HU/UFSC
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Impactos do Projeto – Científico
2 dissertações defendidas
2 trabalhos de Iniciação Científica
Consolidação do LBMM e do Grupo de Pesquisa Secretaria de Estado da Saúde Secretaria de Estado do Desenvolvimento Econômico Sustentável
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Produção Científica
Artigos publicados: Wildner, LM, Nogueira, CL, Souza, BS, Sena, SG, da Silva, RM, Bazzo, ML. 2011. Micobactérias: Epidemiologia e Diagnóstico. Revista de Patologia Tropical. V. 40 (3):207-229 Nogueira CL, Wildner LM, Senna SG, Rovaris D, Gruner MF, Jakimiu AR, da Silva RM, Bazzo ML. Alternative sputum treatment to improve the PCR assay for Mycobacterium tuberculosis detection. 2012. Int J Tubercul Lung Dis. V. 16(6), 783-787.
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Produção Científica
Artigos submetido: “Identification of Mycobacterium Species by Multiplex PCR Assay in University Hospital from Florianópolis Santa Catarina – Brazil” (ICE 18815.03.12).
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Produção Científica
Resumos em Congressos e seminários:
NOGUEIRA, C L; SENNA, SG, ROVARIS DB, MAURICI da SILVA R, BAZZO, ML. Epidemiological Profile of Tuberculosis in Santa Catarina State, Brazil. In: II Workshop da Rede-TB, 2011, Rio de Janeiro. II Workshop da Rede-TB. Rio de Janeiro : Universidade Gama Filho, 2011. v. 1. p. 167-168.
LIEDKE, SC, DAIKURA, L, SENNA, SG, NOGUEIRA CL, WILDNER LM, MAURICI da SILVA, R, BAZZO, M. L. . Padronização da Metodologia Molecular Multiplex PCR para Diferenciação de Isolados Clínicos de Micobactérias. In: II Workshop da Rede-TB, 2011, Rio de Janeiro. II Workshop Rede-TB. Rio de Janeiro : Universidade Gama Filho, 2011. v. 1. p. 220-221
NOGUEIRA, C L, WILDNER, LM, SENNA SG, LIEDKE, SC, ROVARIS, D,B, GRUNER MF, JAKIMIU, A R, BAZZO ML. Improved DNA Extraction Directly fo Sputum to Detect Mycobacterium tuberculosis with IS6110 and 16S rRNA gene. In: 26 Congresso Brasileiro de Microbiologia, 2011, Foz do Iguaçú - PR. Microbiologia in foco edição especial. São Paulo : Vox Editora Ltda., 2011. v. 16. p. 145-145.
WILDNER, LM, SENNA SG, BAZZO ML. Padronização de PCR em tempo real para detecção e identificação de micobactérias na rotina do Hosp Universit Polydoro Ernani de São Thiago, Fpolis- SC. In: 26 Cong Bras de Microbiologia, 2011, Foz do Iguaçú - PR. Microbiol in foco. SP: Vox Editora Ltda, 2011. v. 16. p. 205-205.
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Produção Científica
Resumos em Congressos e seminários:
LIEDKE SC, DAIKURA, L, SENNA SG, NOGUEIRA C L, WILDNER, LM, da SILVA, RM, BAZZO ML. Padronização da Metodologia Molecular Multipelx PCR para Diferenciação de Isolados Clínicos de Micobactérias do Estado de Santa Catarina. In: 26 Congresso Brasileiro de Microbiologia, 2011, Foz do Iguaçú - PR. Microbiologia in foco edição especial. São Paulo: Vox Editora Ltda, 2011. v. 16. p. 167-167.
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Considerações Finais
Agradeçemos à FAPESC e as demais agências fomentadoras do edital PPSUS pelo financiamento que tem possibilitado o desenvolvimento do grupo de pesquisa do Laboratório Biologia Molecular e Micobactérias e das parcerias estabelecidas.
Nos alegra saber que os testes por nós realizados já estão possibilitando aos pacientes atendidos no SUS acesso às modernas técnicas diagnósticas.
LBM M
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Obrigada!
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