Antidopingová kontrola u sportovních a dostihových koní

Petr Jahn, VFU Brno

Doping u koní

Definice

použití nedovolených substancí a prostředků s cílem ovlivnit přirozené aktuální výkonnostní schopnosti koně při sportovních soutěžích a dostizích

Formy dopingu

• pozitivní (doping na vítězství) • krátkodobý (amfetamin) • dlouhodobý (anabolika) • negativní (tlumivý) - doping k dosažení porážky, útlumu

Doping u koní

• •

Úmyslný ?

Vlastní zavinění Cizí zavinění

• • • •

Neúmyslný ?

Zbytky léčiv Kontaminace krmiv Kontaminace boxu Neznalost pravidel

– –

Zodpovědná osoba Veterinář

Důvody antidopingové kontroly u koní

• sportovně-etické důvody • ochrana zvířat (welfare) • ochrana ostatních účastníků před nekontrolovatelným medikovaným zvířetem • mylné chovatelské závěry • ochrana sázkového provozu • vyšetření koní při koupi

Antidopingová kontrola

zač. 20. stol.: první antidopingové kontroly (sliny) 70. léta:



chromatografie na tenké vrstvě (screening)



hmotnostní spektrometrie (konfirmace) 80. léta:



ELISA – vysoká senzitivita



plynová a vysokotlaká chromatografie (HPLC)



hmotnostní spektrometrie

Antidopingová kontrola

• odběr vzorku • laboratorní analýza vzorku • interpretace pozitivního nálezu a vyvození důsledků (legislativa)

Metodika odběru



vyčleněný box



identifikace koně



odběr moči



odběr krve



vzorek A



vzorek B



Metodika odběru

Laboratorní analýza vzorku

Akreditované laboratoře:

 Horseracing Forensic Laboratory, Newmarket, Velká Británie  Laboratoire Federation Nat. des Courses Francaises, Chatenay-Malabry, Francie  Deutsche Sporthochschule K öln, SRN  Universiteit Gent, Belgie  Institut Municipial d Investigacio Medica, Barcelona, Španělsko  Equine Drug Research Laboratory, Uppsala, Švédsko

Laboratorní analýza vzorku



ELISA

 

plynová a vysokotlaká chromatografie (HPLC) hmotnostní spektrometrie

•

vysoká citlivost (ppm množství) !!!

Legislativa - FEI

– www.feicleansport.org

–

5. dubna 2010:

–

Veterinary Regulations

–

Prohibited Substances List

–

FEI List of Detection Times

–

Equine Anti-Doping and Controlled Medication Regulations (1. vydání)

Legislativa - FEI

1.

2.

3.

4.

Látky zcela vyloučené z použití u koní (nemají indikaci – psychofarmaka…) Medikamenty s kontrolovaným použitím (protizánětlivé, analgetika…) Látky povolené (antibiotika, antiparazitika, antiuloceróza…) Látky prahové (tělu vlastní nebo obsažená v krmivech)

Prahové látky

Látka Boldenon Oxid uhličitý DMSO Estradiol (samci, ne valaši) Hydrokortizon Kyselina salicylová Testosteron Prahová koncentrace 0,015 µg/ml moči u hřebců 36 mmol/l plazmy 15 µg/ml moči n. 1 µg/ml plazmy 5 α estran-3 β,17 α -diol moči 0,045 µg/ml 1 µg/ml moči 625 µg/ml moči n. 5,4 µg/ml plazmy 0,02 µg/ml moči (valaši) 0,055 µg/ml moči (klisny)

Legislativa - FEI

FEI Prohibited Substances List 1 148 položek nesmí být během soutěže v exkretech a tělesných tekutinách každoroční aktualizace

Legislativa - FEI

List of Detection Times • fenylbutazon, flunixin, ketoprofen, metamizol,dembrexin, mepivakain, detomidin, lidokain, clenbuterol, butylskopolamin, dexamethason, metylprednisolon acetát, triamcinolon acetát

Legislativa - FEI Detekční časy léčiv (DT)

• Doba po aplikaci léčiva, během níž lze stanovit jeho přítomnost v organismu (liší se od ochranné lhůty) Stanoveny: • pro odlišení legitimního ošetření koní od cíleného dopingu • pro zajištění welfare a regulérnosti sportu

Legislativa - FEI Detekční časy léčiv

Ovlivněny: • hmotností koně • způsobem aplikace • velikostí a počtem dávek • tréninkem, výživou • individuálními faktory (metabolismus) • metodikou v laboratoři • riziko „recyklace“

pouze informativní význam!!!

Legislativa - FEI

Equine Anti-Doping and Controlled Medication Regulations • • •

1. vydání závazné postupy při nálezu zakázaných substancí postihy zodpovědných osob

Legislativa - IFHA

IFHA (článek 6 Mezinárodní dohody o chovu, dostizích a sázkách):        metodika odběru sankce při pozitivním nálezu odpovědná osoba (trenér) omezení medikace v den dostihu zakázané látky s nulovou tolerancí zakázané látky s prahovou koncentrací akreditace laboratoří

Legislativa - IFHA

IFHA (článek 6)  plný souhlas 42 zemí (ČR, SR)  částečný souhlas 13 zemí  nepodepsalo 5 zemí

Legislativa - IFHA

Zakázané látky s nulovou tolerancí (zero tolerance) ovlivňující:  nervový aparát        kardiovaskulární aparát respirační aparát trávicí aparát močový aparát reprodukční aparát muskuloskeletální aparát krev   imunitní systém (kromě vakcín) endokrinní systém

European Horserace Scientific Liaison Committee

• www.ehslc.com

• list of detection times: fenylbutazon, flunixin, karprofen, ketoprofen, mexikam, eltenac, dipyron, vedaprofen, furosemid, mepivakain, meklofenamová kyselina, dembrexin, detomidin, naprofen, butylskopolamin, lidokain, omeprazol

Legislativa - IFHA

Zakázané látky s prahovou koncentrací:

Látka Arzenik Oxid uhličitý DMSO Estradiol (hřebci) Hydrokortizon Boldenon Prahová koncentrace 0,3 µg/ml moči 37 mmol/l plazmy 15 µg/ml moči n.

1 µg/ml plazmy 0,045 µg 5αstran-3β, 17α diol/ml moči 1 µg/ml moči 0,015 µg/ml moči Kyselina salicylová Testosteron 759 µg/ml moči n. 6,5 µg/ml moči 0,02 µg/ml moči (hřebci) 0,055 µg/ml moči (klisny) 2 µg/ml moči Theobromin

Legislativa - IFHA

Sankce (IFHA článek 6):  diskvalifikace koně  penalizace zodpovědné osoby (trenér)

Nejčastější nálezy zakázaných látek HFL Newmarket, 2002

• 140 vzorků pozitivních (0,6 %) • 44 zakázaných látek bylo detekováno • 31 vzorků – morfin • 16 vzorků – flunixin (Meflosyl) • 10 vzorků acepromazin (Sedalin) Amfetamin, dexametazon, furosemid, isoxsuprin, fenylbutazon, triamcinolon, atropin, kofein, klenbuterol, dembrexin, prokain a další

Léčiva - jak předejít pozitivnímu nálezu?

• Evidovat veškerou medikaci koně • Dodržovat detekční doby léčiv (+ „bezpečnostní zónu“) • Zamezit kontaminace stáje – důsledně izolovat léčeného koně (riziko kontaminace stáje – izoxsuprin) • Veškerá medikace koní během soutěže podléhá schválení veterinární komise (GJ)

Krmiva jak předejít pozitivnímu nálezu?

• nepoužívat krmiva s neznámým složením – mohou obsahovat kontaminanty • informovat se o složení • rostlinné produkty se sedativním nebo stimulačním účinkem jsou zakázány (valerian) • rostlinné produkty mohou obsahovat zakázané látky přesto že výrobce deklaruje opak (salicyláty, digitalis) • negativní výsledek po krmení krmného doplňku v minulosti nezaručuje negativní výsledek v budoucnu (vývoj detekčních metod)

Jak předejít podání látky s cílem poškodit soupeře?

• omezený přístup do stájí • kontrola osob • ostraha stájí v noci

ELECTIVE TESTING

Možnost pro majitele koní testovat přítomnost zakázaných látek v moči (maximálně čtyři vybrané) • referenční laboratoře • Appendix 1 - seznam látek (celkem 68), které lze testovat • Medication Form 4 • vyrozumění laboratoře, platba • výsledek do tří dní • negativní výsledek – možné ovlivnění nevhodným skladováním