Transcript 溶剂准备：脱气
Author：Tianyou Yue Agilent 1100LC一般性维护保养 • • • • 本节内容 Agilent1100LC的各部件简要原理介绍； 1100LC各模块使用注意事项； 1100LC各个模块易耗品的更换； 1 Author：Tianyou Yue 关于溶剂 • 所用溶剂应为HPLC级，水应为二次超纯水； • 所用溶剂应经过过滤。过滤水应使用水相滤膜，过滤有机相应使用有机相滤 膜，不能混用，也不要用错。每一张滤膜只能用一次，不能重复使用。 如果没有在线脱气机，所用溶剂应经过超声脱气。 水易滋生藻类，避免直接照射，过滤后的水最好使用不要超过两天。 如果条件允许可向溶剂中加入0.001-0.0001M的叠氮化钠。 注意溶剂的相容性，避免使用不相容的溶剂。 避免使用强酸、强碱或有机氯等腐蚀性溶剂。 在溶剂瓶中的溶剂过滤头可能会堵塞，必要时小心拿下用强酸（35%硝酸） 浸泡1小时，用水冲洗，但不要使用超声处理。 • • • • • • 2 Author：Tianyou Yue 溶剂准备：过滤 真空 过滤装置 使用HPLC纯溶剂 防止固体颗粒损伤仪器或柱头 使用小于 0.5 m过滤膜. 有机物 - Teflon 水 - Nylon 66 3 Author：Tianyou Yue 溶剂准备：脱气 目的 排除溶解在流动相中的氧气和氮气 脱气方法 He脱气 回流加热脱气 真空脱气 超声脱气 4 Author：Tianyou Yue 在线真空脱气机 • 在线真空脱气机的管路容量为12ml， 压力范围为110Torr-190Torr。 • 12 ml Solenoid valve 为保证脱气机的良好使用性能，在下 述情况下需要用注射器抽洗脱气机管 路，每个通道使用不低于30ml的异丙 醇。 1，新的脱气机或新的管路； 2，更换了溶剂，尤其是缓冲盐与有机相 之间、两个不相容流动相之间的互换 时； 3，输液泵关闭了一段时间，或使用挥发 性溶剂混合物。 4，完成上述操作后，打开清洗阀，用大 流量冲洗，5ml/min。 5 Author：Tianyou Yue 关于泵（四元泵） 出口球阀BOV 阻尼器/压力传感器 清洗阀Purge Valve 主动输入阀AV 梯度比例阀 柱塞杆Piston 溶剂瓶 泵驱动 6 Author：Tianyou Yue 二元泵工作原理 Damper Purge valve Waste Mixer Outlet valve Outlet valve Inlet valve Inlet valve A B 7 Author：Tianyou Yue 关于泵（泵头组件） 出口球阀BOV 清洗阀Purge Valve 密封垫Seal 3 1，在线冲洗组件Seal Wash，可选件。 2，密封垫； 3，Washer密封膜； 2 1 主动输入阀AV 柱塞杆Piston 8 Author：Tianyou Yue 更换过滤白头 清洗阀PurgeValve • 过滤白头 金密封垫 聚四氟乙烯密封垫 在清洗阀中的过滤白头需要更换，在清 洗状态下，设置流量为5ml/min，此时 系统压力如果超过10bar，则需更换过 滤白头。 • 更换步骤： 1，关闭泵电源； 2，用扳手去掉通往进样器上的毛细管，拔 掉废液管； 3，用专用扳手小心把清洗阀卸下来； 4，轻轻去掉聚四氟乙烯密封垫和金密封垫 ，将过滤白头拿出； 5，更换新的过滤白头，装上聚四氟乙烯密 封垫和金密封垫； 6，装上清洗阀； 7，连接管路。 9 Author：Tianyou Yue 更换过滤白头 1，去掉毛细管，废液管 3，更换过滤白头 2，卸掉清洗阀 4，更换白头，装好清洗阀 10 Author：Tianyou Yue 泵的注意事项 1，溶剂的过滤、脱气； 2，避免使用腐蚀性溶剂； 3，在满足分析的前提下，尽可能使用较 低的流速—较低的系统压力。 4，更换过滤白头； 5，考虑溶剂的相容性； 6，尽可能使用新鲜的水； 7，使用0.01M以上浓度的缓冲溶液要选 配柱塞清洗组件，清洗液不能干涸。 8，使用正相溶剂比如环己烷时，建议使 用聚乙烯密封垫，部件号为09051420，在0—200Bar下使用聚乙烯密 封垫比标准密封垫更耐磨损。 • • 四元泵： 四元泵多通道比例阀MCGV使用时 注意，缓冲溶液要放在A、D通道 ，以避免盐颗粒析出。建议A通道 ：水；B、C通道：有机溶剂；D 通道：缓冲溶液。 二元泵： 设置压缩因子补偿，以达到最佳 比例效果。 11 Author：Tianyou Yue 样品准备 关于进样器 过滤样品，确保样品中不含固体颗粒 用流动相或比流动相弱的溶剂溶解样品 进样量尽量小 样品完全溶解在流动相中 样品没有完全溶解 12 Author：Tianyou Yue 手动进样器 六通阀 手动进样阀 - 六通阀 Load Sample Syringe Inject To Waste To Waste To Column To Column From Pump Sample Loop (Fixed Volume) From Pump 13 Author：Tianyou Yue 手动进样器 • • • 样品要干净、经过过滤。 合适的进样体积，比如定量环为20ul ，进样体积应为0—10ul，或者20ul， 进样20ul时注射样品量应至少60ul以 上。 定期清洗进样阀，清洗过程如下： 1，将进样阀旋至Inject位置； 2，用带有专用头的注射器用纯水约 20—30ml冲洗进样阀； 3，将进样阀旋至Load位置。 参考左图。 14 Author：Tianyou Yue 自动进样器 Metering device Sampling unit From pump To column 准备位置 6-port valve To waste 调用样品瓶 吸样品 进样和运行位置 标准进样过程 ... 15 Author：Tianyou Yue 自动进样器 •样品要干净、经过过滤。 洗针：把样品残留降低到 最小限度，可降低进样的 记忆效应，洗针瓶最好不 要加瓶垫。 多次吸液 用于进样量大于100ul 16 Author：Tianyou Yue 关于恒温柱箱 • • • 控制范围：最高80ºC，低温低于室温 10ºC。 预热块体积左面为3ul，右面为6ul， 除非有特殊要求，左右温度应保持一 致。 一定要关闭前面板。 17 Author：Tianyou Yue 色谱柱保护 预柱和保护柱 从泵来的 流动相 预柱 预柱是针对流动相来保护色谱柱 进样口 保护柱 分析柱 保护柱是针对样品来保护色谱柱 至检测器 18 Author：Tianyou Yue 色谱柱保护 过滤所有的溶剂和样品 使用保护柱 仪器在使用完毕，要冲洗整个系统，移走系统中的缓冲液。 柱子在不使用时，两端密封保存 在适当的溶剂中保存柱子 注意色谱柱的pH值使用范围 不要高压冲洗柱子 不要高温下过长时间使用硅胶键合相 19 Author：Tianyou Yue 检测器—DAD • DAD的光源—氘灯有一定的半衰期， 一般为1000小时左右，所以在没有样 品分析任务时要关闭氘灯，以延长氘 灯的使用寿命。 • 流动池污染后，会造成灵敏度下降、 噪声加大，应避免脏的样品进入流动 池。定期使用异丙醇冲洗系统对保持 流动池性能有一定好处。 更换氘灯。 • 20 Author：Tianyou Yue 检测器—VWD • VWD的光源—氘灯有一定的半衰期 ，一般为1000小时左右，所以在没有 样品分析任务时要关闭氘灯，以延长 氘灯的使用寿命。 • 流动池污染后，会造成灵敏度下降、 噪声加大，应避免脏的样品进入流动 池。定期使用异丙醇冲洗系统对保持 流动池性能有一定好处。 更换氘灯。 • 21 Author：Tianyou Yue 计算机操作系统的维护 •经常性删除临时文件子目录中及垃圾斗中的文件。 •使用ScanDisk或Checkdisk检查盘上的错误。 •消除硬盘上的碎片（Windows 2K）。 •使用杀病毒软件。 •创建Emergency Repair disk (Windows 2K)。－运行rdisk。 如果计算机被非法关机，临时文件子目录中会留下许多临时文件，如果不及时清除，这些文件 会影响系统的性能。所以，这些文件应定期删除。 定期拷贝有用的文件。 在工作站中有用的文件是指： 1. 数据文件(xxx.D)。2. 方法文件(xxx.m)。3. 序列文件(xxx.s)。 定期拷贝这些文件后，清除工作站子目录下的这些文件，以节省硬盘空间，使运算速度正常。 •禁止使用盗版软件，建议在运行工作站的同时，不要使用中文操作平台，防止与工作站发生冲 突。 22