Transcript 水果和蔬菜中101种农药多残留测定方法

水果和蔬菜中101种农药多残留测定方法
—气相色谱-质谱法
前言

由于色谱仪仅靠物质的保留时间进行定性
分析，并不能得到分子结构的信息；当样品复
杂时，许多组份之间的保留时间只差数秒，甚
至重合，就很难判定目标化合物了。

即使分析者用两根色谱柱进一步确认分析
对象，“其分析结果对于确认目标化合物的确
认能力也是有限”。

GC/MS联用技术可以在色谱峰不完全分离
的情况下，用质量色谱法和选择离子检测，对
其中的化合物分别定量；

GC/MS联用技术定量分析的特点是先定性，
后定量，因而避免假阳性检出。

目前，国际上要求检测的多种农药，其中
很大部分可用气质联机检测。

我中心在查阅国外大量相关文献的基础上，
引进国外GC-MS农药多残留快速检测技术，
根据我国国情做了相应改进，建立了一套适合
我国国情的蔬菜和水果中GC-MS农药多残留
快速检测技术。

该技术建立了一种使用GC-MS，通过一
次提取、两次进样完成蔬菜和水果中101种农
药的定性和定量的快速检测方法。
1 适用范围

本方法适用于常见蔬菜和水果中（苹果，西红
柿，白菜，油菜，胡萝卜，卷心菜，茄子，菠
菜，尖椒和韭菜）101种农药残留量的测定。

本方法的最低检出限为0.0010mg/kg0.3488mg/kg（参见附录A）。
2 原理
试样用丙酮和二氯甲烷（4：3）的
混合溶液匀浆提取，无水硫酸钠干燥后，
经凝胶色谱和固相萃取柱净化，用丙酮+
乙酸乙酯（1：1）洗脱农药，采用气相
色谱-质谱联用仪检测。
3 试剂与材料
除非另有说明，在分析中仅使用确认的分析纯
试剂和GB/T 6682中规定的至少三级的水。
3.1
3.2
3.3
3.4
3.5
3.6
3.7
3.8
环己烷，色谱纯；
丙酮；
二氯甲烷；
石油醚；
乙酸乙酯，色谱纯；
无水NaSO4 ：450℃烘4h ；
NaCl：140℃烘4h ；
内标化合物：Chrysene；
3.9 固相萃取柱：Enxi-Carb 活性炭柱， 6mL, 0.5g或相当柱；
3.11 农药标准品共101种，纯度≥96% 。
3.12 农药标准溶液配制
单一农药标准溶液： 准确称取一定量农药标准品，用溶剂
( 丙 酮 、 正 己 烷 和 甲 醇 ） 稀 释 ， 逐 一 配 制 成 10 00 mg/L或
2500mg/L的单一农药标准储备液，贮存在-18℃以下冰箱中。
农药混合标准溶液：逐一吸取一定体积的单个农药储备液
分别注入同一容量瓶中，用溶剂(正己烷）稀释至刻度配置成
同一浓度（10 mg/L)的农药混合标准储备液。使用前用溶剂
(环己烷)稀释成所需浓度的标准工作液（1 mg/L) 。
4 仪器
4.1
气相色谱—质谱联用仪：配有电子轰击源（EI）；
HP 6890N/5973 GC-MS，配有四极杆质量分析器
和自动进样器，载气流量或压力控制，工作站及数据
处理软件。
4.2
凝胶色谱仪：色谱柱，17×250mm；填料，SX-3，
15g；流动相，环己烷/乙酸乙酯（1:1，V/V）；定量
环，2mL。
4.3
天
平：Sartorius分析天平（精确度0.0001g）；
4.3
匀浆机：IKA-WERKE；
4.4
旋转蒸发仪。
5 试样的制备与保存
5.1 试样的制备
取不少于1 000g蔬菜水果样品，取可食部分，用
干净纱布轻轻擦去样品表面的附着物，采用对角线分
割法取对角部分，将其切碎，充分混匀后放入食品加
工器粉碎，制成待测试样，密封，标明标记。
5.2 试样的保存
将试样冷冻保存。
6 测定步骤
6.1
6.2
6.3
6.4
6.5
6.6
提取
净化
浓缩
测定
平行试验
空白试验
7 结果计算
（1）由工作站按内标法自动计算 ；
（2）试样中被测农药残留量以质量分数ω计，数值
以毫克每千克（mg/kg）表示，按以下公式计算：
ω=
V1  A  V3
V2  AS  m
S
S——标准溶液中农药的含量，mg/L；
A—— 试样中被测农药的峰面积；
AS——农药标准溶液中被测农药的峰面积；
V1——提取溶剂总体积；
V2——吸取出用于检测的提取溶液的体积；
V3——试样定容体积；
m——试样的质量。
8 精密度
在重复性条件下获得的两次独立测
定结果的绝对差值不应超过算术平均值
的15 %。
9 准确度

在添加浓度在0.05mg/kg-0.5mg/kg范围内，
大多数化合物的平均回收率>70%，相对标准
偏差<20%，完全满足多残留快速检测的要求。
大白菜中10种农药的添加回收率
recovery
RSD
RECOVERY
RSD
140.0
120.0
100.0
A组
80.0
60.0
40.0
20.0
0.0
1
140.0
6
11
16
RECOVERY
RSD
26
31
36
41
46
51
56
农药编号
RSD
RECOVERY
120.0
100.0
B组
21
80.0
60.0
40.0
20.0
0.0
59
64
69
74
79
84
89
94
99
104
109
114
编号
技术路线
称样
匀浆提取
6g氯化钠+140mL丙酮:
二氯甲烷
取70mL上清夜
无水硫酸钠干燥
浓缩
GPC净化
浓缩
活性炭净化
浓缩
GC-MS
谢 谢！
6.1 提 取
称取20克试样+氯化钠6克+4：3的丙酮和二氯甲烷140毫升
匀浆提取一分钟
静置后，将上清液倾倒在装有20克无水硫酸纳的锥型
瓶中，干燥30分钟（每隔5分钟摇晃一次）
准确量取提取液70ｍＬ，过装有无水硫酸钠的玻璃漏斗
用二氯甲烷淋洗无水硫酸钠近无色，合并淋洗液于圆底烧瓶
将提取液浓缩近干（水浴温度≤38℃）
6.2 净 化
由于各种蔬菜的性质不同，干扰因素有很大的差
别，因此不同的蔬菜要采取不同的净化方法。
（1）对于色素含量较低的蔬菜（苹果、西红柿、大白菜
等），经活性炭固相萃取柱净化。
（2）对于色素含量较高的蔬菜（菠菜、韭菜等），先过
凝胶色谱，再用活性炭固相萃取柱净化;
6.2.1 凝胶过滤
将提取液浓缩后用环己烷定容到2.0 mL
上样
用1：1的环己烷和乙酸乙酯淋洗
流速3.0 mL/min
进样6min后开始接收流出液，20min后（接
收60 mL）停止接收
将流出液浓缩近干，准备过活性炭小柱
6.2.2 固相萃取

固定相活化 Conditioning
先用5mL的乙酸乙酯，5mL丙酮和乙酸乙酯混合液
（１：１）分别预淋洗小柱，淋洗液弃去 ；

上样 Load sample
用3 mL石油醚溶解提取液上样,流出液接收到KD瓶
中；

洗脱 Analyte elution
用1：1的丙酮和乙酸乙酯淋洗液35mL洗脱样品，
洗脱液接收到KD瓶中。
6.3 浓 缩
用旋转蒸发仪将洗脱液浓缩至〈0.5 mL，
添加内标（进样浓度1μg/ｍＬ）并用环己烷定
容到0.5mL（在ＫＤ瓶中），混匀，用于GCMS测定。
6.4 测 定
6.4.1 仪 器 条 件
6.4.2 定 性 测 定
6.4.3 定 量 测 定
6.5 平 行 试 验
按以上步骤对同一试样进行平行试验
测定。
6.6 空 白 试 验
除不称取试样外，均 按以上步骤进行。
6.4.1 仪 器 条 件
a) 色谱柱: HP-5MS柱，30 m×0.25 mm×0.25μm；
b)
色谱柱温度程序:
60℃（保持2 min）15℃/
min 150℃ 6℃/ min 280℃（15.33min）；
c) 载气：氦气，纯度≥99.999%，流速为1 mL/
min 。
6.4.1 仪 器 条 件
d) 进样口温度： 260℃ ；
e) 进样方式 ：不分流进样，由自动进样器进样；
f) 进样量： 1μL ；
6.4.1 仪 器 条 件
g) 离子源温度: 230 ℃；
h) 分析器温度: 150℃；
i) GC-MS接口温度: 280℃；
j) 电子轰击源:
70eV ;
6.4.1 仪 器 条 件
k) 扫描方式：选择离子（SIM） 。
每种化合物分别选择1个定量离子，2个- 3个定性
离子。
根据保留时间将 101种农药分成两组，每组所需检
测的离子按照出峰顺序，分时段分别检测。
溶剂延迟5min。
每组化合物的保留时间、定性离子、定量离子参见
附录B；
6.4.2 定 性 测 定

保留时间
保留时间误差小于0.02min ；

选择特征离子
所选特征离子的相对丰度变化在规定范围内；

质谱定性
质谱图库检索匹配应在70%以上。
101种标样选择离子色谱图
苹果中101种农药选择离子色谱图
西红柿中101种农药选择离子色谱图
大白菜中101种农药选择离子色谱图
6.4.3 定 量 测 定

本方法采用内标法单离子定量测定，利用选
择特征离子进行定量分析 ；

内标物为 Chrysene ；
注：标准溶液的浓度应与待测化合物的浓度相近。
基质效应强的试样，用空白基质提取液配制基质
混合标准工作溶液。
附 录 A 101种农药中英文名称和方法检出限
序号
中文名称
英文名称
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
40
敌敌畏
乙酰甲胺磷
速灭威
氧化乐果
残杀威
丙线磷
二溴磷
久效磷
甲拌磷
氯硝胺
西玛津
莠去津
γ-666
特丁磷
地虫磷
二嗪磷
乙拌磷
百菌清
抗蚜威
除线磷
乙烯菌核利
甲基对硫磷
西维因
对氧磷
杀螟硫磷
抑菌灵
艾氏剂
毒死蜱
三氯杀螨醇
三唑酮
溴硫磷
敌菌灵
甲基硫环磷
喹硫磷
乙基溴硫磷
α-硫丹
丁草胺
丙溴磷
狄氏剂
b-硫丹
dichlorvos
acephate
mevinphos
omethoate
isocarb
ethoprophos
dibrom
monocrotophos
phorate
dichloran
simazin
atrazine
3-BHC
terbufos
fonofos
diazinon
disulfoton
chlorthalonil
pirimicarb
diclofenthion
vinclozolin
methyl-parathion
carbaryl
paraoxon
fenitrothion
dichlofluanid
aldrin
chlorpyrifos
dicofol
triadimefon
bromophos
anilazine
mephosfolan
quinalphos
bromophos-ethyl
Thiodan-1
butachlor
profenofos
dieldrin
检出限/
（mg/kg）
0.0046
0.0269
0.0105
0.0661
0.0082
0.0051
0.0481
0.0467
0.0014
0.0117
0.0028
0.0025
0.0056
0.0069
0.0050
0.0139
0.0069
0.0011
0.0049
0.0400
0.0013
0.0011
0.0042
0.0022
0.0035
0.0032
0.0024
0.0370
0.0071
0.0089
0.0011
0.3488
0.0083
0.0087
0.0018
0.0088
0.0085
0.0014
0.0044
0.0153
附 录 A（续）
序号
中文名称
英文名称
41
42
43
44
45
46
47
48
49
50
51
52
53
54
55
56
57
58
59
60
61
62
63
64
65
66
67
68
69
70
71
72
73
74
75
76
77
PP-DDD
乙硫磷
伐灭磷
PP-DDT
亚胺硫磷
苯硫磷
联苯菊酯
甲氰菊酯
伏杀磷
乙基谷硫磷
二氯苯醚
二氯苯醚
氟氯氰菊酯
氟氯氰菊酯
氟氯氰菊酯
氟氯氰菊酯
氰戊菊酯
氰戊菊酯
甲胺磷
速灭磷
异丙威
仲丁威
氯苯胺灵
百治磷
治螟鳞
α-666
六氯苯
乐果
克百威
β-666
五氯硝基苯
巴胺磷
磷胺-1
δ-666
敌稗
磷胺-2
甲基毒死蜱
pp'-ddd
ethion
famphur
pp'-DDT
phosmet
EPN
Bifenthrin
fenpropathrin
phosalone
ethyl-azinphosmethyl
Cis-permethrin
trans-permethrin
cyfluthrin-1
cyfluthrin-2
cyfluthrin-3
cyfluthrin-4
trans-fenvalerate
cis-fenvalerate
methamphetamine
mevinphos
etrofolan
baycarb
DOW-K-6882
dicrotophos
sulfotep
a-BHC
hexachlorobenzene
dimethoate
carbofuran
b-BHC
quintozene
propetamphos
phosphamidon-1
4-BHC
propanil
phosphamidon-2
chlorpyriphos-methyl
检出限/
（mg/kg）
0.0047
0.0024
0.0015
0.0084
0.0050
0.0052
0.0016
0.0156
0.0051
0.0230
0.0847
0.0022
0.0222
0.0058
0.0057
0.0430
0.0196
0.0802
0.0304
0.0038
0.0045
0.0040
0.0137
0.0135
0.0024
0.0092
0.0047
0.0145
0.0019
0.0055
0.0024
0.0122
0.0233
0.0111
0.0099
0.0097
0.0017
附 录 A（续）
序号
中文名称
英文名称
78
79
80
81
82
83
84
85
86
87
88
89
90
91
92
93
94
95
96
97
98
99
100
101
102
103
104
105
106
107
108
109
110
111
112
113
114
3-羟基克百威
七氯
皮蝇磷
甲基嘧啶磷
马拉硫磷
倍硫磷
对硫磷
毒壤磷
嘧啶硫磷
硫环磷
异柳磷
杀扑磷
OP-DDE
杀虫畏
灭菌磷
PP-DDE
OP-DDD
异狄氏剂
乙酯杀螨醇
OP-DDT
三唑磷
克瘟散
异菌脲
胺菊酯
胺菊酯
谷硫磷
三氟氯氰菊酯
定菌磷
蝇毒磷
氯氰菊酯
氯氰菊酯
氯氰菊酯
氯氰菊酯
氟胺氰菊酯
氟胺氰菊酯
溴氰菊酯
溴氰菊酯
3-hydrxy cabofuran
heptachlor
fenchlorophos
pirimiphos-methyl
malathion
fenthion
parathion
trichloronate
pirimiphos
phosfolan
isophenphos
methidathion
op.-DDE
tetrachlorvinphos
plondrel
pp'-DDE
op'-DDD
endrin
chlorobenzilate
op'-DDT
Hostathion
ediphenphos
iprodione
Tetramethrin-1
Tetramethrin-2
Azinphosmethyl
lambda-cyhalothrin
pyrazophos
coumaphos
cypermethrin-1
cypermethrin-2
cypermethrin-3
cypermethrin-4
fluvalinate-1
fluvalinate-2
deltamethrin-1
deltamethrin-2
检出限/
（mg/kg）
0.0655
0.0030
0.0039
0.0480
0.0089
0.0018
0.0014
0.0026
0.0030
0.0052
0.0192
0.0091
0.0110
0.0014
0.0018
0.0026
0.0010
0.0063
0.0073
0.0011
0.0065
0.0056
0.0023
0.0186
0.0025
0.0103
0.0114
0.0105
0.0065
0.0246
0.0228
0.0221
0.0429
0.0048
0.0137
0.0165
0.0183
附录
B
101
种农
药和
内标
化合
物的
保留
时间
、
定量
离子
、
定性
离子
编号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
药名
敌敌畏
乙酰甲胺磷
速灭威
氧化乐果
残杀威
丙线磷
二溴磷
久效磷
甲拌磷
氯硝胺
西玛津
莠去津
γ-666
特丁磷
地虫磷
二嗪磷
乙拌磷
百菌清
抗蚜威
除线磷
乙烯菌核利
甲基对硫磷
西维因
对氧磷
杀螟硫磷
抑菌灵
艾氏剂
毒死蜱
三氯杀螨醇
保留时间
8.082
10.064
10.414
12.118
12. 431
12.745
13.1
13.437
13.614
14.06
14.254
14.408
14.665
14.837
14.922
15.203
15.311
15.505
15.963
16.288
16.557
16.557
16.7
16.957
17.385
17.614
17.757
18.031
18.065
定量离子
185
136
108
156
110
158
185
164
260
206
201
200
183
231
246
304
274
266
166
279
285
263
144
275
277
224
263
314
139
定性离子1
109
94
79
110
152
139
145
127
231
176
186
215
181
153
137
179
186
268
238
251
212
125
115
149
260
167
293
286
250
定性离子2
145
183
77
141
0
200
109
192
121
124
173
173
221
288
109
137
142
231
72
223
198
109.1
116
247
125
226
329
258
141
定性离子3
0
0
0
0
0
242
97
160
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
331
0
附录
B
（续）
编号
30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
50
51
52
53
54
55
56
57
58
药名
三唑酮
溴硫磷
敌菌灵
甲基硫环磷
喹硫磷
乙基溴硫磷
α-硫丹
丁草胺
丙溴磷
狄氏剂
b-硫丹
PP-DDD
乙硫磷
伐灭磷
PP-DDT
亚胺硫磷
内标物
苯硫磷
联苯菊酯
甲氰菊酯
伏杀磷
乙基谷硫磷
二氯苯醚
二氯苯醚
氟氯氰菊酯
氟氯氰菊酯
氟氯氰菊酯
氟氯氰菊酯
氰戊菊酯
氰戊菊酯
保留时间
18.391
18.534
19.008
19.225
19.34
19.825
20.043
20.191
20.7
20.808
21.732
22.026
22.22
22.79
23.123
24.528
24.568
24.66
24.774
24.946
25.688
26.711
27.488
27.706
28.46
28.62
28.746
28.797
30.443
30.814
定量离子
208
331
239
196
146
359
339
176
339
345
339
235
231
218
235
160
228
157
181
181
367
160
183
183
226
226
226
226
225
225
定性离子1
181
329
241
168
157
331
341
160
374
263
341
165
153
125
165
133
定性离子2
293
125
178
140
298
303
265
188
297
277
265
237
384
217
199
161
定性离子3
169
166
265
182
132
163
163
206
206
199
199
167
167
323
165
349
154
105
184
184
199
199
206
206
419
419
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
241
237
0
0
241
0
0
0
0
0
0
0
0
0
附录
B
（续）
编号
59
60
61
62
63
64
65
66
67
68
69
70
71
72
73
74
75
76
77
78
79
80
81
82
83
84
85
药名
甲胺磷
速灭磷
异丙威
仲丁威
氯苯胺灵
百治磷
治螟鳞
α-666
六氯苯
乐果
克百威
β-666
五氯硝基苯
巴胺磷
磷胺-1
δ-666
敌稗
磷胺-2
甲基毒死蜱
3-羟基克百威
七氯
皮蝇磷
甲基嘧啶磷
马拉硫磷
倍硫磷
对硫磷
毒壤磷
保留时间
7.865
10.048
11.425
12.38
12.957
13.277
13.494
13.734
13.94
14.122
14.323
14.494
14.86
14.81
15.254
15.357
16.254
16.334
16.551
16.6
16.751
16.985
17.465
17.734
17.96
17.957
18.123
定量离子
141
192
121
121
213
127
322
219
284
87
164
219
295
236
264
219
161
264
286
137
272
285
290
173
278
291
297
定性离子1
94
164
136
150
171
193
294
181
286
125
149
217
265
194
127
183
163
127
125
180
337
125
305
158
125
263
269
定性离子2
126
127
91
107
154
237
266
183
282
229
131
254
237
138
193
181
217
193
288
151
237
109
276
125
153
235
109
定性离子3
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
附录
B
（续）
编号
86
87
88
89
90
91
92
93
94
95
96
97
98
99
100
101
保留时间
18.723
19.134
19.277
19.734
19.843
20.071
20.248
20.803
21.043
21.448
21.763
22.031
22.597
22.934
24.357
24.551
24.568
24.763
25.683
定量离子
333
255
213
145
318
329
299
318
235
345
251
235
162
310
314
164
定性离子1
318
182
185
157
316
331
243
246
165
317
139
165
172
173
245
123
定性离子2
304
210
255
302
176
333
148
316
237
265
253
237
257
109
187
135
0
102
103
药名
嘧啶硫磷
硫环磷
异柳磷
杀扑磷
OP-DDE
杀虫畏
灭菌磷
PP-DDE
OP-DDD
异狄氏剂
乙酯杀螨醇
OP-DDT
三唑磷
克瘟散
异菌脲
胺菊酯
内标物
胺菊酯
谷硫磷
定性离子3
109
0
0
0
0
0
130
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
164
160
123
132
135
125
0
104
三氟氯氰菊酯
26.386
181
197
141
0
105
106
107
108
109
110
111
112
113
114
定菌磷
蝇毒磷
氯氰菊酯
氯氰菊酯
氯氰菊酯
氯氰菊酯
氟胺氰菊酯
氟胺氰菊酯
溴氰菊酯
溴氰菊酯
26.717
27.82
28.957
29.111
29.231
29.289
30.826
30.951
31.44
31.883
373
362
181
181
181
181
250
250
253
253
221
226
180
180
180
180
181
181
181
181
232
334
152
152
152
152
252
252
172
172
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
苹果空白
大白菜空白
西红柿空白