Transcript Polimorfismos del gen CHRNA5

UNIVERSIDAD DE SALAMANCA
FACULTAD DE MEDICINA
DEPARTAMENTO DE MEDICINA
Valor de los polimorfismos del gen CHRNA5 en la
adicción al tabaco. Influencia de los mismos en el
proceso de adicción y en la terapia de abandono
María José Bernabé Barrios1, Amparo Fernández Pertierra1, Helena González Burón2, Luís Palomo
Cobos3, Javier Pérez González4, José María González Ruiz5, Miguel Barrueco Ferrero5, Rogelio
González Sarmiento2 .
1.-Hospital Universitario de Salamanca.
2.-Dpto. Medicina de la Universidad de Salamanca.
3.-Gerencia de Atención Primaria. Área de Salud de Cáceres.
4.-Departamento de Genética Universidad de Extremadura.
5.-Hospital Universitario de Salamanca. Dpto. Medicina de la Universidad de Salamanca.
Factores genéticos de la dependencia tabáquica
Fisher et al (1959): Factor genético como determinante del consumo de
tabaco.
Estudios recientes: fuerte asociación genética a la dependencia nicotínica.
Cromosomas 2, 5, 7, 9, 11, 17, 19, 22 y X.
 Genes relacionados con el metabolismo de la nicotina:
-Enzimas CYP- 450 (CYP2A6, CYP2D6 y CYP2B6).
-Metabolizadores lentos, extensos y ultrarrápidos.
 Sistema dopaminérgico:
DRD1 y DRD2.
Mayor prevalencia en fumadores y en ex fumadores portadores del alelo
DRD2 A2.
Disminución de la MAO A y MAO B en fumadores.
 Otros
Sistema Noradrenégico,
Glutamaérgico, Opioide, Canabinoide.
sistemas:
Serotoninérgico,
Factores genéticos de la dependencia tabáquica
Sistema colinérgico: Receptores
nicotínicos y muscarínicos.
Subunidad CHRNA5 indicador muy fuerte de
la dependencia nicotínica.
Cr. 15, rs 1696968 codificadora de
subunidades CHRNA5A3B4 se asocia: inicio
temprano dependencia nicotínica, cáncer
pulmón, enfermedad arterial periférica.
Variación rs 514743, CHRNA5: marcador
importante de la dependencia nicotínica.
Otras subunidades implicadas en la
dependencia nicotínica: CHRNB2, CHRNB3,
CHRNA6 y CHRNA7.
Modelo de receptor nicotínico.
Hipótesis y Objetivos
Hipótesis
Existencia de una asociación de las variaciones genéticas del gen
CHRNA5 y varios fenotipos de fumadores.
Objetivos
Analizar la relación entre las variaciones genéticas del gen
CHRNA5 y el inicio del consumo de tabaco.
Estudio de las influencias de los factores género y la edad en
fumadores, y su relación con las variaciones genéticas estudiadas.
Pacientes y métodos
Pacientes:
-Controles sanos: voluntarios que nunca han fumado (n: 188).
-Fumador: sujeto que ha fumado cualquier cantidad de
cigarrillos diariamente en el último mes (OMS) (n: 324).
Variables:
 En todos los individuos:
-Edad (años)
-Género (hombre/mujer)
-Categoría (fumador/no fumador)
-Polimorfismos del gen CHRNA5 (AA, GG y AG)
 Sólo en fumadores:
-Abstinencia (éxito o fracaso de la deshabituación tabáquica)
-Nivel de dependencia (test de Fagerström)
-Monóxido de carbono en el aire espirado
-Niveles de cotinina en sangre
Pacientes y métodos
Metodología de laboratorio:
 Extracción de sangre periférica:
-Obtención de células mononucleadas de sangre periférica.
-Purificación del DNA.
-Cuantificación del DNA.
 Amplificación de DNA mediante PCR cuantitativa
Estudio de los polimorfismos del gen CHRNA5
Imagen obtenida tras realizar PCR cuantitativa de los polimorfismos del gen CHRNA5 en controles.
Estudio estadístico
•
•
•
•
•
•
Análisis descriptivo y estratificado por edad y género.
Análisis de equilibrio de Hardy – Weinberg (EHW).
Paquete estadístico GENEPOP 3.4.
Test exacto de Fisher y cadenas de Markov.
Análisis multivariable.
Correción de Bonferroni.
Resultados y discusión
VARIABLE
Grupo control, no
fumadores
(n = 188)
Fumadores
(n = 324)
p
Edad, media(DE),
en años
44,03 (18,91)
42,94(9,40)
Grupo edad, nº
(%): < 40
102 (54,25%)
140 (43,20%)
42 (22,34%)
169 (52,16%)
0,000
44 (23,40)
15 (4,62%)
0,000
85 (45,21%)
171 (52,77%)
103 (54,79%)
153 (47,23%)
0,389
41-60
>61
Género, nº (%):
Varones
Mujeres
Características de los controles y de los casos
0,099
Resultados y discusión
CONTROLES
%
FUMADORES
%
Alelo A
38,2
46,9
Alelo G
61,7
53,0
Homocigoto AA
14,9
20,9
Heterocigoto AG
46,8
51,8
Homocigoto GG
38,2
27,1
CHRNA5
P
0.013
0.003
Distribución de las frecuencias alélicas y genotípicas estudiadas en fumadores (casos) y no
fumadores (controles)
Resultados y discusión
0.7
0.6
Proporción
0.5
0.4
Alelo1
Alelo2
0.3
0.2
0.1
0
Control
Fumador
Frecuencias alélicas en controles y fumadores (alelo 1 = A; alelo 2 = G).
Resultados y discusión
0.6
0.5
Proporción
0.4
Homocigoto1
0.3
Heterocigoto
Homocigoto2
0.2
0.1
0
Control
Fumador
Frecuencias genotípicas en controles y fumadores (homocigoto 1 = AA; homocigoto 2 = GG).
Resultados y discusión
Modelo
Genotip
Controles
N (%)
Casos
N (%)
OR
Codominante
GG
72(38,2)
88(27,1)
1
AG
88(46,8)
168(51,8)
1,5
0,97-2,31
AA
28(14,9)
68(20,9)
1,94
1,08-3,47
0,025
GG
72(38,2)
88(27,1)
1
AG-AA
116(61,7)
236(72,8)
1,60
1,06-2,41
0,024
GG-AG
160(85,0)
256(79,0)
1
AA
28(14,9)
68(20,9)
1,52
0,90-2,56
0,112
1,41
(1,06-1,87)
0,017
Dominante
Recesivo
Aditivo
IC del 95 %
Análisis del riesgo de polimorfismo CHRNA5 en función del modelo de herencia.
P
Conclusiones
1.
El alelo G del gen CHRNA5 es significativamente más frecuente
en controles que en fumadores.
2.
El genotipo homocigoto GG del gen CHRNA5 es
significativamente más frecuente en controles que en fumadores.
3.
El alelo A del gen CHRNA5 es significativamente más frecuente
en fumadores que en controles.
4.
El genotipo homocigoto AA del gen CHRNA5 es significativamente
más frecuente en fumadores que en controles.
5.
Estas conclusiones permiten avanzar la hipótesis de que el
genotipo homocigoto GG puede actuar como un factor protector
frente al tabaquismo, mientras que el hecho de portar el genotipo
homocigoto AA constituye un factor de riesgo para el inicio al
consumo y posiblemente dificulta el abandono del tabaco en los
fumadores.