Transcript 如何撰写国家自然科学申请书（安威）

如何撰写一份高质量的
国家自然科学申报书
安 威
首都医科大学基础医学院
科学基金申请的“三境界”---王国维
• 追求过程：昨夜秋风凋碧树，独上高楼，望尽
天涯路 --- thinking & construction (构思)
• 艰难时刻：衣带渐宽终不悔，为伊消得人憔悴
--- writing (笔耕)
• 甘美的果实：众里寻他千百度，暮然回首，那
人却在灯火阑珊处 --- awarded (捷报)
对于科研工作者而言，
基金不是万能的，
但没有基金却是万万不能的！
承担自然科学基金年轻化
是近年来的特点
• 青年申请者明显增加，45岁以下的项目申请
人为19456人，占学部面上项目申请人总数
的77.13%，比去年增加了3034人，增长率
为18.48%。
• 具有博士学位的项目申请人为16282人，占
学部面上项目申请人总数的64.55%，比去
年增加了3085人，增长率为23.38%。
(摘自国家自然科学基金2006年报告)
1999年度获国家自然科学基金面上项目资助的前20所高校
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
单位名称
浙江大学
清华大学
北京大学
中国科技大学
天津大学
第二军医大学
第四军医大学
复旦大学
南京大学
南开大学
四川大学
上海交通大学
武汉大学
北京航空航天大学
西安交通大学
华中理工大学
中山大学
北京医科大学
中国农业大学
华南理工大学
资助项目（项）
136
109
77
64
57
53
53
51
46
45
44
42
39
37
37
35
34
33
32
31
项目资助率（%）
20．33
26．59
31．59
27．35
24．68
15．68
15．59
24．88
29．11
28．66
20．37
16．73
20．02
22．70
21．02
12．64
21．94
16．58
16．58
17．03
2005年获得国家自然科学基金前十名单位
1、清华大学（307项）
2、浙江大学（297项）
3、北京大学（263项）
4、上海交大（276项）
5、复旦大学（206项）
6、华中科技大学（209项）
7、中山大学（169项）
8、南京大学（153项）
9、武汉大学（146项）
10、四川大学（140项）
2009年获得国家自然科学基金前十名单位
南京大学
国家自然科学基金委员生命科学部2002年获资助单位排名
十
年
前
首
医
大
榜
上
无
名
单位名称
1
2
4
7
9
10
12
13
14
15
16
17
24
25
28
40
46
52
54
56
69
74
90
北京大学
浙江大学
复旦大学
华中科技大学
西安交通大学
四川大学
中山大学
吉林大学
山东大学
中南大学
第四军医大学
第三军医大学
中国医学科学院
军事医学科学院
第二军医大学
上海第二医科大学
第一军医大学
重庆医科大学
中国医科大学
哈尔滨医科大学
解放军总医院
南京医科大学
暨南大学
项数
金额
95
87
63
67
42
42
62
22
33
55
79
84
55
54
50
37
34
30
29
31
24
23
10
1821.00
1619.50
1230.00
1198.00
742
786
1170.00
344
657
1016.00
1498.00
1576.00
997
1049.00
916
678
615
589
561
548
435
441
168
华中科技大学同济医学院
109
浙江大学
108
北京大学
106
复旦大学
98
中国医学科学院
92
中山大学
95
第二军医大学
88
第二医科大学
80
第三军医大学
78
华西医科大学
75
中南大学
73
武汉大学
63
西安交通大学
47
南方医科大学（原第一军医大学）
43
首都医科大学
41
二
金 0
（
生 0
命五
科年
学获
部得
国
）
家
前
自
15
然
个
科
院
学
校
基
2010年国家自然科学基金委
医学部（面上项目）排位
上海交通大学（上二医）
178项
中山大学（中山医科大学）
147项
第四军医大学
124项
第三军医大学
120项
北京大学（北京医科大学）
110项
首都医科大学
106项
复旦大学（上一医）
105项
华中科技大学（同济医科大学）
99项
浙江大学（浙江医科大学）
91项
北京与上海两所地方院校获国家自然科学基金比较
上海第二医科大学
首都医科大学
1999年
27项
1项*
2000年
30项**
3项*
2001年
29项
6项
2002年
32项
19项
2004年
58项
27项
2005年
80项**
41项
**全国地方医学院校第一名
*仅统计校本部
国家自然科学基金（NSFC）
是中国大陆公认的靠公平竞争可获
得的科研资助，
是绝对“等米下锅”的科研“鼠辈”
年终岁末的“兵家必争之地”！
从一个评委的角度看待写好基金
它实行所谓“3+X”的同行评议制度，
其中的3位通讯评委其实就是你我这
样的专家教授，而被评议的申请人也
还是你我这样的专家教授，只是角色
经常轮换而已，甚至时有交叉！我等
既是评委，又是申请人！
以一个通讯+会议评委的身份，在
此“现身说法”，设身处地为大
家着想，谈谈自己的经验，
让各位“巧妇难为无米之炊”者
能“知己知彼，百战不殆”！
评委
想取悦一个
容易，要博得三位评
委的好感难！为此，必须要从以下五个方
面做足功夫：
一、精心打造“闪光”简历
• 我不敢说每位评委在评议之初都会“以貌取人”，
但我拿到标书后的第一个动作就是翻看申请人的个
人简历。我首先要了解他姓甚名谁？现在有何学术
地位？过去有无科研成就？说穿了就是看他有没有
拿到这份资助的本钱！除非你是名角、明星——名
震遐迩，非同凡响，否则你应该恰如其分地撰写一
份具有“真金纯银”的个人简历，既不要吹牛浮夸，
也不可妄自菲薄，更不能漏掉你的“闪光点”！我
以为，在简历部分不必罗列自己发表的全部文章，
而只需晒晒几篇真能拿得出手的代表作即可，剩下
的其他文章可以在“以往研究基础”部分结合研究
工作内容逐一展示。
二、认真对待结题报告
评委了解申请人的第二条途径是在线阅读申请人以
前负责的基金项目的完成情况。
结题报告写得好不好，可以直接影响评委的个人观
感，申请人切忌等闲视之！
当然，实事求是绝对是上策，好就是好，不好也不
能说好，但讲究表述方式也至关重要。结题圆满、
优异者，评委的看法当然就会好，而勉强结题或项
目完成得不好者，一定要清楚地指出问题的来龙去
脉，道明未如期完成的原因，尽量不要给评委留下
工作不负责任、能力不够、骗钱等“坏”印象！
三、紧扣以往研究领域
评委了解申请人的第三条途径是看申
请人过去的研究经历及所取得的研究成果
是否与本申请项目有关。虽然基金资助的
突出特点之一是“青睐创新”和“追捧热
点”，但若所申请的项目与自己的研究领
域毫不相干或只是勉强搭界，可能会被评
委以“缺乏研究基础”为由加以否决！这
个部分的介绍应该施以“浓墨重彩”，最
好以具体研究内容为题，重点描述研究取
得的突破，并紧随其后列出课题组发表的
论文及专著。
四、严格选择合作人员
合作者人不在多而在精！决不能滥竽充数，也不可用
非所学！
课题组成员应该是业绩突出的长期合作者或有书面承
诺的国内外资深研究人员，而且他们一定要完全胜任
自己所负责的那部分研究任务。有时，假如申请人自
己的研究资历不够“闪光”，但选择的合作人员造诣
深厚、资质颇丰，也能在一定程度上弥补申请者的先
天不足。相反，如果合作人员从未涉及所要负责的研
究内容，那么也有可能成为评委建议不予资助的理由
之一！
因此，在选择合作者时，切不可掉以轻心、敷衍了事！
五、慎重考虑投标部门
如果一个研究机构在同一年有几位申请者同时申
报课题，通常不可避免地要谈同样的事、说同样
的话、选同样的人和投同样的部门（如生命科学
部或医学科学部），那么他们的标书很有可能
“殊途同归”地转到同一位评委手中。遇到这种
情况，要么大家“同归于尽”，要么“矮子里面
挑将军”，但绝不会全部建议资助。因此，同属
一个研究机构的申请者，不仅要写好自己的标书，
也要大致了解同事写什么内容、投什么部门，以
便避免雷同或将标书投给同一个部门。
初 审 情 况
06年学部加大了对各类项目的初审力度，尽量使不
合格的项目不送评。
–面上项目初审情况
经科学处初审和学部审核，25224项面上项目申请中，有1718项申
请因形式不合格未能通过初审，占申请项目数的6.81%；初筛的原因主
要有以下几个方面：
1）申请者不具备申请资格或违反了基金委的有关规定
1047 项、如超项，职称等
2）申请手续不完备或申请书不符合要求 589 项，合作单位盖章，资助强度过大等
3）申请项目主要研究内容不属于申报学科的资助范围 56 项，如应用研究，开发
4）申请书纸质与电子版内容不一致 12 项
5）其它 14 项
面上项目
面上项目是国家自然科学基金资助体系中的主要部分
包括自由申请项目、青年科学基金项目和地区科学基金
项目3个亚类
其资助经费占国家自然科学基金项目总经费的60%以上
主要支持科技工作者在国家自然科学基金资助范围内自
由选题，开展创新性的科学研究
资助期限一般为3年，2011年起改为4年
经费为35万，2011年起改为60万
申报国家自然科学基金一定要先看指南
写好一份基金，投到哪一个学科非常关键
总体来讲资助率偏低，特别是临床学科
2010年成立医学部，但资助率偏低
2010年起设立一个新的学部
2003年NSFC面上项目资助情况统计
受理
项目
批准
金额
批准项目
数目 金额
资助率
比例1 比例2 强度
项目数 均强度
三、生命科学部
9882
237042.15
1841
33593.00
32.71
100
18.25
18.63
14.17
微生物学
356
8637.75
82
1511.00
1.47
4.5
18.43
23.03
17.49
植物学
309
7318.79
78
1499.00
1.46
4.46
19.22
25.24
20.48
动物学
240
5599.22
67
1175.00
1.14
3.5
17.54
27.92
20.99
生态学
274
6794.00
66
1194.00
1.16
3.55
18.09
24.09
17.57
生物化学与分子生物学
254
6451.77
59
1015.00
0.99
3.02
17.2
23.23
15.73
生物物理与医学工程
419
10295.89
92
1705.00
1.66
5.08
18.53
21.96
16.56
神经学与心理学
386
8984.32
78
1398.00
1.36
4.16
17.92
20.21
15.56
生理学与病理学
1038
24312.66
167
2996.00
2.92
8.92
17.94
16.09
12.32
细胞学与发育学
273
6679.92
61
1066.00
1.04
3.17
17.48
22.34
15.96
遗传学
244
6166.26
61
1099.00
1.07
3.27
18.02
25
17.82
农学
981
24523.33
204
3793.00
3.69
11.29
18.59
20.8
15.47
畜牧兽医水产学
533
13124.36
108
1995.00
1.94
5.94
18.47
20.26
15.2
林学
283
7397.32
70
1238.00
1.21
3.69
17.69
24.73
16.74
预防医学与卫生学
667
15957.86
106
1950.00
1.9
5.8
18.4
15.89
12.22
免疫学
338
8049.75
61
1068.00
1.04
3.18
17.51
18.05
13.27
2020
47119.28
270
5084.00
4.95
15.13
18.83
13.37
10.79
药物学与药理学
402
9828.26
75
1395.00
1.36
4.15
18.6
18.66
14.19
中医学与中药学
865
19801.41
136
2412.00
2.35
7.18
17.74
15.72
12.18
临床医学基础
2004年国家自然科学基金面上项目资助情况
2006年资助情况未见根本好转
22.72%
写
出
一
份
好
的
申
请
标
书
大
约
需
要
8
个
月
的
准
备
您
的
申
请
书
要
有
5
位
同
行
专
1 家
方 评
式 阅
+
06
开
始
在
部
分
学
科
采
用
3
订不 您
在可 可
申特 书
报定 面
书一 告
封个 之
面单 哪
，位 几
不。 位
可注 专
写意 家
在请 不
标一 宜
书定 评
中另 阅
。附 ，
纸但
国家自然
科学基金
目前以采
用网上评
审，并且
覆盖了98%
的项目。
同行评议函 --- 定量部分：
第一部分 立论依据 (研究意义, 学术思想, 立项依据, 对国内外研究现状)
研究意义 A
B
C
D
A. 有重要科学意义或属国民经济建设中的重要科技问题
B. 对科学发展有促进或有应用前景
C. 属一般问题
D. 科学意义或应用前景不大
学术思想
A
B
A. 有明显的创新或特色
B. 有一定的创新或特色
C. 创新性不明显
D. 无创新
C
D
同行评议函---定量部分：
第二部分 研究方案 (研究内容, 研究手段, 技术路线, 预期目标)
研究方案 A
B
C
D
A.范围合理，重点突出；关键问题选择准确
B.基本合适，关键问题选择较准
C.不够明确，只抓住部分关键问题
D. 不合适，没有抓住关键问题
研究手段
A
B
A.先进，且有创新
B.可行，对现行方法有所改进
C.可行性不足或不够恰当
D.不可行
C
D
同行评议函---定量部分：
第三部分 研究基础 (研究工作积累, 已具备实验条件, 项目组成员)
与本项目的研究工作积累
A
B
C
D
B
C
D
A.原有工作的进一步深入
B.有一定相关的工作积累，基础较好
C.做过类似工作，基础一般
D. 没有这方面的工作基础
已具备实验条件
A
A.条件具备，或与国家（部门）实验室合作
B.较好
C.一般，有某些不足
D.较差
第一
部分
第二
部分
第三
部分
申请国家自然科学基金应注意哪些问题
• 报送的学科一定是本课题的优势学科，可能的话最好连续
向同一学科申报；
• 对本课题拟报送学科中其他可能的竞争者应有所了解，对
于某些专业的课题数目可在当年《申报指南》中查询；
• 对于医学领域最好避免“生化与分子生物、遗传等学科”；
• 前期基础应展示的恰到好处，最好在问题的提出和工作基础中；
• 经费预算：按上年度平均额度上浮10%；
• 对于申报书中的内容一定要实事求是，任何虚伪都可能造
成本次乃至后续申报失败。
摘要 --- 给你的课题贴上“名牌商标”
1998年中标基金申请书摘要
摘要 --- 给你的课题贴上“名牌商标”
2000年中标基金申请书摘要
2002年的申报书（成功）
非酒精性肝炎（NASH）是近年来倍受关注的肝病之一，
自由基损伤乃NASH发生的重要环节。本课题复制大鼠
NASH模型，分离制备肝细胞，用H2O2模拟自由基损伤。
给予重组肝刺激因子(HSS),通过检测膜流动性、脂质过氧
化反应、细胞形态及DNA断裂等指标，观察HSS对NASH
损伤肝细胞的保护作用。同时，建立HSS转染肝细胞，观
察高表达HSS细胞对自由基损伤的敏感性。研究NASH过
程中细胞凋亡的作用及HSS是否具有抗凋亡活性。利用定
点突变技术，制备HSS半胱氨酸位点的系列突变体，导入
肝细胞，观察不同位点突变的HSS所造成的细胞抗损伤作
用差异，推测HSS参与抗氧化还原反应的可能靶点。此外，
拟采用碘乙酰胺巯基封闭技术，改变HSS分子结构，再通
过表达重组HSS突变体，检查其活性，进一步探讨HSS蛋
白参与抗氧化损伤的分子机制。通过上述研究，旨在充
分阐述HSS治疗NASH的可能性，为其实际应用提供理论
依据。
2004年申报书摘要(获批）
摘
要
非酒精性脂肪性肝炎(NASH)是一种研究危害人类健康的疾病
之一。目前，虽有报道显示NASH发病与线粒体功能紊乱有关，
但确切机制不详。本课题基于前期发现的NASH病变中线粒体
膜孔道通透性改变导致细胞凋亡/死亡这一事实，拟对肝刺激
因子（HSS）保护线粒体孔道靶蛋白进行研究。采用免疫共沉
淀方法（Co-IP）找寻与HSS相互作用的靶蛋白，并借助于质
谱分析手段初步确定靶蛋白。利用荧光共振能量转移（FRET）
技术研究活细胞内HSS 与靶蛋白之间的相互作用。最后利用
人工构建的蛋白磷脂囊泡研究HSS对膜孔道的调节作用。本课
题旨在解决HSS通过稳定线粒体孔道通透性，抑制线粒体通透
性转换（MPT），从而达到保护肝细胞，抑制细胞凋亡/死亡
的分子机制，提供理论依据。
立项依据 --- 创新、创新、再创新
基础研究的生命力在于创新，没有创新，标书毫无价值
1. 对拟立项的课题做简要的历史性回顾;
2. 对相关文章（特别是近年）要找出不足，对影响总体
发展的“瓶颈”问题提出新见解和解决方案;
3. 拟解决的问题要切合实际，要形成“动一发牵千斤”
的态势; 科研构思一定要新，未被“染指”；
4. 使评委对您的标书产生一种“不做不得了”的读后感，
不能是“旧瓶装新酒”, 不能寄希望填补国内空白。
怎样写立论依据
对基础研究，着重结合国际科学发展趋势，
论述科学意义
对应用基础研究，着重结合学科前沿，围
绕国民经济和社会发展中的重要科技问题
论述应用前景
在立论依据的阐述中，对研究领域、研究方向、
具体科学问题的理解
研究领域：肝纤维的化研究，包括发病机制、预防、诊断、
治疗措施等研究
研究方向：肝纤维化的发病机制，包括环境因素、致病
靶点、细胞水平、分子水平研究等
科学问题：肝纤维化发病过程中的相关基因研究，包括致病
基因筛选、功能研究、调控机制、信号转导等
研究意义
在研究领域层面
从研究领域切入
从研究方向展开
围绕某一具体科学问题
（本项目研究目标）
进行归纳分析
提出研究
设想
HSS基因转录启动子活性的研究（2000年）
立项依据部分解析
HSS基因转录启动子活性研究（2000年）
立项依据部分解析（续）
2002年NSFC标书的立题依据---关于膜靶蛋白的研究
HSS研究之现状：早在上世纪70年代，LaBrecque首先报道，自初断乳大鼠肝脏中
提出的一种物质能刺激肝脏再生，谓之肝再生刺激物质（hepatic regenerative
stimulatory substance, HRSS）[1]。因为HRSS由细胞胞浆提取，也有人称其为肝细
胞质提取物[2]。整个80年代，有关HRSS的研究主要集中在阐述该物质的生化特性
和生理作用。人们逐步认识到，所谓HRSS实际上是一种小分子蛋白质，分子量介
于15-18kD，具有热稳定性， 95ºC加热15分钟不会失活[3]。HRSS最重要的生理作
用是促进肝细胞DNA合成，刺激肝再生，这一作用虽无种属差异，却具有明显的
组织特异性，即HRSS只对肝细胞或肝源性肿瘤细胞有效，对非肝细胞无效[4-5]。鉴
于HRSS的理化特性，后来文献将HRSS统称为肝刺激因子（hepatic stimulator
substance, HSS）。由于HSS为目前所发现的唯一肝特异性刺激因子，因此相关研
究倍受关注。进入90年代，HSS的分子生物学研究占据主导地位，大鼠HSS cDNA
和基因组序列相继被克隆 [6-7]，体外实验证明重组HSS具有生理功能[8]。针对HSS
作用机制，先后提出一些论点。有人认为，肝再生过程中NK细胞对肝细胞增殖具
有明显的抑制作用，而HSS可抑制NK功能从而使其对肝细胞的束缚得以解脱[9]。
后来发现，HSS基因并不仅在肝组织表达[7]，但HSS只对肝细胞起作用，因此也有
人认为，肝内可能存在某种活化HSS的因子，这些因子在肝再生中特异性激活HSS，
使其发挥生理作用 [10]。此外，在HSS命名上也有所争议。根据生长因子的作用特
点，将那些能独立启动肝再生的因子命名肝生长因子，如EGF、TGF-a、HGF等，
而那些不能独立刺激肝再生的因子被划为辅助因子（co-factor）[11]。据报道，HSS
不能启动鼠原代培养肝细胞增殖[12]，故有人将HSS称为肝再生增强物（augmenter
of liver regeneration, ALR）。
HSS研究之困惑：诚然，有关HSS研究已近30年，发表论文逾百篇，其中包括发表在Science, PNAS
等国际重要杂志。肝刺激因子的分子生物学研究逐渐从基因组学向后基因组学过渡，已有不少课
题组开展HSS基因功能的研究工作，并发表相关论文[6,8,13,14]。但是迄今人们对HSS作用原理还不甚
明了，涉及HSS作用机制的解释前后矛盾。比如有文献报道，HSS需通过抑制NK细胞以促进肝再
生，但我们发现，给离体培养的肝肿瘤细胞（培养体系中当然不含NK细胞）加入HSS，也能刺激
细胞增殖[15]。再如，前述提及HSS在肝内需经某种因子活化后才能行使生理作用，但我们利用原核
表达技术合成重组HSS，发现它可在体外独立启动BEL-7402肝细胞增殖[16]。由此推测，HSS可能
是一种独立诱导肝细胞增殖的生长因子。作为生长因子，必须首先与细胞表面受体结合，继而启
问题1
动胞内增殖信号的传导。在研究HSS信号传导中，我们发现，HSS可刺激EGF受体表达上调，使其
受体型酪氨酸蛋白激酶（RTK）磷酸化。进一步又观察到，HSS可刺激RTK介导的下游分子p21ras表
达上调，继而活化MAPK。由于MAPK为细胞增殖传导的重要信号分子，因此推测HSS的促增殖作
问题2
用可能与刺激RTK介导的信号通路并最终激活MAPK有关[17-19]
,即
HSS→RTK→Raf→Ras→MEK→ERK1/ERK2(MAPK)。这些结果后来得到其它课题组的确证[20]。但
最近的实验结果使这一推论陷入困惑：我们将HSS基因导入BEL-7402肝细胞，发现转基因细胞的
MAPK活化，DNA合成增加，细胞增殖[21]。而以PD98059特异性阻断MAPK上游活化物MEK，转
HSS基因细胞DNA合成却不受影响，细胞仍明显增殖 [22]。这启示：HSS除刺激酪氨酸蛋白激酶信
号通路及MAPK活化外，还可能有其它信号传导途径的参与。新近发现，某些受体膜内区具有Jak
激酶活性（Janus kinase, Jak），Jak一方面可以激活GRB2继而启动Raf→Ras→MEK→ERK1/ERK2
通路，另一方面还可激活STAT(signal transducer and activator of transcriptions，STATs)通路。目前认
为STATs可能是MAPK之外的促进细胞增殖的另一信号通路，许多因子的跨膜信号传导均是以Jak蛋
问
白活化为先导，如IL-6, 干扰素-g等。为此，我们研究HSS在MAPK失活状态下对STAT3的影响，结
题3 [22]。但是HSS如何引起Jak/STAT信号传导？HSS是否需
果惊喜地发现HSS可明显上调STAT3磷酸化
要首先与细胞膜上的靶蛋白结合？如是，这种靶蛋白的特性怎样？与HSS作用的细胞靶蛋白是否具
有Jak活性？对这些问题的回答是解决上述困惑的关键。
2004年NSFC立论依据的“帽子”
实际上，除了病毒性肝炎和酒精性肝病以外，另一种肝病正
在以前所未有的速度向我们袭来，它就是目前被全球肝病学
家广为关注的非酒精性肝炎（non-alcoholic steatohepatitis,
NASH）[1]。NASH的特点是患者无过量饮酒史，但是肝组织
改变与酒精性肝炎极为相似，呈明显的空泡样变、炎性细胞
浸润、同时可见多数细胞呈Mallory’s透明状、糖原沉积增多。
严重者可见典型的小叶中央静脉周边和汇管旁纤维化，继而
向全肝蔓延。NASH之所以受到关注原因有二；其一，
NASH 的发病率增速明显。据统计，NASH现在已经成为北
美地区仅次于病毒性肝炎的最常见的一种肝病[2]；在英国，
NASH是除了病毒性肝炎和酒精性肝病外，引发肝功能指标
异常的最主要病因[3]；其二，NASH可呈进行式发展。肝活检
结果显示，多数NASH肝组织改变起初只是原发性脂肪肝
（primary steatosis），但约有43%的病人后来发展成肝纤维化，
这部分病例中又会有26%最后形成肝硬化。
2004年NSFC基金的“帽子（续）”
由于糖尿病、高血压、高血脂、肥胖等患病人数在亚洲国
家增长迅速，
因此著名肝病学者GC Farrell预测[5]，未来20年某些亚洲国
家的NASH会呈一种猖獗态势，有可能取代病毒性肝炎而
成为本地区第一大肝病。据估计，在日本NASH的发病率
将很快超过丙型肝炎(HCV)；在中国NASH所致的慢性肝硬
化有可能超过乙型肝炎，成为首要病因；
NASH来了，如何对付？
近年来，有多种针对NASH “两次打击”
病因学的药物治疗方案陆续报道，主要
是基于祛除肝细胞脂肪变的诱因，如改
善胰岛素抵抗、提高胰岛素敏感、抑制
TNFa活化等，即“去邪”。同时，学者
们更加强调从提高细胞自身抗损伤能力
（抗氧化应急性损伤、抗细胞凋亡）角
度研究治疗NASH对策，可谓“扶正”。
我们时常在反问自己，HSS这样一种具有强烈肝保护作用的生物活
性物质，到底对NASH发病过程中“第二次打击”造成的肝细胞损
伤也具有某种保护作用？？？，换言之，它是否能够抵抗自由基攻
击造成肝细胞凋亡。我们通过预实验发现，HSS基因转染肝细胞具
有明显的抵抗CCl4和H2O2造成的细胞损伤。转染HSS肝细胞在受到
自由基攻击后其凋亡基因bcl-2表达上调，而capspase3/7活性下降，
细胞DNA断裂程度有所减轻，细胞膜依然保持完整。与非转染对照
细胞相比，这些凋亡指标的改善进一步说明HSS的保肝效应与抗凋
亡有关。由此可见，我们有理由推测，HSS有可能在对抗NASH肝
损伤中发挥一定作用，如是，HSS会通过何种机制抑制肝细胞凋亡
发生？干预其信号传导是否会对治疗NASH有利？前一个问题鲜有
报道，而后一个问题更无人问津。因此，围绕NASH与肝细胞凋亡
之间的关系、重组HSS保肝与抗凋亡作用、HSS实验治疗与寻找有
效治疗NASH药物等方面展开深入研究，不仅理论意义重要，而且
实际价值深远。
就NAFLD的发病机制而言，“两次打击”（two-hit）学说广为认可
[6]。第一次打击是指过多脂肪沉积于肝脏，导致肝细胞功能受损；
而第二次打击是指肝细胞再次受到其他因素的干扰，如缺氧、氧化
损害、药物中毒等，导致肝细胞发生炎症，甚至细胞凋亡或死亡。
1999年Caldwell 首先报道，自NASH病人的肝病理组织检查发现，
有明显的线粒体超微结构改变 [7]。同年，Diehl课题组也发现NASH
患者的肝细胞ATP合成受到损害[8]，细胞质膜发生脂质过氧化，成
为肝细胞损害乃至死亡的重要诱因[9]。这些结果提示NASH的发生
可能与肝细胞线粒体病变有关。此后，有关线粒体损害与NASH发
病之间的关系逐渐被人关注，研究报道也日趋增多。目前比较一致
的观点是，线粒体参与在NASH发病的各个环节，线粒体的结构与
功能改变是NASH发生重要因素，甚至有人认为，NASH实际上就
是一种线粒体病[10]。由此可见，从线粒体入手研究如何对其加以
有效保护可能是预防和治疗NASH的细胞学靶点。
研究方案
“量体裁衣”
研究目标：必须具体，量化，条理清晰，不要过大
研究内容：为达到上述目标而设计的实验，比如第
一个目标怎样才能实现，第二个目标又
是又何才能证明，等等
拟解决的关键问题：通过上述研究内容哪些学术
问题可以“搞定”。千万不可夸大成
为某某研究“奠定理论基础”，“开
创某某研究新局面”等，实事求是！！！
怎样写研究方案
•
•
研究目标
撰写要求： 有限目标，与研究内容相呼应
如：明确……关系，揭示……规律，
阐明……原理（机制），建立……方法等
举例1：筛选出与纤维化相关的基因，明确部分基因在liver
fibrosis（LF）形成中的作用，从molecular & cellular level
变化角度阐明LF的发生机理，为防治liver fibrosis提供线索。
举例2
研究目标:
（1）探寻HSS发挥生理功能的线粒体膜孔道相关蛋白。
（2）证明HSS与在细胞受到损伤时与线粒体膜孔道蛋白
质相互作用，抑制MPT发生。
（3）初步明确HSS结合线粒体膜孔道相关蛋白质调节
MPT的机制。
研究内容：
存在问题： 内容过多，一个研究周期难以完成
内容分散，不能集中阐明研究目标
撰写要求：内容要适当—确保研究周期内完成
为目标服务—与目标相辅相成
要重点阐述—注意与技术路线区别
研究内容 (举例)：
（1）利用免疫共沉淀法（Co-IP）筛选肝细胞与HSS相
互作用的线粒体膜孔道相关蛋白质。
（2）利用荧光共振能量转移（Fluorescence
Resonance Energy Transfer，FRET）技术研究肝细
胞内HSS与线粒体膜孔道相关蛋白质相互作用。
（3） 利用遗传学方法对HSS进行突变，研究HSS突变
体在其结构域（Motif）或构象改变后对线粒体膜孔道的
稳定作用是否发生改变。
（4）利用人工构建的蛋白磷脂囊泡研究HSS对线粒体
膜孔道的调节作用。
拟解决的关键问题--- 紧扣立论依据
不是建立一个方法，验证一个事实，而是理论上的突破与创新
拟采取的研究方案及可行性分析
---经典与时尚的结合
1. 方法与技术学科代表性和前沿性，如 分子生物学
2. 实验设计、分组、对照必须科学可靠
3. 预期目标（进度）要具体，08年，09年，10年等
不要留出专门的时间结题和发表论文
4. 选择方法和手段一定要结合过去的研究基础和现有
条件，比如利用转基因动物或 (transgenetic animal)基
因敲除动物（Gene KO)研究必须有成型的动物,
否则就会给专家一个不信任的印象。
5. 研究路线：必要时可划一个路线图（route map)
本项目的特色与创新之处
本课题中，我们首先提出把HSS保护肝细胞作
用与保护线粒体功能联系起来，特别是把目光与
焦点集中在探讨抑制线粒体MPT，并通过系列实
验加以印证。而本实验力求发现HSS与线粒体膜
孔道相互作用的靶蛋白，并利用Fret/Bret等蛋白蛋白相互作用以及转基因技术等加以确信。可以
说，从抑制线粒体MPT，进而探寻与之相互作用
的靶蛋白等探讨HSS保护肝细胞的分子机制是我
们在这一研究领域的创新思维。
研究基础 ---尽显英雄本色
实验室的情况，级别，相关实验基础, 已发表论文
国内：重要杂志指中国科学院办学报，《生理学报》、
《遗传学报》、《生物化学与生物物理学报》、
《动物学报》、《药理学报》、《微生物学报》以
及等全国一级学会所办刊物和某些领域的《中华某
某杂志》等。
国外: SCI杂志，最好标注影响因子（IF）的分数。
基金：最好是自然科学基金
成果： 相关的成果，最好指明在《国家自然科学基金》
资助下取得，给人一种工作之延续的感受；
合作： 研究背景和合作机会，合作发表的文章都可使该
标书“足下升辉”，国外合作要有证明，国内要盖章
条件具备，人员合理 --- 马壮兵强
1. 集细胞生物、医学遗传、细胞培养等为一体的综合学科； 十八班武艺
2. 北京重点建设学科和重点实验室，北京市巨大投入；
首都的嫡系
3. 新建教学楼两层楼的空间，1000m2的实验室；
地大物博
4. 全套分子细胞生物学设备，国家队水准，实验足不出户
武装到牙齿
5. 10年研究光景，80万元前期基金投入，40多篇相关论文
锦上填花
6. 课题负责人的研究阅历，出国、归国、再出国、再归国
根红苗正
7. 高、中、初、研究生“四类分子”，7人平均年龄35岁
虎虎有生气
8. 万事具备，只欠东风
贵基金委您就掏钱吧！