Transcript 第四章A：2药品的含量测定（光谱分析）2h

第四章A
药品的含量测定
(如何通过药品的含量测定判定其优劣)
§1.定量分析方法的分类与特点
色谱法
chromatography analysis
光谱法
spectrophotometry analysis
化学法
titrimetric analysis
1.在UV-vis光区范围内，有机化合物吸收光谱可能
由下列哪种跃迁方式产生？它们对定量分析的意义？
2.常见发色团与助色团有哪些？它们对定量分析的意义？
3.简述K带、R带、B带、E带与分子结构的关系
4.利用分子与原子吸收光谱进行定量的依据是：
5.偏离the law的主要因素？
6.Lambert-Beer’s Law可用于分析
A.固体 B.液体 C.气体
D.以上三者均可
7.根据Beer’s Law下列哪种说法是错误的：
A.同一波长下，复方药物制剂中各组分吸光度有加和性。 B.同一波长下,所
有物质的浓度与吸收度在UV-vis均成线性。C.入射光是单色光。D.百分吸光系数
指在一定波长下，溶液浓度为1%，厚度为1cm的吸光度。
8.光谱分析主要分为哪几类？定量分析中最常用哪种？
9. UV-vis分光光度计的主要组成
1.在UV-vis光区范围内，有机化合物吸收光谱可能由下
列哪种跃迁方式产生？它们对定量分析的意义？
A. π→ π*
B. n→ π*
C. n → σ*
2.常见发色团与助色团有哪些？它们对定量分析的意义？
发色团：
助色团： -OH,
-NH2 ,
-OR ,
-SH
-SR,
-x
与发色团相连λ↑A ↑
3.简述K带、R带、B带、E带与分子结构的关系
K带： π→π*
R带：
n→π*
200～750nm
≈300nm
B带： 芳香族（杂芳香族） ≈ 256nm
E带： 芳香族
E1180nm;E2200nm
4.利用分子与原子吸收光谱进行定量的依据是：
Lambert-Beer’s Law
A=E
1%
1cm
C
5.偏离the law的主要因素？
●化学因素： C
（缔合、离解、与溶剂作用）
▲非单色光
●光学因素：
▲散色光
▲反色光
6. Lambert-Beer’s Law可用于分析
A.固体
B.液体
C.气体
D.以上三者均可
7.根据Beer’s Law下列哪种说法是错误的：
A.同一波长下，复方药物制剂中各组分吸光度
有加和性。
B.同一波长下,所有物质的浓度与吸收度在
UV-vis均成线性。
C.入射光是单色光。
D.百分吸光系数指在一定波长下，溶液浓度为
1%，厚度为1cm的吸光度。
8.光谱分析主要分为哪几类？定量分析中最常用
哪种？
●absorption: ● UV-vis、
atomic bsorption
● 比色法
● IR、NIR、
● NMR
●
●emission：flu
●scattering：Raman
●MS
9. UV-vis分光光度计的主要组成
S
§1.定量分析方法的分类与特点
2. spectrophotometry analysis
（1）UV-vis
（2）比色法
（3）荧光法
§1.定量分析方法的分类与特点
（1）紫外可见分光光度法（UVultraviolet and visible
spectrophotometry
vis）
1、 UV-vis定量分析的特点与适用范围
2、 UV-vis定量分析的注意事项
3、 UV-vis定量分析的计算
§1.定量分析方法的分类与特点
1、 方法的特点与适用范围
-4～10-7g/ml），
（10
优点：灵敏度高
应用广泛。
缺点：准确度，精密度不如容量法
(相对误差和偏差为2% ～５%），
专属性差。
用于部分单方原料药及制剂
作为HPLC仪的检测器
§1.定量分析方法的分类与特点
2、 UV-vis定量分析的注意事项
（1）A = 0.3～0.7
（2）测定波长：选择入max
（3）空白：消除因溶剂和容器的吸收
、光的散射和界面反射等因素对透光
率的干扰。
（4）溶剂的选择（种类与质量）：
三氯甲烷、甲醇、乙醇、乙醚、丙酮、环已烷等
Ch.P附录： 220～240nm
241～250nm
251～300nm
300nm
A＜0.40
A＜0.20
A＜0.10
A＜0.05
A
240 250
300
nm
（5）仪器校正：
●A ：重铬酸钾的硫酸溶液（峰谷
法）
●入：氘灯（486.02,656.10nm）
§1.定量分析方法的分类与特点
4、 UV-vis定量分析的计算
●依据
●吸收系数法
●对照品比较法
●标准曲线法
●计算分光光度法
●吸收系数法
①特点：操作简便；误差较大。
A
②测定条件：
AR
AS
*Ａ、Ｃ呈线性
1%
* E 1cm ＞１00
Cx C对照
R
1%
③计算公式： A=E 1cm
C
P=
标示量% =
A A × 11
× DD ×平均片重
EE1%
1%
100
1cm
1cm × 100
×100%
W
C
例1
维生素B2的含量测定Ch.P （ 2010）
取本品10mg,精密称定，置1000mL量瓶,
加冰醋酸5mL与水100mL,加热溶解后加
4%NaOH 30mL,用水定容到刻度,照分光光度
1%
法，在444nm测吸光度为0.312. E 1cm
=323.
计算含量，用什么级别的天平？
●对照品比较法
①特点：用对照品；误差较小。
②测定条件：
*ＡＣ呈线性
* CR≈CS
③计算公式：
例2
维生素B12的含量测定Ch.p （ 2010）
精 密 称 定 B12 原 料 0.25g ， 加 水 稀 释 至
1000mL，精密量取10ml,置100ml量瓶中；另
精密称定对照品0.25g，同法操作。在361nm
处，分别测定吸光度为0.508和0.518，求B12
的百分含量，用什么级别的天平与稀释量具。
例3
维生素B12的含量测定：
精密称定B12 原料0.25g，加水稀释至
1000mL，精密量取10ml,置100ml量瓶中；
另精密称定对照品25mg，加水稀释至100mL，
精密量取10ml,置100ml量瓶中。在361nm处，
分别测定吸光度为0.508和0.518，求B12 的
百分含量，用什么级别的天平与稀释量具。
§1.定量分析方法的分类与特点
●标准曲线法
A
A=aC+b
●计算分光光度法
A总=Aa+Ab+ …
C
§1.定量分析方法的分类与特点
（2）比色法
1.定量依据:
在UV-vis光区无吸收或吸收系数较小的
物质，与显色剂反应生成有较强吸收的衍生
物，通过对衍生物的分析间接达到定量目
的。
O
O
H
N
O
H 2O - Py r
N
N
O
Cu
●对照品比较法
N
●标准曲线法
N
O
Cu
O
N
O
O
H+
N
O
N
H
+
O
H
N
N
O-
N
O
2+
H
N
OH
N
H
O
O
H
N
§1.定量分析方法的分类与特点
2.特点与适用范围
优点：灵敏度↑
专属性↑
缺点：准确度、精密度低于UV-vis,
操作繁琐费时。
用于部分化学原料药及中药
§1.定量分析方法的分类与特点
（3）荧光法
1、定量依据:
仅分析那些能够发射荧光的物
质。
1%
E 1cm
长共轭结构
两个条件
φf
分子的刚性
●对照品比较法
●标准曲线法
§1.定量分析方法的分类与特点
2.特点与对象
优点：灵敏度高 （ 10-10～10-12g/ml）
专属性高。
缺点：准确度、精密度低。
主要用于体内药物分析
小结
●
UV-vis
E
P=
1%
1cm
法：
A
E1%
1cm
× 1
100
W
×D
×100%
● 对照品法：
Ｐ＝
m R Ax D
ARW
×100%
小结与思考题
1 .维生素B2的含量测定Ch.P （ Ch.P2010二部）
取本品10mg,精密称定，置1000mL量瓶,
加冰醋酸5mL与水100mL,加热溶解后加
4%NaOH 30mL,用水定容到刻度,照分光光度
1% =323.
法，在444nm测吸光度为0.312. E 1cm
计算含量？
2. 维生素B12的含量测定（ Ch.P2010二部） ：
精 密 称 定 B12 原 料 0.25g ， 加 水 稀 释 至
1000mL，精密量取10ml,置100ml量瓶中；另精
密称定对照品25mg，加水稀释至100mL，精密
量取10ml,置100ml量瓶中。在361nm处，分别
测定吸光度为0.508和0.518，求B12的百分含量。
3．紫外分光光度法定量依据、特点与对象？
4．比色法的依据、特点与对象？
5．荧光分析法的依据、特点与对象？
6．判错题：
在UV-vis光区能定量的药品：
A.大部分为含有发色团，且能产生共轭体系的化合物 。
B.必须能产生荧光的化合物。
C.当助色团与发色团相连接时，发色团吸收峰红
移，且吸光系数增大。
D.许多化合物中即含有发色团，也含有助色团。
E.仅含有
F.仅含有
π→π*
n→π*
的官能团。
的官能团。
G.大部分为仅含有助色团的化合物。
7．选择题：
VA 含量测定（UV）以环已烷试剂为溶媒，按照Ch.P
附录规定， 应首先对空白溶液进行检测，因为：
A.环已烷分子中含有发色团。
B.环已烷分子能产生π → π *跃迁。
C.环已烷分子中含有n → π *跃迁。
D.环已烷生产中可能引进部分在UV区产生吸收的杂质。
再见