Transcript Fundamento
CROMATOGRAFÍA CROMATOGRAFÍA CROMATOGRAFÍA CROMATOGRAFÍA cromatografía CROMATOGRAFÍA líquida ¿Qué es la cromatografía? cromatografía tienen fase estacionaría fase móvil pueden ser: sólido líquido líquido gas Cromatografía líquida puede ser plana En columna CROMATOGRAFÍA LÍQUIDA PLANA F. MÓVIL eluyente: disolvente o mezcla de ellos, fácilmente evaporable. En papel Fase estacionaría: papel de filtro En capa fina Fase estacionaria= placa : adsorbente, los más usados sílica gel (SiO2 ) y alumina (Al2O3), adherido a un soporte de plástico, vidrio o aluminio. Normalmente recubierto por un indicador fluorescente CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA En capa fina La fase móvil asciende por capilaridad a través de la fase estacionaria, compitiendo con ésta por los analitos. Los compuestos más polares quedarán más adsorbidos por la fase estacionaria mientras que los menos polares avanzarán más con el eluyente. En capa fina En capa fina Usos: - Determinar el grado de pureza de un compuesto. Se puede determinar así, por ejemplo, la efectividad de una etapa de purificación. - Comparar muestras. Si dos muestras corren igual en placa podrían ser idénticas. Si, por el contrario, corren distinto entonces no son la misma sustancia. - Realizar el seguimiento de una reacción. Es posible estudiar cómo desaparecen los reactivos y cómo aparecen los productos finales o, lo que es lo mismo, saber cuando la reacción ha acabado. En capa fina Ejemplos: Cromatografía líquida puede ser plana En columna En columna Cromatografía en columna Se puede clasificar Según naturaleza f.m Según mecanismo separación puede ser normal inversa adsorción pueden ser reparto intercambio iónico afinidad exclusión molecular En columna f.e polar normal Cromatografía según la naturaleza de la f.m tiene f.m poco polar puede ser f.e poco polar inversa tiene f.m polar En columna físico exclusión adsorción Cromatografía según fundamento de su actuación fisico-químico partición puede ser químico bioquímico intercambio iónico afinidad Cromatografía adsorción F.E SÓLIDO ACTIVO Fundamento: diferencias de solubilidades en f.m y de retención en f.e de los componentes de la mezcla Cromatografía partición F.E UN LÍQUIDO ADSORBIDO O LIGADO A UN SÓLIDO INERTE Fundamento: Separación debida a la diferencia de solubilidades entre ambas fases. Similar al fenómeno de extracción Cromatografía exclusión F.E MATERIAL POROSO INERTE (GEL) Fundamento: separación del soluto según su tamaño y estructura molecular Cromatografía afinidad F.E SOPORTE SÓLIDO CON UNA SUPERFICIE ACTIVADA AL QUE SE ENLAZA UN LIGANDO DE AFINIDAD Fundamento: Adsorción reversible y selectiva, basada en el acoplamiento llavecerradura, entre el analito y ligando Cromatografía intercambio iónico F.E SÓLIDO CON CARGA Fundamento: La f.e tiene grupos cargados que interaccionan electroestáticamente con iones de signo contrario de la f.m En columna En ellos se representa la señal medida frente al tiempo o volumen de eluyente. ABSORBANCIA Suele llevar acoplado un detector de manera que se obtienen los cromatográmas VOLUMEN DE SOLVENTE En columna El tiempo o volumen de eluyente nos ayudará a determinar que analito es. La altura y anchura del pico, nos ayudara a cuantificar cuanto analito hay.