Transcript 폐결핵진단을 위한 분자생물학적 유용성과 한계

폐결핵 진단을 위한
분자생물학검사 유용성과 한계
2000년 8월17일
강동성심병원 임상병리과
김은영
서론
• 최근 폐결핵의 정확한 진단을 위한 새로
운 검사법들이 많이 나오고 있으나 현재
많이 실시되고 있는 분자생물학적 기법
으로는 DNA 중합효소 연쇄반응 기법
(PCR)이 가장 보편적인 검사법이다.
이에 본원에서 시행하고 있는 PCR의
유용성과 문제점들을 논하고자 한다.
폐결핵의 진단 방법
•
•
•
•
•
객담도말검사
배양검사
흉부 X-RAY
조직 검사
중합효소 연쇄 반응(PCR)
TB-PCR의 원리
• Mycobacterium tuberculosis에 특징적으로
존재하는 insertion sequence(IS6110)의 특
정 부위만을 특이적으로 증폭하는
Primer를 이용하여 PCR한 다음 TB-DNA
의 증폭유무를 확인한다.
폐결핵진단에 있어서 중합효소
연쇄반응(PCR)의 유용성 관찰 (1)
* 객담 결핵균 중합효소 연쇄반응
검사의 누적 양성율 분석
(대한 내과학회지 제55권 제6호 1998)
• 대상: 1996년 1월 ~1997년 3월 본원에서 폐결핵
으로 진단받은 107명 대상
객담의 검사별 양성율 비교
직접도말검사
(107명)
(+ )
91명
85.0%
(- )
16명
15%
배양검사
(93명)
(+ )
(- )
77명
16명
82.8% 17.2%
TB- PCR
(107명)
(+ )
105명
98%
(- )
2명
1.8%
객담을 이용한 검사별 민감도 비교
98%
100%
95%
90%
Sensitivity
85%
80%
75%
85%
PCR
82.80%
Smear Culture
Diagnostic tools
TB-PCR 누적 양성율
89%
95%
98%
100%
양성율
1회
2회
3회
Number of tests
4회
폐결핵 진단에 있어서 중합효소
연쇄반응(PCR)의 유용성비교(2)
객담 도말 음성인 환자에서 기관지 폐포 세척액의
PCR검사 유용성 비교
(결핵 및 호흡기 질환 제46권 제3호 1998)
• 대상:1998년 본원에 내원한 환자로 폐결핵 확
진이 어려운 임상군에 대하여 기관지 폐포 세
척액(BAL)을 뽑아 검사
BALF 를 이용한 폐결핵 진단
Sputum smear(- )
( 40명)
BAL smear(+ )
8명
(20%)
BAL smear(- )
32명
(80%)
PCR( + )
10명
( 25%)
PCR(- )
22명
(55%)
BALF 를 이용한 폐결핵 진단
Sputum smear(- ), PCR(- )
(29명)
BAL smear(+ )
5명
(17.2%)
BAL smear(- )
24명
(82.8%)
PCR(+ )
5명
(17%)
PCR(- )
19명
(65%)
폐결핵 진단에 있어서 중합효소
연쇄반응(PCR)의 유용성비교(3)
PCR(+
),항산성
염색(- 환자의
)인 환자의
결과
비교
* PCR(+)
, AFB(-)인
결과
비교
(논문 준비중)
• 대상: 1998년 6월 ~ 1999년 5월 사이 강동 호흡
기 내과에 객담검체로 AFB 및 TB-PCR 검사가
의뢰된 환자 909명
*TB-PCR(+), AFB(-) 추적 관찰*
폐결 핵 진 단 (32명)
배양검사 임상적 진 단
조 직 검사
(8명)
(24명)
비폐결핵진단(7명)
비활동성결핵
(5명)
• 양성 예측도 82%, 위양성율 17.9%
폐렴
(2명)
PCR의 한계
• 검체간의 오염 (Carry-over)
• 높은 민감도 문제
• 가검물에 존재하는 중합효소 억제
인자로 인한 위음성 문제
• 고가의 검사법
고찰
• 위에서 살펴본 결과 PCR이 결핵진단에
있어 유용한 검사임을 확인했으며, PCR
이 지닌 문제점들을 좀더 보완한다면 향
후 효과적이고 유용한 검사로 자리잡을
수 있을것으로 생각된다.