Transcript DEFECTOS GENÉTICOS DE DEFICIENCIA DE CREATINA Becaria: Bioq. Adriana Fochesato

DEFECTOS GENÉTICOS
DE DEFICIENCIA DE CREATINA
Becaria: Bioq. Adriana Fochesato
Directora: Dra. Dora Martínez
Centro de Estudio de las Metabolopatías Congénitas
(CEMECO)
Deficiencia de Creatina
Constituyen un grupo de enfermedades
provocadas por alteraciones en la síntesis y en
el transporte de Creatina
VIA METABOLICA DE
CREATINA
1. Síntesis de creatina (Hígado, páncreas)
Glicina
Arginina
AGAT
Ornitina
Guanidinoacetato
S-adenosilmetionina
GAMT
S-adenosilhomocisteína
2. Captación de creatina
(cerebro, músculo)
Creatina
3. Sistema creatina/
creatina fosfato
CRTR
ATP
ADP
(cerebro, músculo)
Creatina
Conversión
no-enzimática
Creatina/fosfato
CK
Creatinina
4. Creatinina
urinaria
Conversión
no-enzimática
PATOLOGIAS HEREDITARIAS EN LA BIOSINTESIS DE LA Cr
Deficiencia en AGAT (dAGAT)
Deficiencia en GAMT (dGAMT)
Deficiencia en transportador (dCRTR)
1. Síntesis de creatina (Hígado, páncreas)
Glycina
Arginina
DEFECTOS METABOLICOS
EN LA DEFICIENCIA DE CR
AGAT
Ornitina
Guanidinoacetato
S-adenosilmetionina
GAMT
S-adenosilhomocisteína
2. Captación de creatina
(cerebro, músculo)
Creatina
3. Sistema creatina/
creatina fosfato
CRTR
ATP
ADP
(cerebro, músculo)
Creatina
Conversión
no-enzimática
Creatina/fosfato
CK
Creatinina
4. Creatinina
urinaria
Conversión
no-enzimática
Características Clínicas de los DGDC
d-AGAT
d-GAMT
d-CRTR
 Tipo de herencia
AR
AR
 Retraso del desarrollo
+


 Retardo mental
+


 Conducta autista
+
+
–



+
+
+
+
-
-
+
-
-
-
+
 Retraso en el lenguaje
 Convulsiones
 Hipotonía
 Signos piramidales y extrapiramidales
 Incremento circunferencia
cefálica
Ligada-X
ESTUDIOS COMPLEMENTARIOS
d-AGAT
d-GAMT
d-CRTR
Ausente
Ausente
 Espectroscopía
de resonancia magnética
H1 “in vivo” ( ERM H1 )
Cr/CrP
Ausente
Normal
GAA
 RMN de cerebro
(Globus pallidus) Anormal
 EEG
Anormal
Anormal
Anormal
Anormal
Anormal
OBJETIVOS GENERALES
Contribuir desde la bioquímica al desarrollo de un
nuevo capítulo de la Genética Médica, relacionados a
los severos defectos innatos de la biosíntesis y
transporte de la Creatina, dentro de un contexto
multidisciplinario de Investigación Clínica.
OBJETIVOS ESPECÍFICOS
Cumplimentar el algoritmo de los DGDC, a
través de los siguientes objetivos:
1. Analizar el perfil bioquímico de los presuntos
sujetos involucrados.
2. Confirmar el diagnóstico del probando e
identificar portadores.
3. Difundir a la comunidad médica y científica
los resultados obtenidos.
Compatibilidad
Fenotípica
Perfiles de los
DGDC
Determinación de GAA, Cr
y Crn en orina
GAA N
Cr/Crn 
GAA
Determinar GAA en plasma
ERM H1
dGAMT
dAGAT
Estudios Enzimáticos y
Moleculares
Determinar Cr en plasma
ERM H1
GAA N
Cr/Crn N
Investigar otras
patologías
dCRTR
Estudios de captación de Cr y
Moleculares
RESULTADOS
Se analizaron 93 muestras de orina
• Método Cualitativo Sakaguchi: 3,09 % Positivo
• Método Cuantitativo por Cromatografía Gaseosa/FID:
RESULTADOS
Pacientes
Grupo
I
Grupo
II
Grupo
III
Grupo
IV
n= 93
81
4
1
7
GAA1
61.3 ± 45.7
N.D.2
268
74.2 ± 51.6
497
2145.0 ± 1671.3
Cr
397.9 ± 386.4 0.71 ± 0.16
Cr/Crn3
0.49 ± 0.47
0.19 ± 0.11
0.49
2.8 ± 4.1
Diagnóstico
Presuntivo
Improbable
DGDC
d-AGAT
d-GAMT
d-CRTR
detectable; valores de referencia: GAA:2 – 220;
Cr: 6 – 1208; 3 Cr/Crn: 0.006 – 0.72 (Verhoeven et al.,2005).
1 mmol/molCrn; 2 no
FENOTIPO BIOQUIMICO
Metabolitos
en orina
GAA
Cr
Cr/Crn
d-AGAT
d-GAMT
d-CRTR
N
PERFILES CROMATOGRÁFICOS
Testigos
1.3e4
1.2e4
1.3e4
1.2e4
1.1e4
1.0e4
1.1e4
9000
1.0e4
8000
1
6000
4000
5000
8
10
12 14 16
T
ime (m
in.)
18
20
22
1.1e4
8000
7000
1
6000
2
5000
3000
6
1.2e4
2
2
5000
1.3e4
9000
1
6000
7000
1.4e4
1.0e4
7000
8000
Sig. 1inC:\HPCHEM\1\DATA\1D22SEP8.D
1.4e4
Sig. 1inC:\HPCHEM\1\DATA\1D5JUN5.D
Sig. 1inC:\HPCHEM\1\DATA\1D9MAR2.D
1.5e4
9000
Grupo II Perfil d-AGAT
Grupo I Perfil normal
4000
6
8
10
12 14 16
Time (m
in.)
Grupo III Perfil d-GAMT
1.2e4
1.1e4
1.0e4
6
22
8
10
12 14 16
Time (m
in.)
Sig. 1inC:\HPCHEM\1\DATA\1D3AGO5.D
1.3e4
20
Grupo IV Perfil d-CRTR
Sig. 1inC:\HPCHEM\1\DATA\1D27DIC1.D
1.4e4
18
1.3e4
1.2e4
1.1e4
1.0e4
9000
1
9000
8000
1
8000
7000
2
7000
6000
6000
5000
5000
4000
2
4000
6
8
10
12 14 16
T
im
e (m
in.)
18
20
22
6
8
10
12 14 16
T
im
e (m
in.)
Referencias: 1: Creatina, 2: guanidinoacetato
18
20
22
18
20
22
Confirmación del diagnóstico presuntivo
Medir la actividad enzimática de AGAT,
GAMT y la funcionalidad del
transportador.
Realizar el análisis molecular para
identificar el gen mutado.
DEFECTOS GENÉTICO DE DEFICIENCIA DE CREATINA
La importancia de este proyecto estriba en la
disponibilidad de una terapia eficaz y de muy bajo
costo para las deficiencias de GAMT y AGAT, que de
no ser detectadas a tiempo conducen a una
discapacidad psico-motora-emocional invalidante.
Resulta importante además, el desarrollo de un área
genética no explorada con anterioridad en nuestro
medio y de gran impacto asistencial y académico.
Muchas
Gracias !
MUCHAS
GRACIAS !
INTERRELACIONES METABÓLICAS
Se analizaron en orina los metabolitos de pacientes
nosológicamente definidos:
 ACIDURIA METILMALÓNICA: 2 pacientes con Cr
valor normal y GAA no detectable.
 ACIDURIA PROPIÓNICA: 1 paciente, Cr no
detectable; GAA no detestable
 DEFICIENCIA DE ORNITINA
TRANSCARBAMILASA (OCT): 1 paciente, Cr valor
normal; GAA valor normal.