Романова Е.Б. МЕТОДЫ ИММУНОТОКСИКОЛОГИИ В БИОМОНИТОРИНГЕ: ИММУНОГЕМАТОЛОГИЧЕСКИЕ И МОРФОФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ ПОДХОДЫ • Иммунотоксикология — дисциплина, изучающий влияние ксенобиотиков на иммунную систему.
Download ReportTranscript Романова Е.Б. МЕТОДЫ ИММУНОТОКСИКОЛОГИИ В БИОМОНИТОРИНГЕ: ИММУНОГЕМАТОЛОГИЧЕСКИЕ И МОРФОФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ ПОДХОДЫ • Иммунотоксикология — дисциплина, изучающий влияние ксенобиотиков на иммунную систему.
Slide 1
Романова Е.Б.
МЕТОДЫ
ИММУНОТОКСИКОЛОГИИ В
БИОМОНИТОРИНГЕ:
ИММУНОГЕМАТОЛОГИЧЕСКИЕ
И МОРФОФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ
ПОДХОДЫ
Slide 2
Slide 3
• Иммунотоксикология — дисциплина,
изучающий влияние ксенобиотиков на
иммунную систему
Slide 4
• Предметом
иммунотоксикологии
является
изучение
влияния
на
иммунный статус токсичных химических
веществ, а также фармакологических
средств и биологических агентов,
являющихся
чужеродными
для
организма.
Slide 5
• Ксенобиотики (от греч. ξένος — чуждый
и βίος — жизнь) — условная категория
для обозначения чужеродных для
живых организмов химических веществ
Slide 6
Иммунитет
И
м
м
у
н
и
Врожденный (естественный,
видовой, наследственный)
Неспецифическая резистентность
В
Н
е
р
с
о
ж
д
в
и
д
о
п
е
ц
и
е
в
н
о
ф
н
й
и
ч
л
е
т
о
ч
н
ы
й
й
н
,
Клеточный
К
ы
е
а
с
е
(
к
с
а
с
л
т
е
д
я
р
е
с
т
в
е
с
т
в
е
н
и
с
е
з
т
н
н
н
е
ы
ы
н
й
й
т
у
м
о
р
а
л
ь
н
ы
т
Приобретенный (специфический)
П
о
с
т
р
и
о
б
р
е
т
е
н
н
ы
й
(
с
п
е
ц
и
ф
и
ч
е
с
к
и
й
)
ь
Гуморальный
Г
е
,
)
н
т
Клеточный
й
К
л
е
т
о
ч
н
ы
Гуморальный
й
Г
Активный
А
к
т
и
в
н
ы
у
м
о
р
а
л
ь
н
ы
й
Пассивный
й
П
а
с
с
и
в
н
ы
й
Сывороточный
С
ы
в
о
Постинфекционный
П
о
с
т
и
н
ф
е
к
ц
и
о
н
н
ы
р
о
т
о
ч
н
ы
Плацентарный
(материнский)
й
П
(
Поствакционный
П
о
й
с
т
в
а
к
ц
и
о
н
н
ы
й
л
м
а
а
ц
т
е
е
н
р
т
и
а
н
р
с
н
к
ы
и
й
й
)
Slide 7
Факторы неспецифической резистентности
организма
Slide 8
• В настоящее время под иммунитетом
понимают только те защитные процессы,
которые реализуются с участием
лимфоцитов [Хаитов Р.М. и др., 2002].
Slide 9
Условия формирования
иммунного ответа
• 1. Наличие чужеродного агента (АГ).
• 2. Наличие ИКК организма, способных к
взаимодействию с АГ.
• 3. Способность клеток после контакта с
АГ
размножаться
и
дифференцироваться.
• Аутотолерантность - неспособность
организма вырабатывать иммунный
ответ на собственные АГ.
• 5. Наличие иммунологической памяти.
Slide 10
Сравнительная характеристика Т- и В-лимфоцитов
Характеристика
Т-лимфоциты
В-лимфоциты
Происхождение
Костный мозг
Костный мозг
Созревание
Тимус
Костный мозг,
лимфоидные
образования
кишечника
Содержание в крови, %
65-85
8-15
Рецепторы для
антигена
CD3; CD4; CD8; CD16 и
т.д.
Иммуноглобулины
Рецепторы для
комплемента
-
+
Реализация реакций
иммунной защиты
Участие в клеточном
иммунитета
Участие в гуморальном
ответе: индукция
образования антител
Slide 11
Slide 12
Иммунотоксические свойства
ксенобиотиков
поражающие преимущественно Т- или В-систему
иммунитета;
снижающие активность ЕКК –естественных
клеток-килеров;
подавляющие функцию моноцитарномакрофагальной системы;
иммунотропное действие - разнонаправленно
влияющие на Т- и В-звено иммунитета.
Slide 13
Характер иммунного ответа при однократном
введении антигена в разных дозах
Slide 14
Клеточная составляющая
иммунного ответа
• Т-хелперы 1 типа - Th1-лимфоциты,
участвующие в реализации реакций клеточного
иммунитета, а также синтезе Ig M, G2а (и
формировании ГЗТ);
• Т-хелперы 2 типа - Th2-лимфоциты,
способствующие синтезу IgG1, A, E,D;
• Th3-лимфоциты, выполняющие регуляторные
функции, основной из которых может являться
супрессия иммунных реакций;
• Т-лимфоциты-киллеры.
Slide 15
Иммунные клетки-киллеры
(http://www.nanonewsnet.ru/news/2013/immunnye
-killery)
Slide 16
Цитотоксический тест
(http://vivmed.ru/content/kletki-killery.html)
Slide 17
Лейкоциты крови
Slide 18
Slide 19
Оценка гуморальных иммунных реакций
• . Определение титра гемагглютининов в
сыворотке крови
Slide 20
Определение числа антителообразующих клеток (АОК)
Slide 21
Оценка клеточных иммунных реакций
• Реакция торможения миграции лейкоцитов (РТМЛ)
периферической крови в присутствии конконавалина А
(КонА) или фитогемагглютинина (ФГА).
Slide 22
Реакция торможения миграции лейкоцитов (РТМЛ)
Slide 23
Реакция гиперчувствительности
замедленного типа (ГЗТ)
Slide 24
• Индекс реакции (ИР) вычисляют по
формуле:
ИР= Ро — Рк/ Рк ∙ 100%,
• где Ро и Рк - масса стопы в опыте и
контроле соответственно, в мг.
Slide 25
Кооперация Т- и В-лимфоцитов
Slide 26
Реакция фагоцитоза
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
• Оценка содержания лимфоцитов в
органах системы иммунитета
Х a 4000 в / б
•
•
где а- число клеток, подсчитанных в определенном объеме;
• в – разведение;
• б – количество сосчитанных малых квадратов.
• Определение лимфоидного индекса
органа
I mорг / Mтела
Slide 32
Благодарю за внимание!
Романова Е.Б.
МЕТОДЫ
ИММУНОТОКСИКОЛОГИИ В
БИОМОНИТОРИНГЕ:
ИММУНОГЕМАТОЛОГИЧЕСКИЕ
И МОРФОФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ
ПОДХОДЫ
Slide 2
Slide 3
• Иммунотоксикология — дисциплина,
изучающий влияние ксенобиотиков на
иммунную систему
Slide 4
• Предметом
иммунотоксикологии
является
изучение
влияния
на
иммунный статус токсичных химических
веществ, а также фармакологических
средств и биологических агентов,
являющихся
чужеродными
для
организма.
Slide 5
• Ксенобиотики (от греч. ξένος — чуждый
и βίος — жизнь) — условная категория
для обозначения чужеродных для
живых организмов химических веществ
Slide 6
Иммунитет
И
м
м
у
н
и
Врожденный (естественный,
видовой, наследственный)
Неспецифическая резистентность
В
Н
е
р
с
о
ж
д
в
и
д
о
п
е
ц
и
е
в
н
о
ф
н
й
и
ч
л
е
т
о
ч
н
ы
й
й
н
,
Клеточный
К
ы
е
а
с
е
(
к
с
а
с
л
т
е
д
я
р
е
с
т
в
е
с
т
в
е
н
и
с
е
з
т
н
н
н
е
ы
ы
н
й
й
т
у
м
о
р
а
л
ь
н
ы
т
Приобретенный (специфический)
П
о
с
т
р
и
о
б
р
е
т
е
н
н
ы
й
(
с
п
е
ц
и
ф
и
ч
е
с
к
и
й
)
ь
Гуморальный
Г
е
,
)
н
т
Клеточный
й
К
л
е
т
о
ч
н
ы
Гуморальный
й
Г
Активный
А
к
т
и
в
н
ы
у
м
о
р
а
л
ь
н
ы
й
Пассивный
й
П
а
с
с
и
в
н
ы
й
Сывороточный
С
ы
в
о
Постинфекционный
П
о
с
т
и
н
ф
е
к
ц
и
о
н
н
ы
р
о
т
о
ч
н
ы
Плацентарный
(материнский)
й
П
(
Поствакционный
П
о
й
с
т
в
а
к
ц
и
о
н
н
ы
й
л
м
а
а
ц
т
е
е
н
р
т
и
а
н
р
с
н
к
ы
и
й
й
)
Slide 7
Факторы неспецифической резистентности
организма
Slide 8
• В настоящее время под иммунитетом
понимают только те защитные процессы,
которые реализуются с участием
лимфоцитов [Хаитов Р.М. и др., 2002].
Slide 9
Условия формирования
иммунного ответа
• 1. Наличие чужеродного агента (АГ).
• 2. Наличие ИКК организма, способных к
взаимодействию с АГ.
• 3. Способность клеток после контакта с
АГ
размножаться
и
дифференцироваться.
• Аутотолерантность - неспособность
организма вырабатывать иммунный
ответ на собственные АГ.
• 5. Наличие иммунологической памяти.
Slide 10
Сравнительная характеристика Т- и В-лимфоцитов
Характеристика
Т-лимфоциты
В-лимфоциты
Происхождение
Костный мозг
Костный мозг
Созревание
Тимус
Костный мозг,
лимфоидные
образования
кишечника
Содержание в крови, %
65-85
8-15
Рецепторы для
антигена
CD3; CD4; CD8; CD16 и
т.д.
Иммуноглобулины
Рецепторы для
комплемента
-
+
Реализация реакций
иммунной защиты
Участие в клеточном
иммунитета
Участие в гуморальном
ответе: индукция
образования антител
Slide 11
Slide 12
Иммунотоксические свойства
ксенобиотиков
поражающие преимущественно Т- или В-систему
иммунитета;
снижающие активность ЕКК –естественных
клеток-килеров;
подавляющие функцию моноцитарномакрофагальной системы;
иммунотропное действие - разнонаправленно
влияющие на Т- и В-звено иммунитета.
Slide 13
Характер иммунного ответа при однократном
введении антигена в разных дозах
Slide 14
Клеточная составляющая
иммунного ответа
• Т-хелперы 1 типа - Th1-лимфоциты,
участвующие в реализации реакций клеточного
иммунитета, а также синтезе Ig M, G2а (и
формировании ГЗТ);
• Т-хелперы 2 типа - Th2-лимфоциты,
способствующие синтезу IgG1, A, E,D;
• Th3-лимфоциты, выполняющие регуляторные
функции, основной из которых может являться
супрессия иммунных реакций;
• Т-лимфоциты-киллеры.
Slide 15
Иммунные клетки-киллеры
(http://www.nanonewsnet.ru/news/2013/immunnye
-killery)
Slide 16
Цитотоксический тест
(http://vivmed.ru/content/kletki-killery.html)
Slide 17
Лейкоциты крови
Slide 18
Slide 19
Оценка гуморальных иммунных реакций
• . Определение титра гемагглютининов в
сыворотке крови
Slide 20
Определение числа антителообразующих клеток (АОК)
Slide 21
Оценка клеточных иммунных реакций
• Реакция торможения миграции лейкоцитов (РТМЛ)
периферической крови в присутствии конконавалина А
(КонА) или фитогемагглютинина (ФГА).
Slide 22
Реакция торможения миграции лейкоцитов (РТМЛ)
Slide 23
Реакция гиперчувствительности
замедленного типа (ГЗТ)
Slide 24
• Индекс реакции (ИР) вычисляют по
формуле:
ИР= Ро — Рк/ Рк ∙ 100%,
• где Ро и Рк - масса стопы в опыте и
контроле соответственно, в мг.
Slide 25
Кооперация Т- и В-лимфоцитов
Slide 26
Реакция фагоцитоза
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
• Оценка содержания лимфоцитов в
органах системы иммунитета
Х a 4000 в / б
•
•
где а- число клеток, подсчитанных в определенном объеме;
• в – разведение;
• б – количество сосчитанных малых квадратов.
• Определение лимфоидного индекса
органа
I mорг / Mтела
Slide 32
Благодарю за внимание!