Transcript DNA-kiwi
EXTRACÇÃO DE DNA PROBLEMA: Como isolar a molécula de DNA? EXTRACÇÃO DE DNA MATERIAL: Gobelés Kiwi Funil Varinha mágica Papel de filtro Água Sal Etanol (96%) Vareta de vidro Um copo alto Detergente de louça um bisturi EXTRACÇÃO DE DNA PROCEDIMENTO: 1 - Preparar a solução de extracção: detergente 8%; sal de cozinha 3%. 2 - Descascar e cortar o kiwi em pedaços. 3 - Triturar o Kiwi com a solução de extracção. (3 segundos, 3 vezes) 4 - Filtrar utilizando um filtro de café. 5 - Com cuidado, adicionar etanol frio, tendo o cuidado de não misturar o etanol com o filtrado. EXTRACÇÃO DE DNA RESULTADOS: Formação de duas fases distintas. O DNA precipita formando filamentos visíveis. EXTRACÇÃO DE DNA EXTRAÇÃO de DNA de CÉLULAS DO EPITÉLIO BUCAL EXTRACÇÃO DE DNA EXTRAÇÃO de DNA de CÉLULAS DO EPITÉLIO BUCAL PROCEDIMENTO: Preparar uma solução salina muito concentrada. Colocar uma porção dessa solução salina na boca e bochechar vigorosamente durante 2 minutos. Colocar o obtido num gobelé e filtrar em seguida. Marcar duas linhas num tubo de ensaio, uma ao meio do tubo e outra perto do bordo. Transferir o filtrado para um tubo de ensaio até à primeira linha. Adicionar, cuidadosamente, etanol até à segunda linha. Observar com atenção e registar. EXTRACÇÃO DE DNA CONCEPTUALIZAÇÃO METODOLOGIA PROBLEMA TEORIA: Teoria celular – organização celular e função dos organitos Isolar ao molécula de DNA CONCEITOS: Membrana plasmática Aparelho de Golgi ACTIVIDADE LABORATORIAL Extracção de DNA das Retículo Endoplasmático liso células de kiwi Retículo Endoplasmático rugoso /Clélulas do epitélio bucal Mitocôndria Cloroplasto Núcleo Membrana Nuclear Lisossomas … O DNA existe quer em células animais quer em células vegetais RESULTADOS: Citoplasma Ribossomas CONCLUSÃO Formação distintas. de duas fases O DNA precipita formando filamentos visíveis. EXTRACÇÃO DE DNA Tópicos para discussão 1. Quais são as estruturas celulares e qual a sua composição? EXTRACÇÃO DE DNA As membranas, celular e nuclear são compostas principalmente por lípidos. As proteínas encontram-se aprisionadas na bicamada lipídica. Os organitos celulares são compostos por proteínas, ácidos nucleicos ( DNA e RNA ), envolvidos por uma membrana. EXTRACÇÃO DE DNA 2. Qual a função do sal? EXTRACÇÃO DE DNA O sal proporciona um ambiente favorável para o processo de extração pois contribui com íons positivos (NA+) que neutralizam a carga negativa do DNA. EXTRACÇÃO DE DNA 3. Porque utilizamos um liquidificador? EXTRACÇÃO DE DNA O liquidificador ajuda a quebrar mecanicamente as membranas da célula EXTRACÇÃO DE DNA 4. Porque utilizamos um liquidificador? EXTRACÇÃO DE DNA O liquidificador ajuda a quebrar mecanicamente as membranas da célula EXTRACÇÃO DE DNA 5. O que acontece quando se adiciona o detergente? EXTRACÇÃO DE DNA As enzimas presentes no detergente desestruturam as moléculas de lipídios presentes nas membranas celulares EXTRACÇÃO DE DNA 6. Qual o papel do álcool? EXTRACÇÃO DE DNA O DNA é insolúvel em álcool e deste modo se separa da solução. O DNA é menos denso que a água e os restantes elementos celulares, por isso surge à superfície da solução EXTRACÇÃO DE DNA 7. Por que não podemos observar a dupla hélice? EXTRACÇÃO DE DNA A estrutura de dupla hélice só pode ser visualizada de modo indireto e através de aparelhos sofisticados. O obsrvamos são milhares de moléculas de DNA. EXTRACÇÃO DE DNA 8. Onde se encontra o DNA? EXTRACÇÃO DE DNA Cerca de 99% do DNA encontra-se no núcleo da célula. O restante DNA encontra-se em locais específicos, como por exemplo organitos ( as mitocôndria e os cloroplastos possuem o seu próprio DNA ). Apesar desses organitos terem o seu próprio cromossoma eles não podem contar com a sua informação. As mitocôndrias e cloroplastos necessitam de genes especiais situados noutros organitos. Para a maioria das funções, estes organitos utilizam os cromossomas nucleares.