Test križne probe u transplantaciji solidnih organa Davorka Galenić, med.lab.ing

Klinički zavod za transfuzijsku medicinu i transplantacijsku biologiju Kliničke jedinice za tipizaciju tkiva KBC Zagreb

Imunogenetička obrada bolesnika za transplantaciju organa

   obuhvaća određivanje gena HLA utvrđivanje prisutnosti i specifičnosti protutijela HLA prije i poslije transplantacije

test križne probe između primatelja i davatelja organa (engl cross match, CM)

Kriteriji za odabir najpogodnijeg primatelja organa

 krvna grupa  tkivna podudarnost  % PRA 

negativan CM

Imunogenetski testovi u transplantaciji organa



svrha imunogenetskih testova je spriječiti te smanjiti ili odgoditi reakciju odbacivanja transplantiranog organa PRIMATELJ DAVATELJ

tipizacija alela HLA određivanje antitijela HLA tipizacija alela HLA

test križne reakcije

Test križne reaktivnosti -cross match-CM



test kojim se još jednom isključuje postojanje citotoksičnih IgG antitijela u serumu primatelja stvorenih protiv antigena HLA koje ima davatelj, a koja bi izazvala hiperakutno ili akutno odbacivanje bubrega

PROGRAM EUROTRANSPLANTA



lista s popisom bolesnika za koje je potrebno izvesti testove križne reaktivnosti (tzv. cross match lista) formira se kompjuterski u eurotransplantovom centru u Leidenu – Nizozemska i dostavlja tipizacijskom centru (mail, fax)

Eurotransplantova cross-match lista

Uzorci potrebni za izvođenje testa križne probe



SERUM PRIMATELJA

UZORCI DAVATELJA LIMFNI ČVOR SLEZENA

Metoda testa križne probe



izvodi se serološkom metodom – test mikrolimfocitotoksičnosti ili citotoksičnost posredovana komplementom (engl. CDC metoda – complement dependent citotoxicity)

Test citotoksičnosti ovisan o komplementu (CDC)



standardni test u predtransplantacijskoj obradi



serum primatelja organa i limfociti mogućeg davatelja organa izolirani iz periferne krvi, limfnog čvora ili slezene stavljaju se u kontakt u Terasakijevoj pločici, uz dodatak komplementa kunića

Terasakijeve pločice

Princip testa CDC

  

vijabilnost limfocita je najvažnija za korektnu interpretaciju rezultata testa križne probe (CM), primjenom CDC-a citotoksična reakcija-limfociti obojani tripanskim plavilom-CM POZITIVAN izostanak citotoksične reakcije-limfociti neobojani-CM NEGATIVAN

Vizualizacija rezultata križne probe testom CDC Negativna reakcija Pozitivna reakcija

Klinički značaj rezultata križne probe



Negativan rezultat CM-a pokazuje da ne postoji imunološka prepreka transplantaciji organa jer bolesnik ili uopće nema razvijena antitijela HLA, ili ima antitijela HLA koja nisu uperena protiv antigena HLA davatelja.

NEGATIVAN CM



HLA ANTIGENI DAVATELJA A 1, 2; B 8, 35; DR1, 3 HLA ANTITIJELA PRIMATELJA NEGATIVNA ili Npr. A3, B27, DR4

Klinički značaj rezultata križne probe

  

pozitivan test CM-a je apsolutna kontraindikacija za transplantaciju bubrega i srca jer pokazuje da organ nije imunološki podoban za odabranog primatelja kojem se na taj način dokazuje postojanje antitijela HLA protiv nekog od antigena HLA davatelja pozitivan test CM-a nije kontraindikacija za transplantaciju jetre, već zahtijeva primjenu pojačane imunosupresije o kojoj se specifičnosti radi u testu križne reakcije ne možemo saznati, već ćemo to ustanoviti naknadnim testovima određivanja specifičnosti antitijela HLA

POZITIVAN CM



HLA ANTIGENI DAVATELJA A 1, 2; B 8, 35; DR1, 3 HLA ANTITIJELA PRIMATELJA JEDNO ILI VIŠE ANTITIJELA STVORENIH PROTIV ANTIGENA DAVATELJA (PRETHODNOM TRANSPLANTACIJOM ILI TRANSFUZIJOM ILI TRUDNOĆOM) ANTI HLA-A 1, A2, B8, B35, DR1,DR3

Značaj skrininga seruma za rezultat testa križne probe



testovi određivanja panel reaktivnih antitijela (PRA) i križne reakcije međuzavisni su, i u slučaju potpuno točnog određivanja specifičnosti antitijela HLA u serumu bolesnika predtransplantacijskim skriningom seruma bolesnika, test križne reakcije moguće je predvidjeti s velikom sigurnošću.

Podaci iz prakse

 

do 31. kolovoza 2011. u Kliničkoj jedinici za tipizaciju tkiva napravljeno je 792 testova križne probe (CM) primjenom serološke metode CDC ukupan broj kadaveričnih davatelja organa za isto razdoblje bio je 147

Hvala Vam na pažnji!