Transcript Caracterização Molecular de Cultivares de Videira.

Caracterização Molecular de
Cultivares de Videira.
Haiko Enok Sawazaki
Instituto Agronômico de Campinas
OS OBJECTIVOS E INTERESSES DOS PRODUTORES
DE VINHOS E VINHAS DIFEREM
Produtor vinhas: grande produtividade e uvas com
muita doçura
Produtor vinhos: bons vinhos.
PARA A VITIVINICULTURA FUNCIONAR:
Método de determinar a "qualidade enológica" das
uvas que permita estabelecer um sistema em que essa
qualidade seja paga, de modo a que comece a haver
uma sintonia entre os viticultores e os enólogos.
FATORES DETERMINANTES DA QUALIDADE DAS
UVA PARA A VINIFICAÇÃO:
Material biológico
Características fixas da vinha
Características variáveis da vinha
Tipo de cultivo da vinha
A CULTIVAR DE UMA VIDEIRA OU DE UM PORTAENXERTO É FUNDAMENTAL COMO
DETERMINANTE DA QUALIDADE .
a) Cultivares diferentes têm custos diferenciais.
b) O tipo de viticultura desejada requer cultivares específicas.
c) Uvas e vinhos produzidos por cultivares diferentes têm
características qualiquantitativas e preços diversos.
d) O viticultor é legalmente responsável por assegurar que as
cultivares declaradas são as que estão plantadas.
Fazendo-se essa determinação de cultivar torna-se possível
aplicar um critério de qualidade em que as boas cultivares
sejam melhor pagas, o que levará a um incentivo de qualidade
para os viticultores.
O problema é que embora haja cultivares que sejam
perfeitamente distinguíveis a olho nu, há muitas cultivares
com características de matéria prima enológica muito
diferentes, mas com aparências muito similares. A
acrescentar a isso, a influência ambiental dá um grande
grau de variabilidade ao fenótipo (o resultado visível da
interação entre a herança genética e o ambiente), levando a
uma dificuldade de identificação de certas cultivares.
Além da caracterização genética e avaliação serem
importantes para conhecimento da qualidade e
potencialidade do germoplasma de uma videira, para se
patentear a criação de um vinho tipicamente paulista é
necessário o fingerprinting do genoma da videira
utilizada para a fabricação. Ou seja, para o
estabelecimento de uma coleção genética com as
principais variedades de uvas destinadas à produção de
vinhos comuns, finos e derivados, a caracterização
genética é importante para se criar o perfil genéticomolecular característico da cultivar de videira.
Principalmente para cultivares que não foram ainda
caracterizadas geneticamente como a uva Máximo IAC
138 desenvolvida em 1946 pelo Dr. Santos Costa no
instituto agronômico através da hibridização entre uma
Shiraz e Seibel (híbrido de V. vinifera desenvolvido na
França para tolerância a doenças), assim como outros
cultivares nacionais como Rainha, Madalena.
Ampelografia, método de utilização generalizada na
identificação de cultivares de uva pela análise e
comparação de características morfológicas de folhas,
tipo de brotos, cachos e tipo de baga.
Apresenta desvantagens inerentes ao fato de utilizar as
características fenotípicas da videira, características
influenciadas pelo ambiente.
•
•
CÉLULA: UNIDADE FUNDAMENTAL DOS ORGANISMOS QUE DÁ ORIGEM A OUTRA CÉLULA
COMPONENTES –PAREDE CELULAR, CITOPLASMA, ORGANELAS, NÚCLEO COM MATERIAL
GENÉTICO (MASSA COMPACTA DE ÁCIDOS NUCLÉICOS LIGADOS A PROTEÍNAS
ESPECÍFICAS CHAMADAS CROMATINA QUE NO ESTÁGIO DE DIVISÃO CELULAR PODE SER
VISTA NA FORMA DE PARTÍCULAS LARGAS: OS CROMOSSOMOS, OS QUAIS SÃO
DUPLICADOS LEVANDO A INFORMAÇÃO GENÉTICA.
COMPOSIÇÃO DOS ÁCIDOS NUCLÉICOS:
WATSON & CRICK (1953): TEORIA DA DUPLA HÉLICE DO DNA
AS 2 FITAS DA CADEIA
POLINUCLEOTÍDEO SÃO
CONECTADAS POR
LIGAÇÕES DE
HIDROGÊNIO ENTRE AS
BASES NITROGENADAS:
PORTANTO A ADENINA SE
LIGA APENAS A TIMINA
(OU URACILA) E A
GUANINA APENAS A
CITOSINA. SÃO
CHAMADAS BASES
COMPLEMENTARES EM
REAÇÕES DE
PAREAMENTO DE BASES
.
-PCRTÉCNICA QUE
AMPLIFICA
SEQUÊNCIAS DE
DNA IN VITROMILLIS E
OUTROS (1987) –
PRINCÍPIO
KORONA E
OUTROS (1971).
UTILIZA A TAQ
DNA
POLIMERASEESTÁVEL A ALTA
TEMPERATURA
Marcadores Moleculares
Visando caracterizar os cultivares de videira, tentou-se
estabelecer um fingerprinting específico para cada
cultivar, através da metodologia molecular Expressed
sequence tag polymorphism (ESTP), aliada à restrição de
sítios específicos.
Marcadores ESTP (Expressed sequence tag
polymorphism) podem ser facilmente testados por PCR
(polymerase chain reaction) e são conhecidos ser mais
conservados que os microsatélites.
Figura2. Perfil de PCR com 9 EST-primers para as cultivares A= Máximo, B=Madalena,
C=Rainha.
136/107e108/Ra e Mx: PspHI, BstEII, BseRI, StuI
136/107e108/Md: PspHI, BstEII, BseRI,SduI, PspXI
28/121/Mx; BbvI, TseI, BsvI, Eco5I, GsuI, PspXI
28/121/Ra: /Mx; BsvI, Eco5I. GsuI, PspXI