Transcript Polybrene实验方法

低离子聚凝胺技术
原理
聚凝胺（Polybrene），一种高价离子季胺
盐多聚物，溶解后能产生很多正电荷，可以中
和红细胞表面的负电荷，使红细胞之间距离减
小，能引起正常红细胞可逆性的非特异性凝集。
如果是抗体致敏的红细胞被聚凝胺凝集，则凝
集不可逆。
LISS(低离子强度溶液)的原理
抗
体
抗
原
静电作用力
非离子
当溶液中缺少离子时，抗原抗体之间的静电作用力较强
抗
原
抗
体
静电作用力
离子
当溶液中离子增多时，抗原抗体之间的静电作用力减弱
基本操作方法
1、试管中加入待检血清或血浆1滴
2、加入用LIM溶液配置的2~3的红细胞悬液2~3滴
3、摇匀，室温放置1分钟（时间长，效果好）
4、加Polybrene试剂1滴，混匀后3400rpm离心15秒
5、轻摇观察由Polybrene引起的红细胞非特异性凝
集，若未见红细胞凝集则需重做试验
6、加入1滴重悬液，轻摇观察结果
由Polybrene引起的非特异性凝集应在1分钟内
完全散开，若是由免疫抗体引起的凝集反应则不会
散开
聚凝胺(Polybrene)配血方法
患
者
主
侧
献
血
者
次
侧

室温放置
1 分钟
主次侧均
加聚凝胺
聚凝胺(Polybrene)配血方法
阳
性
离
心
聚凝胺引起
红细胞非特
异性凝集
主次侧均
加重悬液
看结果
阴
性
经典操作方法
1、试管中加2滴待检血清或血浆，加1滴试剂红细胞
2、 加LIM溶液0.6毫升（或12滴）混匀，室温放置1
分钟
3、加Polybrene试剂2滴，混匀后3400rpm离心15秒
4、倒去上清液，轻摇观察由Polybrene引起的红细胞
非特异性凝集，若未见红细胞凝集则需重做试验
4、 加入1滴重悬液，轻摇观察结果
由Polybrene引起的非特异性凝集应在1分钟内
完全散开，若是由免疫抗体引起的凝集反应则不会
散开
结果判定
阴性结果：红细胞迅速散开，并在1分钟内完全散开
阳性结果：红细胞不完全散开，弱凝集可能在30分钟
内明显减弱或消失，因此，以立刻观察结
果为准
质控试验：可以用阳性对照液代替待检血清，按同样
步骤进行质控试验，结果应为“1+”的弱
凝
集
说明及注意事项
1、配置LIM红细胞悬液：
取抗凝或不抗凝血样标本的压积红细胞可直接
加LIM溶液配置悬液，若红细胞中含有较多血清或
血浆，则需要用LIM溶液洗涤红细胞一次，红细胞
悬液为2~3%，该悬液可替代盐水红细胞悬液使用
2、加入血清量应严格按照操作方法，多加血清会提
高离子强度，降低致敏效果。
3、使用肝素抗凝的血浆配血需多加1滴Polybrene，
以中和肝素