溶血性贫血

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Transcript 溶血性贫血

溶血性贫血的
实验室检测
定义:
溶血性贫血:指各种原因导致红细
胞生存时间缩短、破坏增多或加速,
而骨髓造血功能不能相应代偿而发
生的一类贫血。
红细胞在血管内破坏者为血管内溶
血,在血管外破坏者为血管外溶血。
溶血性贫血中部分为先天性的
,与遗传有关系,如:地中海
贫血、球形红细胞增多症等;
部分为后天获得,如:自身免
疫性溶血性贫血、PNH等。
• 溶血性贫血的临床表现:贫血、黄
疸(主要以间胆高为主)、脾大、
血网织红细胞比例明显增高、血涂
片观察可见破碎、球形、椭圆形、
口形、靶形等异常形态红细胞,甚
至可见幼红细胞,血清结合珠蛋白
降低或消失,LDH(主要LDH2)增高
,尿胆原增高,甚至可见血红蛋白
尿或含铁血黄素尿,红细胞寿命缩
短等
• 简单复习一下红细胞的
结构:
• 1.成熟红细胞为双凹圆
盘状、无核细胞
• 2.主要成分:血红蛋白
=血红素+珠蛋白;血红
蛋白成分:HbA(α2β2
)97%,其他为HbA2(
α2δ2)HbF(α2γ2)
• 3.红细胞内重要的酶:
G-6-PD,PK
一、溶血性贫血的过筛实验
目的:证明有红细胞破坏现象
(一)血浆游离血红蛋白的检
测
(二)血清结合珠蛋白检测
(三)血浆高铁血红素清蛋白
检测
(四)尿含铁血黄素试验
(五)红细胞寿命测定
二 、以先天性或遗传性溶血性贫血
为主的相关实验
(一)红细胞膜缺陷的检测
• 插入膜骨架图片
1.红细胞渗透脆性试验
红细胞在低渗氯化钠溶
液中细胞膨胀甚至破裂而溶
血。该试验是测定红细胞对
不同浓度低渗氯化钠溶血的
抵抗力,即红细胞的渗透脆
性。
2.红细胞孵育渗透脆性试验
红细胞孵育过程中,葡萄糖的
消耗增加,贮备的ATP减少,导
致红细胞膜对阳离子的主动传
递受阻,钠离子在鸿细胞内集
聚,细胞膨胀,渗透脆性增加。
3.自身溶血试验及纠正试验
先天性非球性细胞性溶血性贫血病人,由
于红细胞内酶缺陷,葡萄糖酵解障碍不能
提供足量ATP,以维持红细胞内的钠泵作
用。病人红细胞无菌条件夏在自身血浆中
温育48H,使ATP储备减少,钠泵作用减弱,
导致溶血增强。在孵育过程中,分别加入
葡萄糖和ATP作为纠正物,并以氯化钠溶
液为对照,观察溶血是否被纠正。
• 4.红细胞膜蛋白的十二炕
基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶
电泳(SDS-PAGE)
• HbS 、HbE 病都有区带1
、2 的缺失或结构异常,
HbS 常见4. I 蛋白有缺陷
。
(二) 红细胞酶缺陷的检测
红细胞酶缺陷所致溶血性贫血
又称红细胞酶病,指参与红细
胞代谢(主要是糖代谢)的酶
由于基因缺乏,导致活性改变
而发生溶血的一组疾病。
1.高铁血红蛋白还原试验
有足量的NADPH存在下,反应液中高铁
血红蛋白能被高铁血红蛋白还原酶还
原成亚铁血红蛋白。
2.氰化物-抗环血酸试验
3.变形珠蛋白小体(Heinz 小
体)生成试验
4.葡萄糖-6-磷酸脱氢酶荧光斑
点试验和活性测定
5.丙酮酸激酶荧光筛选试验和活
性测定
(三)、珠蛋白生成异常的检
测
1.血红蛋白电泳
正常血红蛋
白电泳区带
2.胎儿血红蛋白酸洗脱试验
3.胎儿血红蛋白测定或HbF碱
变性试验
4.HbA2定量测定
5.不稳定血红蛋白测定:异丙
醇试验、热变性试验、血红
蛋白H 包涵体检查
6.红细胞镰变(HbS) 试验
7.HbS 溶解度试验
8.血红蛋白C 试验
9.限制性内切酶谱分析
二、后天获得的溶血性贫血的相
关实验
(一)自身免疫性溶血性贫血检
测
自身免疫性溶血性贫血
(AIHA)系体内免疫发生异常,
产生自身抗体或补体,结合在红
细胞膜上,红细胞破坏加速而引
起的一组溶血性贫血。
1.抗人球蛋白试验
不完全抗体无法架接量个邻
近的红细胞,而只能和一个红细胞抗原
相结合。抗人球蛋白抗体是完全抗体,
可与多个不完全抗体的Fc段相结合,导
致红细胞凝集现象,称为抗人球蛋白试
验阳性。直接抗人球蛋白试验阳性说明
病人红细胞表面上包被有不完全抗体。
而间接Coombs试验阳性则说明病人血清
中存在着不完全抗体。
2.冷凝集素试验
3.冷热双相溶血试验
(二) 阵发性睡眠性血红蛋白
尿症检测
阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)
为获得型红细胞膜缺陷引起的
慢性血管内溶血,常在睡眠时
加重,可伴发作性血红蛋白尿
和全血细胞减少症。
1.酸化溶血试验又称Ham试验
PNH患者的红细胞对补体敏感性增高,在酸
化的血清中(pH6.6-6.8),经37C孵育,
易溶血。
2.蔗糖溶血试验
蔗糖溶液离子浓度低,经孵育可加强补体
与红细胞膜的结合,使PNH患者的红细胞膜
上形成小孔,遂使蔗糖进入红细胞而导致
溶血。
3.蛇毒因子溶血试验
4.CD59检测
部分图片取自<<血液学与血液学检验>>,<<现代血细胞学图鉴>>